马铃薯品种Ambari local的微繁体系建立及遗传保真性分析

为解决印度本土马铃薯品种Ambari local繁殖效率低、缺乏病毒-free种苗等问题，研究人员开发了基于meta-Topolin(mT)和IBA的MS培养基单相培养体系，实现4周内4.7个不定芽/外植体的增殖效率，经ISSR和SCoT标记验证遗传稳定性，为土著品种商业化提供技术支撑。

　　

在印度东北部的田间地头，生长着一种名为Ambari local的特殊马铃薯品种。这种单薯重仅16-17克的小型品种，却蕴含着每100克鲜重高达105微克的β-胡萝卜素和23.3%的淀粉含量。然而，与商业品种相比，这种土著马铃薯正面临严峻挑战——传统块茎繁殖方式导致病毒积累、繁殖系数低下（每个块茎仅能产生4-5个新个体），加之其完全未被开发的基因库，使得这个营养丰富的品种长期处于商业化利用的盲区。更令人担忧的是，目前针对该品种的有效繁殖和遗传改良方法完全空白。

针对这一现状，印度农业研究委员会（ICAR）东北山区研究中心的科研团队在《South African Journal of Botany》发表重要研究成果。研究人员创新性地采用单相培养策略，通过系统比较6-BA、激动素、玉米素和新型细胞分裂素meta-Topolin(mT)的效应，结合流式细胞术和分子标记技术，建立了该土著品种的高效微繁体系。

关键技术方法包括：以块茎萌芽为外植体，在MS基础培养基中测试0.5-1.5 mg l^-1不同细胞分裂素（BA、KT、Zea、mT）的芽诱导效率；采用2.0 mg l^-1 IBA诱导生根；通过流式细胞术检测倍性稳定性；使用ISSR（简单序列重复区间）和SCoT（起始密码子靶向多态性）引物进行遗传保真性分析。

研究结果：

1. 植物材料：从ICAR-NEH地区采集的块茎经0.03% Bavistin?灭菌后，取2-3 cm萌芽作为外植体。

2. 体外多芽启动、增殖和伸长：1.0 mg l^-1 mT处理组4周后获得最高增殖系数（4.7个芽/外植体），显著优于其他细胞分裂素（BA 3.2个，Zea 2.8个）。

3. 体外生根和块茎形成：2.0 mg l^-1 IBA诱导产生19.7条根/芽，而mT与IBA组合（1.0+2.0 mg l^-1）实现单相培养中芽-根-块茎同步发育。

4. 驯化和田间表现：组培苗在椰糠中100%存活，移栽田间后保持80%存活率，田间生长性状与母本无显著差异。

5. 细胞学和遗传保真性：流式细胞术证实再生植株保持原始四倍体水平（2n=4x=48），ISSR和SCoT分析显示所有再生株系呈现单态性条带模式。

这项研究首次实现了Ambari local品种的单相培养体系突破，其创新性体现在三个方面：首先，发现mT对该土著品种的芽诱导效率比传统细胞分裂素提高46.9%；其次，建立的1.0 mg l^-1 mT + 2.0 mg l^-1 IBA组合方案，使繁殖周期缩短至4周，年理论繁殖系数可达10⁸数量级；最重要的是，通过分子标记证实再生植株遗传稳定性，为后续种质创新奠定基础。该技术体系不仅解决了土著品种繁殖瓶颈，更为全球3000多个马铃薯地方品种的保护性开发提供了可借鉴的技术范式。正如研究者Bandyopadhyay等强调的，这项成果将直接服务于印度东北部小农户——通过提供高质量种苗，可使当地马铃薯产量提升30-40%，同时保留其独特的营养品质特征。