裸鼠重复给药damnacanthal诱导的轻度可逆肾毒性机制及治疗安全性的临床前评估

本研究针对抗癌候选药物damnacanthal(DAM)多次给药潜在的肾毒性问题，通过建立裸鼠3/7/14次重复给药模型，结合肾功能生化检测、肾脏超声、组织病理学及KIM-1/caspase-3等分子标志物分析，证实20 mg/kg DAM(DAM20)重复给药仅引起轻度可逆性肾损伤，未出现不可逆纤维化，为推进该抗癌药物的临床转化提供了重要安全性依据。

　　

抗癌药物开发始终面临疗效与毒副作用的平衡难题。来自泰国Thammasat University（泰国国立法政大学）的研究团队聚焦天然蒽醌化合物damnacanthal(DAM)——一种从海巴戟(Morinda citrifolia)根部提取的潜在结直肠癌治疗药物。前期研究显示20 mg/kg剂量(DAM20)对裸鼠移植瘤具有显著抑制作用，但其治疗需多次给药，而长期使用蒽醌类化合物可能引发肾毒性的风险尚未明确。为此，研究人员在《Toxicology Reports》发表论文，系统评估了DAM20重复给药的肾脏安全性。

研究采用3/7/14次给药方案，通过多维度技术手段进行评价：建立BALB/cALcl-nu/nu裸鼠模型进行重复给药实验；采用超声检测肾脏体积和血流动力学参数；通过全自动生化分析仪检测血尿素氮(BUN)、尿肌酐等肾功能指标；运用H&E、PAS和Masson染色进行组织病理学分析；采用免疫组化检测caspase-3活化及巨噬细胞标志物F4/80/CD206；TUNEL法检测DNA片段化；qRT-PCR定量肾损伤分子1(KIM-1)表达。

3.1 生理指标监测
所有给药组小鼠均未出现体重显著下降或异常行为，排除急性毒性反应。值得注意的是，14次给药组肾脏体积显著增大（p<0.05），提示可能存在液体潴留。

3.3 尿液生化分析
7次给药组出现尿微量白蛋白显著升高（19.59±4.48 vs 12.48±2.25 mg/dL，p=0.028），但14次给药时该指标恢复正常，显示损伤的可逆性。14次给药组尿肌酐水平显著增加（53.19±5.55 vs 42.75±7.27 mg/dL，p=0.030），提示慢性肾脏改变。

3.4 血液生化特征
7次给药组出现BUN降低（18.25±1.94 vs 24.00±1.40 mg/dL，p<0.05）和尿肌酐/血肌酐比(UCr/SCr)升高（263.4±50.92 vs 127.97±3.61，p<0.05），反映早期肾小管功能紊乱。

3.5 组织病理学
H&E染色显示所有给药组肾小球和肾小管结构完整，无萎缩或坏死。特殊染色证实DAM300/2000单次给药可引起纤维连接蛋白和胶原沉积（p<0.05），但DAM20重复给药未诱发类似改变。

3.6 分子机制研究
免疫组化显示仅1只14次给药小鼠出现微弱caspase-3活化（0.14%阳性区域），TUNEL检测均为阴性，排除广泛凋亡。所有组别均未检测到F4/80⁺或CD206⁺巨噬细胞浸润。KIM-1表达在14次给药组显著上调（p=0.012），提示亚临床肾小管损伤。

这项研究首次系统阐明DAM20重复给药仅引起裸鼠轻度可逆性肾损伤，其特点为：①早期表现为尿微量白蛋白漏出和BUN异常；②持续给药可出现肾脏体积增大和尿肌酐升高；③不伴随凋亡、炎症浸润或纤维化等不可逆损伤。特别值得注意的是，KIM-1作为敏感的生物标志物，能在组织病理学改变出现前检测到肾小管损伤，这对临床用药监测具有重要参考价值。

研究结果支持DAM20作为抗癌药物的开发价值，其肾毒性风险可控且具有可逆性。但作者强调仍需扩大样本量和延长观察周期，以全面评估长期用药安全性。该研究为天然产物抗癌药物的毒性评价提供了范式，即整合传统病理学与分子标志物检测，可更灵敏地发现亚临床器官损伤。未来研究可进一步探索DAM20对肾脏修复机制的具体调控途径，以及开发针对性的肾保护策略。