伊朗西部高毒力肺炎克雷伯菌分离株的多位点序列分型评估及新型序列型发现

（编辑推荐）本研究通过表型（string test/potassium tellurite resistance）和基因型（PCR检测iucA/iroB/iutA/rmpA等毒力基因）方法，首次在伊朗西部医院患者样本中发现8个新型高毒力肺炎克雷伯菌（hvKP）序列型（ST-7466至ST-7473），揭示了hvKP菌株的遗传多样性及其对公共卫生的威胁。

　　

引言

肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）已成为全球重要的条件致病菌，其高毒力菌株（hvKP）可引发肝脓肿、肺炎、脑膜炎等严重感染，死亡率高达37%。与传统肺炎克雷伯菌（cKP）相比，hvKP具有独特的毒力特征：超黏液表型（黏液丝试验≥5 mm）、钾亚碲酸盐抗性，以及携带rmpA（胞外多糖调控基因）、iutA（铁载体基因）等毒力因子。伊朗西部医疗中心近期出现多例hvKP相关重症感染，但该地区hvKP的分子流行病学特征尚未明确。

研究方法

研究团队从伊朗伊拉姆省三家医院采集52例非重复肺炎克雷伯菌临床分离株（来源包括血液、胸水、尿液等），通过以下方法鉴定hvKP：

1. 1.

   表型检测：黏液丝试验阳性且/或在含1%钾亚碲酸盐的麦康凯培养基（MCKT）上生长

2. 2.

   基因检测：PCR扩增mrkD（菌毛基因）、iroB/iucA/iutA（铁摄取基因）、rmpA等标志性毒力基因

3. 3.

   分子分型：对7个管家基因（gapA/infB/mdh/pgi/phoE/rpoB/tonB）进行多位点序列分型（MLST），使用Pasteur研究所数据库比对新型序列型

关键发现

1. 1.

   毒力特征：

   • •

     23.1%菌株携带iucA，15.4%携带rmpA，9.6%携带iutA

   • •

     黏液丝试验阳性率48.07%，钾亚碲酸盐抗性率46.2%

   • •

     8株同时满足表型阳性且携带≥1个毒力基因的hvKP标准

2. 2.

   新型序列型：

   • •

     发现ST-7466至ST-7473共8个全新序列型，已提交Pasteur研究所数据库（提交号BIGSdb_20240619114104_3057922_16382）

   • •

     系统发育分析显示新STs与已知STs存在显著差异（如ST-7466与ST231等6个型别存在3-4个等位基因差异）

3. 3.

   临床分布：

   • •

     胸水分离株中hvKP占比最高（37.5%），可能与细菌荚膜增强组织定植能力有关

   • •

     尿液样本虽占比42%，但hvKP检出率较低

讨论与意义

该研究首次揭示了伊朗西部hvKP的独特遗传背景：

• •

  诊断价值：证实黏液丝试验与钾亚碲酸盐抗性的联合检测可作为hvKP筛查的可靠方案

• •

  进化特征：新发现的STs呈现高度遗传多样性，提示该地区hvKP可能独立进化

• •

  临床警示：胸水样本的高阳性率表明需警惕hvKP引发的胸腔感染

研究局限性在于样本量较小，未来需扩大采样以明确STs的地理传播规律。这些发现为中东地区hvKP的监测提供了重要分子标记，对指导临床防控具有重要意义。