piR-23通过靶向PTGS2调控猪颗粒细胞凋亡的分子机制及其在卵泡闭锁中的作用

来自国内的研究人员针对卵泡闭锁过程中颗粒细胞(GC)凋亡的调控难题，开展piR-23靶向前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)的机制研究。通过双荧光素酶报告基因等实验证实piR-23通过结合PTGS2的3'UTR抑制其表达，从而发挥抗凋亡作用，为猪繁殖效率提升提供新靶点。

　　

在生殖生物学领域，Piwi相互作用RNA(piRNA)作为一类小型非编码RNA，因其在转座子调控和基因沉默中的作用备受关注。卵泡闭锁这一涉及颗粒细胞(GC)凋亡的关键生理过程，直接影响雌性动物的繁殖效率。有趣的是，研究人员发现piR-23在猪健康卵泡(HF)和早期闭锁卵泡(AF)中存在差异表达现象，而前列腺素合成关键酶PTGS2可能是其潜在靶点。

实验团队从猪卵巢中分离获得HF和AF来源的颗粒细胞，通过转染piR-23模拟物/抑制剂及PTGS2小干扰RNA(siRNA)，结合膜联蛋白V-FITC/PI染色和CCK-8检测等技术手段，系统评估细胞凋亡状况。双荧光素酶报告基因实验揭示piR-23可直接结合PTGS2 mRNA的3'非翻译区(3'UTR)，qRT-PCR和蛋白质印迹进一步证实该结合导致PTGS2转录和翻译水平的下调。

值得注意的是，闭锁卵泡中的颗粒细胞呈现piR-23低表达和PTGS2高表达的特征。功能实验显示：过表达piR-23显著抑制颗粒细胞凋亡，而抑制piR-23则促进凋亡；当敲低PTGS2时，细胞凋亡受到明显抑制。更巧妙的是，共转染piR-23抑制剂和PTGS2 siRNA可逆转单独抑制piR-23引发的促凋亡效应，充分证明PTGS2是piR-23的功能性作用靶点。

这项研究首次阐明piR-23-PTGS2调控轴在猪颗粒细胞凋亡中的分子机制，为理解卵泡闭锁的表观遗传调控提供新视角，对提高家畜繁殖力具有重要理论价值。