高质量的原代细胞培养其实并不难[选购宝典]

在大多数人的印象中，原代细胞培养是一件很困难的事；完全自己动手可能确实如此，但市场上那么多的原代细胞培养体系，相当程度上可以为你解除后顾之忧。GIBCO（现属于生命科技公司）作为细胞培养行业的领先者，提供了数十种原代细胞，以及相应的培养基、添加剂、传代和冻存试剂。

细胞系培养相当成熟且普遍，但有时会得到一些难以解释的结果。想不想得到更多符合体内正常生理条件的数据？从细胞系转向原代细胞，情况一定会有所好转。原代细胞培养模拟了体内的状态，能让你获得更多这样的数据。在大多数人的印象中，原代细胞培养是一件很困难的事；完全自己动手可能确实如此，但市场上那么多的原代细胞培养体系，相当程度上可以为你解除后顾之忧。

这些年来，市场上出售的原代细胞类型在迅速扩增，它们对应的培养基及相关产品也在相应增加。这些培养体系的涌现减轻了研究人员对细胞系的依赖，也让原代细胞的使用更加普遍。据统计，在使用细胞系的研究人员中，大约有40%的人同时也在培养原代细胞，以便让研究成果更具说服力。

GIBCO（现属于生命科技公司）作为细胞培养行业的领先者，自然也会顺应潮流。不过，它并没有把面铺得很广，而是采取少而精的策略，让每种细胞都有完整的产品线。据生命科技公司负责原代细胞和干细胞的副总裁Joydeep Goswami介绍，这种聚焦意味着他们能够满足从基础科研到药物筛选再到细胞治疗的各种客户的需求。他们的产品线不仅包括最基本的细胞和培养体系，还延伸到原代细胞的鉴定、分离、扩增、冻存以及改造。

如何获得大量高质量的原代细胞？这也是研究人员一直在苦苦探索的。原代细胞的质量取决于多个因素：组织、培养基、特别是它还与实验人员分离组织的技术息息相关。如果你对分离组织不甚精通或者很难保证组织来源地稳定性，市售的原代细胞是一种不错的选择。

GIBCO提供了数十种原代细胞，包括角化细胞、肝细胞、黑素细胞、成纤维细胞、神经细胞、微血管内皮细胞、大血管内皮细胞、平滑肌细胞、角膜上皮细胞和乳腺上皮细胞等。每一批的原代细胞都经过了活性和生长能力的检测，并对其中可能存在的生物污染物进行了检测，如HIV-1、乙肝与丙肝病毒、支原体、细菌及真菌。Invitrogen出售的每一瓶产品，其复苏后所含的活细胞数至少占细胞总数的70%以上，且活细胞总数大于500,000。

有了细胞，当然还需要培养基、添加剂等相关产品。由于GIBCO采用的是成套开发模式，所以包括基础培养基，添加剂，传代和冻存试剂等的相关产品一应俱全，简单的按照说明使用成套产品就可以获得理想的培养效果。

索取原代细胞培养的技术及产品资料

Invitrogen不但提供常规的无血清或减血清培养体系，还开发出无动物源的无血清培养体系。考虑到未来的可能的临床应用前景，无动物源的无血清培养体系是必不可少的。不但要确保细胞的正常扩增，还不能含有动物成分以杜绝动物病毒传播到人体内的可能性。让我们先来认识一下其中的明星EpiLife® 培养基吧。

EpiLife® 培养基就是化学成分限定的不含动物成分的液体基础培养基，含有60 μM CaCl₂，适用于人表皮角化细胞或人角膜上皮细胞的常规培养。它还可以应用在角化细胞或角膜上皮细胞的原代分离。使用非常简单，只需加入不同添加剂配成针对特定细胞的培养体系即可。与其它无血清培养基相比，EpiLife® 培养基能大大延长人表皮角化细胞的体外寿命。此外，EpiLife® 培养基还有无钙离子和无钙离子/无酚红两个版本。

光有细胞和培养基，当然还不够。添加剂呢？抗生素呢？下面我们就以人角化细胞为例，看看GIBCO打出的组合拳。

细胞培养条件	在不含动物成分且化学成分限定的条件下获得更长的细胞寿命	在化学成分限定的条件下获得更长的细胞寿命	在含有BPE的条件下获得更长的细胞寿命
细胞	成人来源的无动物源人角化上皮细胞或新生儿来源的无动物源人角化上皮细胞（HEKn-AOF或HEKa-AOF）	成人来源人角化上皮细胞或新生儿来源人角化上皮细胞（HEKn 或 HEKa）	成人来源人角化上皮细胞或新生儿来源人角化上皮细胞（HEKn 或 HEKa）
基础培养基	EpiLife®	EpiLife®	EpiLife®
生长添加剂	S7添加剂	EDGS	HKGS
试剂	重组胰酶、专用胰酶抑制剂、庆大霉素/两性霉素、Synth-a-Freeze™冻存培养基、Coating Matrix试剂盒	胰酶、专用胰酶抑制剂、庆大霉素/两性霉素、Synth-a-Freeze™冻存培养基	胰酶、胰酶中和剂、庆大霉素/两性霉素、Synth-a-Freeze™冻存培养基

敏感的原代细胞需要特别的呵护，虽说常规的细胞培养试剂也许能用，但我们还是推荐那些经过厂家验证的试剂。GIBCO就提供了一系列专供原代细胞的试剂，如普通的胰酶和抑制剂、不含动物成分的胰酶及抑制剂、庆大霉素/两性霉素、CaCl₂等等。另外，Synth-a-Freeze™冻存培养基是不含动物成分的冻存培养基，成分确定，不含蛋白质，含10% DMSO，适用于除黑素细胞以外的所有GIBCO细胞的冻存。

Coating Matrix试剂盒是Coating Matrix与Dilution培养基的组合，使用方便，适用于很多原代细胞培养的实验器皿包被。试剂盒中含有0.5 ml无菌的重组人I型胶原作为Coating Matrix，足够30个T-25培养瓶的包被。与S7或EDGS添加剂结合使用时，Coating Matrix能显著加强角化细胞的粘附、生长以及倍增潜力。

这里仅以人角化细胞为例，列出了GIBCO的整条产品线。关于其它原代细胞的培养方案，欢迎索取《原代细胞培养手册》。你看，有了这一套完整的产品线，原代细胞培养又有何惧？（生物通 余亮）