脂肪组织来源间充质干细胞外泌体通过RAF/MEK/MAPK通路促进口腔白斑恶变的机制研究

本研究针对口腔白斑（OLK）恶变机制不明的临床难题，首都医科大学附属北京口腔医院团队发现DIRAS2在OLK组织中异常高表达。通过构建DIRAS2flox/flox条件敲除小鼠模型结合4NQO诱导实验，首次证实上皮特异性敲除DIRAS2可通过抑制RAF/MEK/MAPK信号通路延缓舌癌前病变进展，为OLK的靶向干预提供了新策略。

　　

口腔白斑（OLK）作为最常见的口腔潜在恶性病变，其恶变率可达40%，严重威胁患者生命健康。尽管上皮dysplasia（异常增生）被公认为OLK恶变的关键预测指标，但驱动这一病理过程的核心分子机制始终是未解之谜。近年来，RAS超家族成员DIRAS2在多种肿瘤中的异常表达引发关注，这个与RAS蛋白有30%-40%同源性的小GTP酶，是否在OLK的癌变过程中扮演重要角色？这一科学问题亟待解答。

首都医科大学附属北京口腔医院的研究团队在《Tissue and Cell》发表的重要研究，首次揭示了DIRAS2通过RAF/MEK/MAPK信号通路促进OLK恶变的分子机制。研究人员采用多组学技术分析发现，DIRAS2在OLK患者组织中显著高表达；进而通过Crispr/Cas9基因编辑技术构建上皮特异性DIRAS2条件敲除小鼠（K14-Cre;DIRAS2^flox/flox），结合4NQO化学诱导模型，系统解析了DIRAS2在癌前病变中的生物学功能。

关键技术包括：10例OLK患者组织样本的免疫组化分析、Crispr/Cas9介导的条件性基因敲除小鼠模型构建、4NQO诱导的舌癌前病变模型建立、MAPK信号通路蛋白的Western blot检测等。

【DIRAS2在人类口腔白斑组织中高表达】
免疫组化结果显示，DIRAS2主要表达于基底层和棘层细胞质，在OLK组织中的表达水平显著高于正常口腔黏膜（P<0.05），提示其可能参与OLK的发生发展。

【DIRAS2促进OLK细胞体外增殖】
通过构建DIRAS2敲低的人异常增生口腔角质形成细胞系，发现敲低DIRAS2可显著抑制细胞增殖能力，证实DIRAS2具有促增殖作用。

【上皮特异性DIRAS2敲除延缓癌前病变进展】
在4NQO诱导的小鼠模型中，上皮特异性敲除DIRAS2显著抑制舌部癌前病变的进展。组织学分析显示，实验组病变程度较对照组明显减轻。

【MAPK信号通路调控机制】
Western blot检测发现，DIRAS2敲除后，RAF/MEK/MAPK信号通路关键蛋白表达下调，提示DIRAS2可能通过激活该通路促进上皮细胞异常增殖。

这项研究首次阐明DIRAS2作为OLK恶变的新型驱动因子，通过激活RAF/MEK/MAPK信号通路促进上皮细胞增殖和dysplasia进展。该发现不仅为理解OLK恶变机制提供了新视角，更重要的是为开发靶向DIRAS2的干预策略奠定了理论基础。鉴于MAPK信号通路在肿瘤发生中的核心地位，针对DIRAS2-MAPK轴的靶向治疗可能成为预防OLK恶变的新突破口。研究采用的基因编辑动物模型也为后续转化医学研究提供了重要工具平台。

值得注意的是，DIRAS2作为RAS家族新成员，其在不同肿瘤中可能发挥抑癌或促癌的双重作用。本研究聚焦口腔癌前病变阶段，揭示了DIRAS2的促癌功能，为肿瘤发生早期事件的分子机制研究提供了范式。团队后续将深入探索DIRAS2上游调控网络及其与微环境互作机制，为临床转化提供更全面的科学依据。