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免疫组织化学技术在淋巴瘤和鉴别诊断中的应用
【字体： 大 中 小 】 时间：2000年09月02日 来源：
编辑推荐：
华西医科大学附属第一医院病理科
李甘地 刘卫平
成都 610041
近年来，免疫组化技术有了长足的进步。例如，抗原修复技术，可以用于石蜡包埋组织的新的单克隆抗体的出现等。
在石蜡切片上已经可能识别T、B细胞、组织细胞、树突状细胞、粒细胞等及其分化阶段。免疫组化已经成为淋巴造血系统疾病诊断中不可缺少的手段。
1. 用于石蜡包埋组织的抗体
随着越来越多的抗福尔马林单克隆抗体的出现和商品化，许多淋巴造血系统细胞的标记已可以在福尔马林固定，石蜡包埋的组织切片上证实。例如，T细胞表面抗原CD3，CD4，CD5，CD8，CD45RO等；B细胞标记CD20，CD21，CD45RA等；组织细胞标记CD68和树突状网状细胞标记CD35等等。表1列出可在石蜡切片上使用的常用抗体，这些常用抗体可以将95%的淋巴瘤分型。
2.
用于新鲜组织，冰冻切片，细胞离心涂片的标记（表2）由于抗福尔马林单克隆抗体的问世和新鲜组织的取材受到限制，目前用于新鲜组织，冰冻切片和细胞离心涂片的标记使用较少。但是某些标记，如CD10，目前还不能在石蜡切片上显示。
3.
免疫组化对区别良恶性淋巴结病变的价值
淋巴瘤与反应性增生的区别有时是相当困难的。例如，非霍奇金淋巴瘤和传染性单核细胞增多症、组织细胞性坏死性淋巴结炎等。免疫组化标记一般来说只能提示细胞来源和细胞分化程度，而对于良恶性鉴别的主要指标──增殖细胞的克隆性的鉴定，即增殖细胞是多克隆（提示反应性）或单克隆性（提示肿瘤性），并无很大的帮助。此处有以下几个例外，可提示单克隆性增生或淋巴瘤：
（1）轻链限制性表达：B细胞增生如果是单克隆性的，而且增生的克隆已经占据整个细胞群的大部分。就可以用Ig轻链（κ，λ）染色来证实。例如，MALT淋巴瘤，淋巴浆细胞性淋巴瘤，滤泡性淋巴瘤和骨髓瘤等的肿瘤细胞大部分的胞浆只表达一种免疫球蛋白
（immunoglobulin，Ig）轻链。这样的结果对于恶性的诊断有很大的参考价值。如果B细胞分化较差，可能不表达Ig。
（2）淋巴细胞标记的丢失或异常表达：
外周T细胞淋巴瘤常常丢失其表面抗原的一部分，最常见的是CD5或CD7，这提示T细胞淋巴瘤。B细胞淋巴瘤则可异常表达CD5或CD43，这需要冰冻切片染色。在石蜡切片上，由于目前能在石蜡组织上证明的T细胞表面抗原不很多（如CD3，CD4，CD5，CD8，CD43，CD45RO），所以不表达T细胞抗原，不等于说明存在单克隆性的细胞增生，也不能说明其来源。
（3）bcl-2癌蛋白： bcl-2癌基因的产物──bcl-2癌蛋白是细胞抗凋亡基因的产物。在分化和静止的B细胞的胞浆中有bcl-2癌蛋白的表达。在滤泡型淋巴瘤，90%以上的滤泡细胞有bcl-2的高表达，而在滤泡反应性增生的滤泡细胞则不表达bcl-2蛋白。因此bcl-2癌蛋白在区别滤泡型淋巴瘤和反应性滤泡增生上有相当的意义[9]。
4. 淋巴瘤和非造血系统肿瘤的区别
（1）小细胞恶性肿瘤：
小细胞肿瘤在日常外科病理工作中是常常遇到的。包括淋巴瘤、胚胎性横纹肌肉瘤、Ewing肉瘤、神经母细胞瘤、粒细胞肉瘤和神经内分泌癌等。对于淋巴瘤与其它小细胞恶性肿瘤的鉴别诊断，LCA（白细胞共同抗原，CD45RB）阳性反应是最为有用的标记（图1）。
表1
常用于石蜡包埋切片的证明淋巴网状细胞的商品抗体的特点
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| 抗体 | 阳性反应模式 | 正常分布 | 淋巴造血肿瘤 | 注释 |
