Bio-rad蛋白定量火烈鸟荧光染料

【字体: 时间:2005年11月17日 来源:生物通

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生物通报道:对蛋白进行SDS-PAGE后一般会利用考马斯亮兰染色或者是银染,考马斯亮兰灵敏度低,而且脱色时间长;银染灵敏度高,但是步骤复杂,而且显色不易控制,很容易发生染色过深的情况。最近,Bio-rad公司推出一款新型的蛋白胶染料——Flamingo Pink™,意思是粉红火烈鸟。这款染料可以非特异的与蛋白相结合,利用这种染料可以对一维、二维蛋白胶进行高灵敏度的显色。

利用这种染料染色的步骤是:用乙醇、醋酸固定液进行固定,加入火烈鸟荧光染料,最后加入含有非离子型去垢剂吐温-20的溶液洗涤,以降低背景。整个过程大约需要5个小时,之后利用532nm波长的光可以检测到低至0.25ng的蛋白,利用300nm的紫外光可以检测到低至0.5ng的蛋白。

利用火烈鸟染色的2维蛋白胶

利用荧光染料有许多优点:灵敏度高;浓度与荧光量度成线性关系,可以计算出蛋白的浓度;存储时间长,在2-8℃阴暗的环境下染色后的胶可以存储长达6个月,完全不会影响到荧光的灵敏度。对于荧光染料产品,Molecular Probe可以说是老大哥了。在Bio-rad之前它就出有SYPRO Ruby染料,这款染料也是红色的,因此起名红宝石。当火烈鸟遇上红宝石,究竟哪家好用呢。建议大家可以去多试试这些创新设计的产品(生物通记者 谢菲)。

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