CXCR4+单核细胞通过RUNX3调控的趋化因子轴促进湿性年龄相关性黄斑变性新生血管形成的机制研究

本研究针对湿性年龄相关性黄斑变性（wAMD）中抗VEGF疗法应答不足的临床难题，通过单细胞转录组与激光诱导CNV模型，首次揭示MMP2+内皮细胞（ECs）的干性特征及CXCR4+单核细胞通过CXCL12-CXCR4轴驱动病理性血管生成的作用，发现RUNX3是调控促血管单核细胞分化的关键转录因子，为开发靶向趋化因子信号通路的联合疗法提供新靶点。

　　

湿性年龄相关性黄斑变性（wAMD）作为老年人致盲的首要原因，其核心病理特征——脉络膜新生血管（CNV）的形成，至今仍是治疗难点。尽管抗血管内皮生长因子（VEGF）药物已成为临床金标准，但约30%患者响应不佳，这提示非VEGF依赖的血管生成机制在疾病进展中扮演重要角色。近年研究发现，氧化应激与炎症的恶性循环会激活趋化因子信号网络，但具体哪些细胞亚群通过何种分子机制驱动这一过程，始终是未解之谜。

来自上海斯莱克实验动物有限公司合作团队的研究人员通过整合激光诱导CNV模型、批量RNA测序和单细胞转录组分析，首次系统阐明了MMP2⁺内皮细胞（ECs）与CXCR4⁺单核细胞在wAMD中的协同作用机制。该研究发表于《Experimental Eye Research》，揭示了RUNX3转录因子作为调控单核细胞促血管功能的核心开关，为开发靶向趋化因子的联合疗法提供了理论依据。

研究采用四大关键技术：激光诱导建立小鼠wAMD模型、批量RNA测序分析RPE-脉络膜-巩膜复合体差异基因、单细胞转录组解析细胞异质性、以及多重免疫组化（mIHC）验证关键蛋白表达。实验选用6-8周龄C57BL/6雄性小鼠，通过532nm激光破坏Bruch膜模拟人类wAMD病理特征。

关键研究发现：

1. MMP2⁺ECs的干性特征
   单细胞分析鉴定出具有双重特性的内皮细胞亚群，这些细胞不仅高表达基质金属蛋白酶2（MMP2），还呈现干细胞相关基因特征，提示其可能来源于内皮分化失调途径。

2. CXCR4⁺单核细胞的核心作用
   通过配体-受体互作分析发现，CXCL12-CXCR4轴是单核细胞与MMP2⁺ECs通讯的关键介质。基因敲除实验证实该通路缺失可显著抑制CNV面积。

3. RUNX3的调控机制
   转录因子网络分析将RUNX3锁定为调控单核细胞促血管分化的主调控因子，其通过激活下游趋化因子受体表达，促进单核细胞向病变部位募集。

研究意义
该工作首次建立了"RUNX3-趋化因子-单核细胞-内皮细胞"的级联调控网络，突破性地指出：靶向RUNX3可能同时阻断炎症与血管生成两条通路。与现有抗VEGF疗法相比，这种策略有望解决治疗抵抗问题。研究者特别强调，MMP2⁺ECs的干样特性或为疾病复发根源，而CXCR4⁺单核细胞可作为治疗响应的预测标志物。这些发现不仅深化了对wAMD发病机制的认识，更为开发精准联合治疗方案提供了新思路。