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| LCA(CD45) | 细胞膜，有时高尔基器 | 淋巴样细胞，组织细胞，粒系统细胞 | 淋巴瘤，白血病 | 浆细胞和浆细胞瘤一般阴性，R-S细胞通常阴性，某些淋巴瘤（尤其是淋巴母细胞性）可为阴性 |
| UCHL1(CD45RO) | 细胞膜，有时高尔基器 | T细胞，组织细胞，粒系统细胞 | T细胞淋巴瘤， 极少B细胞淋巴瘤，
粒细胞肉瘤， 某些浆细胞瘤 |
胞浆阳性应视为无效，T淋巴母细胞淋巴瘤阴性 |
| βF1 | 细胞膜 | T细胞 | T细胞淋巴瘤 | βF1与T细胞受体的β链反应,抗体特异性高而敏感性有限 |
| CD3 | 细胞浆及核周 | T细胞 | T细胞淋巴瘤 | 多克隆抗体，是最特异的T细胞 标记 |
| MT1(CD43) | 细胞膜，有时高尔基器 | T细胞，某些组织细胞粒细胞，B细胞亚群，巨核细胞 | T细胞淋巴瘤，某些B细胞淋巴瘤(尤其是小细胞性和 淋巴母细胞性)，粒细胞肉瘤 |
CD43与B细胞标记共同表达 支持小淋巴细胞性 B淋巴瘤。 |
| CD4(OPD4) | 细胞膜 | 辅助T细胞亚群 | 某些T细胞淋巴瘤 | 在石蜡切片上仅能显示约50% 的CD4＋细胞 |
| CD8 | 细胞膜 | 细胞毒性T细胞抑制T细胞 | 某些T细胞淋巴瘤 | 需要抗原修复 |
| CD56 | 细胞膜 | 自然杀伤细胞 | NK/T细胞淋巴瘤 | 需要抗原修复 |
| L26(CD20) | 细胞膜，有时高尔基器 | B细胞 | B细胞淋巴瘤，L&H型R-S细胞，极少T细胞淋巴瘤，少数HDMC和HDNS | L26在酸脱钙组织反应不佳， 浆细胞和浆细胞肿瘤一般阴性， 对小细胞B淋巴瘤反应弱 |
| MB1(CD45R) | 细胞膜 | B细胞， T细胞亚群，某些组织细胞 | B细胞淋巴瘤，某些T细胞淋巴瘤 |
浆细胞和浆细胞肿瘤一般阴性 |
| CD5 | 细胞膜 | B细胞，某些T细胞 | 低度恶性B细胞淋巴瘤， 尤其是CLL-B |
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| 4KB5 | 细胞膜 | B细胞， 在套区较生发中心B细胞反应强 | B细胞淋巴瘤， 某些T细胞淋巴瘤(T淋巴母细胞性)， 某些粒细胞肉瘤， 浆细胞样T细胞淋 巴瘤 |
4KB5着染小细胞B淋巴瘤优于 L26 |
| 免疫球蛋白 | 高尔基器或 核旁，伴或不伴有弥漫性胞浆着色 | B细胞，浆细胞 | B细胞淋巴瘤，浆细胞瘤/骨髓瘤 | 弥漫性胞浆着色可见于R-S细 胞、组织细胞和退变细胞(被动 摄入) |
| KP1(CD68) | 弥漫性胞浆颗粒状阳性 | 组织细胞，粒细胞 | 真性组织细胞肿瘤，毛细胞白血病，粒细胞肉瘤和白血病，Langerhans细胞组织 细胞增生症，极少 小细胞淋巴瘤 |
KP1也着染某些黑色素瘤， 颗粒细胞肿瘤和血管瘤样恶性 纤维组织细胞瘤 |
| LeuM1(CD15) | 高尔基器和/或胞浆和/或胞膜 | 粒细胞，组织细胞 | R-S细胞，某些T,B
淋巴瘤的大细胞，粒细胞肉瘤，Langerhan细胞组织 细胞增生症 |
非淋巴造血肿瘤，如癌可为阳 性。CMV感染细胞可阳性反 应而被误认为R-S细胞 |
| BerH2(CD30)(Ki-1) | 细胞膜和/或高尔基器 | 部分活化淋巴细胞和组织细胞浆细胞 | 霍奇金病，大细胞间变性淋巴瘤，部分大细胞淋巴瘤，浆细胞瘤 | BerH2在福尔马林固定组织较 B5固定组织染色好，为活化 标记，胚胎癌和部分肉瘤可阳 性，弥漫性胞浆着色无效 |
| Mac387 | 胞浆和/或核 | 组织细胞，粒系统细胞 | 真性组织细胞肿瘤，粒细胞肉瘤和白血病,单核细胞白血病 | Mac387也着染粘膜鳞状上皮和 部分鳞状细胞癌 |
