三氧化二砷对HL60细胞作用后细胞周期素相关基因的表达

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近来关于As2O3的研究主要集中于对APL细胞凋亡及相关基因表达的改变。基因芯片(genechip)又称DNA微阵列芯片，可对DNA等生物成分进行高通量快速检测。河北医科大学第二医院血液内科、河北省血液中心应用基因芯片来研究As2O3对HL60细胞作用后细胞周期素相关基因表达谱的变化，探讨As2O3诱导HL60细胞凋亡的分子机制及细胞周期变化，以进一步扩大As2O3的临床适应证。方法：As2O3作用于HL60细胞，TRIzol 试剂一步法提取作用前后HL60细胞的mRNA，经逆转录反应，用Cy3标记的脱氧三磷酸尿苷(Cy3-d UTP)和Cy5-dUTP两种不同的荧光染料将处理前后的HL60细胞mRNA分别标记成两种DNA探针，并与载有一组靶基因的表达谱芯片进行杂交，通过扫描分析筛选As2O3作用前后HL60细胞表达有差异的基因；用电镜和原位凋亡检测法、流式细胞术及DNA凝胶电泳等方法检测细胞凋亡。

结果：筛选出HL60细胞在As2O3作用前后表达有差异的基因共82条，主要涉及细胞周期调控类、凋亡相关蛋白及应激反应蛋白类、信号传导类等基因，其中表达上调的有34条，表达下调的有48条。流式细胞仪检测发现终浓度15微摩尔／升的As2O3对HL60细胞诱导凋亡的作用很强。对照组的细胞凋亡率为1.7％，而实验组细胞的凋亡率为26.1％。

结论：细胞周期素B1、增殖细胞核抗原、类胰岛素生长因子结合蛋白等可能参与As2O3诱导HL60细胞凋亡的发生机制。

摘自 产经网-中国医药报