综述：葡萄球菌蛋白A的多重优势：从N端到C端的探索之旅

这篇综述创新性地提出基于弹性蛋白样多肽（ELPs）标签的集成化酶工程策略，通过融合(VPGVG)n（n=30/40/50）温度响应模块与β-葡萄糖苷酶（Glu），实现从发酵液一步完成重组酶的分离纯化与固定化。研究证实ELPs标签不仅利用其相变特性简化纯化流程，更通过疏水作用增强酶与载体的吸附力，使固定化Glu的热稳定性、pH稳定性和重复使用性显著提升，在羧甲基纤维素（CMC）水解中与纤维素酶协同使糖化率提升27.26%-28.05%。

　　

Abstract
在生物催化领域，酶的高效利用面临操作稳定性差、回收困难等挑战。本研究开创性地将弹性蛋白样多肽（ELPs）的温度响应特性与酶工程相结合，为工业酶应用提供新思路。

Introduction
作为生物催化剂的核心，酶在食品、医药等领域应用广泛，但传统纯化工艺成本高昂且步骤繁琐。ELPs由重复五肽序列(VPGXG)_n构成，其独特的可逆相变行为为重组蛋白纯化开辟新途径。β-葡萄糖苷酶作为水解β-糖苷键的关键酶，其工业化应用亟需创新性解决方案。

Materials
实验采用全基因合成的pET-Glu-linker-ELP_30/40/50重组质粒，通过大肠杆菌表达系统生产融合蛋白。

Purification and condition optimization
温度诱导纯化实验显示，ELP₅₀标签在35℃时沉淀效率达92%，纯化倍数提高4.3倍。动态光散射证实相变后粒径增大至800nm，为后续固定化奠定基础。

Conclusion
该研究成功构建ELPs-Glu融合体系，利用ELPs双重特性实现：

1. 温度触发纯化：仅需3次相变循环即获>95%纯度
2. 疏水驱动固定化：载体吸附量达68mg/g，较游离酶半衰期延长7倍
3. 协同催化增效：与纤维素酶联用使CMC转化率突破28%

Funding
国家自然科学基金（22278191）支持

CRediT authorship contribution statement
多学科团队协作完成从分子设计到应用验证的全链条研究

Declaration of Competing Interest
作者声明无利益冲突