巴西蓝蛋卡皮拉鸡MHC II类B-Lβ基因免疫遗传多样性及其在抗病育种中的潜在价值

这篇研究通过靶向测序技术分析了100只巴西蓝蛋卡皮拉鸡（自由放养）的MHC II类B-Lβ基因（B-LβI和B-LβII）多态性，鉴定出15种独特核苷酸序列，其中5种为首次报道的新等位基因。研究揭示了该种群在主要组织相容性复合体（MHC）基因上的显著遗传多样性，为利用本土鸡种资源开展抗病育种（如针对沙门氏菌属细菌等病原体）提供了重要分子依据，同时强调了保护地方品种作为功能性遗传多样性库的战略意义。

　　

1 引言

巴西卡皮拉鸡作为自由放养的地方鸡种，其产蓝蛋的特殊表型源于南美洲阿劳卡纳鸡（Araucana）的基因渗入。这类鸡种因未经历人工选择而保留极高的遗传多样性，尤其在免疫相关基因——主要组织相容性复合体（MHC）上表现突出。MHC II类分子由α链（B-Lα，单拷贝单态）和β链（B-Lβ，多基因多态）构成，其中B-LβI和B-LβII基因因高表达成为研究焦点。前期研究已证实卡皮拉鸡MHC I类B-F基因存在23个等位基因，暗示其II类基因可能同样具有丰富多态性，这为探索其抗病机制（如对沙门氏菌的抵抗力）提供了理论基础。

2 材料与方法

研究团队从巴西南里奥格兰德州采集100只蓝蛋卡皮拉鸡外周血样本，采用GeneJET?试剂盒提取DNA。通过特异性引物（如5’-CGTTCTTCTTCTRCGGTRBGAT-3’）扩增B-LβI/B-LβII基因外显子2区域，获得267bp（引物1/3）和277bp（引物2/3）片段。PCR产物经克隆、TOPOTA载体转化和大肠杆菌培养后，使用ABI Prism 3130测序仪进行荧光标记测序。序列经Chromas 1.45校正后，通过Clustal W与NCBI数据库已知等位基因比对，新等位基因按BLB*CCXa/b格式命名并提交GenBank（登录号PV637473-PV637476等）。

3 结果

核苷酸序列：16只代表性个体中鉴定出15种序列（11个B-LβII和4个B-LβI），其中5个为新等位基因。B-LβII基因变异尤为显著，与标准序列B-LB12major相比，存在10个双变异位点（如132、154）、9个三变异位点（如11、39）及3个四变异位点（22、94、158）。B-LβI基因相对保守，但新序列BLB*CC4a仍在6个位点（21、23、25等）呈现差异。

氨基酸序列：翻译后的多肽显示B-LβII在33个位点（如4、6、8等）存在变异，而B-LβI仅8个位点变异。值得注意的是，所有序列均保守保留了抗原结合关键区域：14-18位的糖结合位点（-NGTER-）和10/74位的二硫键（S-S）。

4 讨论

相比商业鸡种，卡皮拉鸡的MHC II类基因多样性更为丰富，这与Martin等关于全球鸡MHC多态性的研究一致。B-LβII基因的高变异性可能增强其对多种病原体（如沙门氏菌）的抗原呈递能力。特别值得注意的是，新发现的BLBCC9b等位基因与已知序列DQ008585存在9处差异，暗示其可能编码具有独特免疫应答特性的蛋白。这种多样性为抗病育种提供了宝贵资源——通过定向选育携带特定等位基因（如BLBCC3a）的个体，可培育出对特定疾病更具抵抗力的商业鸡系。

5 结论

巴西蓝蛋卡皮拉鸡在MHC II类B-Lβ基因上展现出惊人的免疫遗传多样性，包括5个具有潜在应用价值的新等位基因。该研究不仅为理解家禽免疫应答的分子基础提供了新视角，更凸显了保护地方鸡种作为遗传资源库的重要性。未来可通过整合基因组选择技术，将这些天然变异转化为提升商业鸡群健康水平的育种策略。