| 溶菌酶 | 胞浆 | 组织细胞，粒系统细胞 | 真性组织细胞肿瘤，粒细胞肉瘤和白血病， 部分T细胞淋巴瘤 |
许多非淋巴造血肿瘤也可阳性 |
| 髓过氧化酶 | 胞浆 | 粒系统细胞 | 粒细胞白血病，粒细胞肉瘤 | 最敏感和特异的粒细胞系统标 记 |
| S-100蛋白 | 核和胞浆 | Langerhanss细胞，指突状网状细胞，T细胞亚群 | Langerhans细胞组织细胞增生症，指突状 网状细胞肿瘤，极少 T细胞淋巴瘤 |
许多非淋巴肿瘤也可阳性 |
| EMA | 细胞膜或胞浆阳性 | 浆细胞 | 部分大细胞淋巴瘤， HDLP，浆细胞瘤 | 上皮性肿瘤也阳性 |
| bcl-2 | 细胞浆阳性 | 套区B细胞 | 滤泡性淋巴瘤 | 是区别滤泡性淋巴瘤和滤泡 反应性增生的标记 |
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| CD编号 | 抗体 | 在正常淋巴组织分布 | 对淋巴瘤的特异性 | 注释 |
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| T细胞标记 | ||||
| CD2 | T11,OKT11Leu-5 | 所有T细胞,NK细胞 | T细胞淋巴瘤,NK细胞肿瘤 | CD2抗原即绵羊红细胞 玫瑰花结受体 |
| CD3 | T3, OKT3, Leu-4, UCHT-1 | 中期和晚期胸腺细胞，周围T细胞 | T细胞淋巴瘤 | CD3分子与T细胞受体 并非是共价的 |
| CD4 | T4, OKT4,Leu-3 | 辅助/诱导T细胞,单核/组织细胞,Langerhans细胞 | 某些T细胞淋巴瘤,有的组织细胞淋巴瘤Langerhans细胞组织 细胞增生症 |
CD4阳性淋巴瘤并不一 定具有辅助T细胞功能 |
| CD8 | T8, OKT8,Leu-2, UCHT-4 | 抑制/细胞毒性T细胞,某些自然杀伤细胞 | 某些T细胞淋巴瘤, 大颗粒淋巴细胞增多症 某些NK细胞肿瘤 |
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| CD1a | T6, OKT6,Leu-6, NA1/34 | 早-中期胸腺细胞，Langerhans细胞 | 淋巴母细胞性淋巴瘤/白血病， Langerhans细胞组织细胞增生症 |
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| CD5 | T1, OKT1,Leu-1, UCHT-2 | T细胞，少数B细胞 | T细胞淋巴瘤，B-CLL， 多种低度恶性B细胞淋 巴瘤。大B细胞淋巴瘤 罕见阳性 |
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| CD7 | Leu-9, Dako-WT1, 3A1 | T2 T细胞 | T细胞淋巴瘤/白血病，某些粒细胞白血病 | CD7在T细胞发育 早期表达，是某些 T细胞淋巴瘤的唯一 T细胞标记 |
| B细胞标记 | ||||
| CD19 | B4, Leu-12 | B细胞 | B细胞淋巴瘤 | CD19表达于B细胞 分化早期，是不成熟 B细胞肿瘤（淋巴母 细胞淋巴瘤）的敏感 指标 |
| CD20 | B1, Leu-16,RFB17 |
B细胞 | B细胞淋巴瘤 | CD20表达迟于CD19 |
| CD22 | TO15, Leu-14,RFB4, B3 | B细胞 | B细胞淋巴瘤 | 胞浆CD22见于早期 B细胞分化，然后 为胞膜 |
| CD9 | BA2 | 不成熟B细胞，单核细胞，血小板 | 某些B细胞淋巴瘤， 前体B细胞急性淋巴 白血病 |
