Easy-A™ 高保真PCR克隆酶[新品推荐]

【字体：大中小】 时间：2004年08月06日 来源：

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Easy-A™ 高保真 PCR克隆酶

唯一的既有校读活性又能在产物上加上3’-A粘端的DNA聚合酶
Easy-A扩增产物可以直接克隆到TA或T-/U-载体上
不需要像其它高保真酶一样，必须在扩增后进行加A操作，杜绝污染，省时，更适合高通量操作
克隆效率高于传统方法所能达到的95%
高保真性与Pfu DNA聚合酶完全一样，较Taq高6倍

Easy-A?高保真PCR克隆DNA聚合酶
是唯一一种具有高校验活性，同时扩增产物可以直接用于TA克隆的PCR酶，便于PCR产物的高通量克隆。
如果你正在使用Invitrogen的TA克隆载体或Novagen的UA克隆载体，面对众多DNA聚合酶时，你或许会踌躇不决：

选择Taq？
        克隆效率倒是很高，但是保真性没有保障，要花好多测序的费用呢！说不定还得重做一遍，或者做定点突变，岂不自寻烦恼？！！

选Pfu？
        保真度绝对没问题！但是要加A尾巴，麻烦了一点，生手还要注意可能带入的污染。为了保真性，克隆效率只能别作太高指望。

选混和酶？
        保真性比Taq高2倍，只是克隆效率上不去呀……

看来TA克隆可不简单哪！有没有一举两得的唯一选择？
Easy-A让这一切变得容易了：

自动在PCR产物3’端加A，省去繁琐的操作，自然更省钱
能扩增长达5kb的模板
保真度比Taq高6倍，克隆正确的片段，当然节省测序费用
克隆效率高达95％或更高

Easy-A™ PCR克隆酶扩增产物的高克隆效率
产物具3’-A突出端，方便与T-/U-载体直接进行连接克隆。

模板长度	0-5 kb
延伸时间	1 min/kb
平末端或3’-A末端	3’-A
保真性 vs. Taq	6X
是否添加ArchaeMaxx™ 因子	有
热启动型	有
是否提供反应混合物	有

标准反应体系 (请注意按顺序加入)

反应组分	体积
蒸馏水	41.1ul
10×Easy-A专用反应缓冲液	5.0ul
dNTPs (每种25mM)	0.4ul
DNA模板（100ng/ul）50－100ng基因组DNA100pg－100ng Lambda或质粒DNA	1.0ul
#1引物（100ng/ul）浓度0.2－0.5mM通常18-25寡核苷酸为100－250ng	1.0ul
#2引物（100ng/ul）浓度0.2－0.5mM通常18-25寡核苷酸为100－250ng	1.0ul
Easy-A HF PCR克隆酶（5.0U/ul）	0.5ul (2.5U)
反应体系总体积	50.0ul