UXT-V2通过K48连接的多聚泛素化促进HSV-2糖蛋白B降解的分子机制研究

本研究针对单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染机制不明的问题，揭示了宿主蛋白UXT-V2通过招募E3泛素连接酶TRIM21促进HSV-2糖蛋白B(gB)的K48连接泛素化降解，从而抑制病毒复制的新机制。研究发现UXT-V2通过蛋白酶体途径特异性降解gB，而HSV-2则通过复制依赖性方式降低UXT-V2蛋白水平以逃逸宿主防御。该研究为理解HSV-2与宿主互作提供了新视角，发表在《Virologica Sinica》。

　　

单纯疱疹病毒2型(HSV-2)是引起生殖器疱疹的主要病原体，全球约13%的15-49岁人群感染该病毒。HSV-2感染不仅导致终身潜伏感染，还会增加HIV-1感染风险。尽管HSV-2糖蛋白B(gB)在病毒入侵和细胞间传播中起关键作用，但宿主如何调控gB的机制尚不清楚。与此同时，宿主蛋白UXT-V2作为α型前折叠蛋白家族成员，在肿瘤发生发展中具有重要作用，但其在病毒感染中的功能仍是未解之谜。

为阐明这些问题，Chuntian Li等研究人员在《Virologica Sinica》发表的研究揭示了UXT-V2通过泛素-蛋白酶体途径调控HSV-2 gB降解的新机制。研究采用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建UXT-V2和TRIM21敲除细胞系，通过免疫共沉淀(Co-IP)结合质谱分析鉴定蛋白互作，利用荧光素酶报告基因系统分析信号通路激活，并在小鼠模型中验证体内发现。

研究结果显示：

UXT-V2抑制HSV-2复制

通过过表达和基因敲除实验证实，UXT-V2能显著降低HSV-2 ICP0 mRNA水平、病毒蛋白VP5和gB表达量以及病毒产量。在Vero E6等不产生I型干扰素的细胞中，UXT-V2仍能抑制HSV-2复制，表明其作用不依赖NF-κB通路。

UXT-V2通过蛋白酶体途径下调HSV-2 gB表达

免疫共沉淀和质谱分析发现UXT-V2与gB直接相互作用。蛋白酶体抑制剂MG132能逆转UXT-V2诱导的gB降解，而溶酶体抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)无此效果，证实降解通过泛素-蛋白酶体系统进行。

UXT-V2促进gB的K48连接泛素化

使用HA标记的泛素突变体(HA-K48和HA-K63)证实，UXT-V2特异性促进gB的K48连接而非K63连接泛素化，这种修饰类型与蛋白质降解密切相关。

UXT-V2招募TRIM21介导gB泛素化

质谱分析鉴定出E3泛素连接酶TRIM21是UXT-V2相互作用蛋白。在TRIM21敲除细胞中，UXT-V2无法诱导gB的K48连接泛素化，证明TRIM21在此过程中起关键作用。

HSV-2以复制依赖性方式抑制UXT-V2表达

有趣的是，HSV-2感染会上调UXT-V2 mRNA水平但降低其蛋白含量。紫外线灭活病毒或DNA聚合酶抑制剂膦酰乙酸(PAA)处理可阻断这种效应，表明HSV-2通过主动复制机制对抗UXT-V2的抗病毒作用。

在小鼠感染模型中，免疫荧光染色显示HSV-2感染细胞中UXT-V2表达降低，验证了细胞实验发现。

这项研究首次阐明UXT-V2作为宿主限制因子通过促进gB降解抑制HSV-2复制的新机制，揭示了病毒与宿主间复杂的博弈关系。研究发现不仅拓展了对α型前折叠蛋白家族功能的认识，为HSV-2治疗提供了新靶点，更重要的是揭示了病毒通过下调宿主防御蛋白实现免疫逃逸的新策略。由于UXT-V2在多种肿瘤中异常表达，该研究也为理解病毒感染与肿瘤发生的关联提供了新思路。