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| CD21 | B2, RFB6,CR2 | 某些B细胞，滤泡树突状细胞 | 某些B细胞淋巴瘤，如流行性Burkitt淋巴瘤，滤泡性淋巴瘤 |
CD21抗体识别 C3d/EBV受体 |
| 免疫球蛋白 | B细胞 | B细胞淋巴瘤可见于组织细胞， R-S细胞和变性 的细胞 |
非特异性Ig摄入， |
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| 组织细胞相关标记 | ||||
| CD15 | Leu-M1,DAKO-M1,MY1 | 粒细胞，单核细胞 | 霍奇金病，某些T细胞淋巴瘤，某些B细胞淋巴瘤，真性组织细胞 淋巴瘤，粒细胞肉瘤， Langerhans细胞组织细 胞增生症 |
CD15抗原即所谓 X-半抗原 |
| CD14 | MO2, MY4,OKM5, Leu-M3,UCHM1 | 单核/巨噬细胞，粒细胞 | 真性组织细胞淋巴瘤，粒细胞肉瘤 | MY4与其它CD 14抗 体不同染许多T,B细胞 淋巴瘤 |
| CD11c | Leu-M5, Ki-M1 | 单核/巨噬细胞，粒细胞 | 真性组织细胞淋巴瘤，毛细胞白血病，单核样B细胞淋巴瘤 | CD11c识别白细胞功能 相关抗原复合体的 150KDα链 |
| CD35 | To5, C3bR,CR1 | 单核细胞，粒细胞，滤泡树突状网状细胞，某些B细胞 | CD35抗体显示滤泡型淋巴瘤，套细胞淋 巴瘤和某些霍奇金病 中的树突状网状细胞， 滤泡树突状网状细胞 肿瘤，某些粒细胞白血病 |
CD35识别C3b受体 |
| CD68 | EBM11, Ki-M6,Ki-M7, KP-1 | 巨噬细胞，粒细胞 | 真性组织细胞淋巴瘤， 毛细胞白血病，粒细胞 肉瘤，Langerhans 细胞 组织细胞增生症，罕见的 小淋巴细胞性淋巴瘤 |
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| NK细胞标记 | ||||
| CD16 | Leu-11b | NK细胞，粒细胞巨噬细胞 | 大颗粒淋巴细胞增多症， T某些淋巴母细胞淋巴瘤/白血病 | CD16识别低亲和 力的IgG受体 |
| CD56 | NKH1, Leu-19 | NK细胞 | NK细胞肿瘤，某些大颗粒淋巴细胞增生症，某些伴有NK表达的T细胞淋巴瘤， | CD56识别神经细 胞粘附分子, CD56 也着染神经外胚叶组织和肿瘤，也可用于石蜡组织 |
| CD57 | Leu-7, HNK1 | NK细胞，T细胞亚群 | 大颗粒淋巴细胞增生症，罕见于T淋巴母细胞淋巴瘤 | CD57也着染神经 外胚叶组织和前列 腺，也可用于石蜡组织 |
| 活化和其他标记 | ||||
| CD10 | J5, CALLA,VIL-A1 | 生发中心细胞B细胞，前体淋巴样细胞，粒细胞 | 某些B细胞淋巴瘤（滤泡中心性，Burkitt，淋巴母细胞性），罕见于T细胞淋巴瘤（淋巴母性和外周T细胞淋巴瘤） |
CD10抗体识别CA LLA，也见于各种 非造血组织 |
| CD25 | IL2R1, Tac | 活化T细胞，B细胞或巨噬细胞 | 某些B和T细胞淋巴瘤，大细胞间变性淋巴瘤，毛，细胞白血病和R-S细胞 |
CD25识别I L-2受 体 |
| CD30 | Ki-1, BerH2 | 活化T，B或巨噬细胞 | 霍奇金病，某些大细胞淋巴瘤，间变性大细胞淋巴瘤 | CD30识别R- S细 胞相关Ki-1抗原，为活化标记 |
| TdT | 淋巴样前体细胞 | T，B淋巴母细胞淋巴瘤/白血病 | TdT为末端脱氧核 糖核酸转移酶，是 区别T淋巴母细胞 淋巴瘤和外周T细胞淋巴瘤的标记 |
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