主流之选 最新4款定量PCR仪推荐[选购宝典]

荧光定量PCR（Real-Time PCR）的出现让我们能够确定样品中存在多少特异的DNA序列，而不像普通的终点PCR那样，只知道有还是没有。利用荧光定量PCR，我们能够测定基因表达，检测miRNA丰度，开展基因分型，验证芯片和测序的数据，如此云云。

尽管这两年杀出了个数字PCR，无需标准曲线，灵敏度也更高。然而，对大部分应用而言，qPCR的表现已足够好。使用简单、准确性高、重复性好、动态范围广，更重要的是，价格便宜。除非你面对的是低拷贝数事件，否则，当然是只选对的，不选贵的。

荧光定量PCR技术尽管很成熟，但创新无止境，新仪器仍在不断上市。在过去一年，许多大牌的生物技术公司都推出了最新款的定量PCR仪。下面就让生物通小编带你去看看。

直观易用

过去的老款qPCR仪，屏幕小，按键多，设置个运行程序，按来按去搞不定。在如今这个手机比脸大的时代，这样的仪器显然不能满足我们的要求。直观易用才是王道。对仪器而言，最好是即拆即用，无需光路校正，也无需培训。软件同样要直观，方便程序的设置和保存。

LightCycler® 96实时荧光定量PCR仪是罗氏LightCycler家族的最新成员。它提供了直观友好的用户界面，无论你是初出茅庐的qPCR新手，还是久经沙场的实验达人，都能一目了然，无师自通。对于初次使用的用户来说，常规的基因表达和遗传变异研究的实验设置都变得易如反掌；对于qPCR实验操作熟练的用户，分析软件能直接输出经过严谨计算分析、符合国际文章发布要求的数据结果。

据介绍，这款仪器选用了以往仅在高端平台上应用的银质模块温控技术，保证了仪器拥有优秀的温度均一性，因此产生的数据也具有非常高的均一性。此外，它还采用长寿命的全波长白色固态光源，配合使用2×96根等距玻璃光纤，从96个样本孔中同时激发及捕获荧光信号，使得用户彻底告别普通qPCR仪器检测的边缘效应。

不久前，罗氏发布了针对LightCycler 96的软件升级，增加了高分辨率熔解分析和定量基因检测模块。HRM分析实现了已知和未知基因突变的快速检测，包括单核苷酸多态性（SNP）、缺失和甲基化区域。而新的定量检测模块实现了目的基因存在或缺失的直接检测和验证。这一模块采用新颖的控制概念，特别适合传染病研究领域的用户。

温度均一

在选购仪器时，我们自然会关心它是否能产生高质量、重复的数据。这时，我们有必要考虑一些具体的参数，如温度均一性。各孔之间不均匀的温度会导致数据不一致，因为小的温度差异也会影响引物退火和荧光信号。

PikoReal荧光定量PCR仪由赛默飞世尔科技推出，是一款真正五通道的定量PCR仪。它采用五波长LED光源整板激发，高灵敏度CCD整板检测，稳定、高效。而蜂巢式样品槽配合专利的放射状散热片设计，确保整个PCR模块能在1秒内实现温度均一稳定。PikoReal的升温速率高达5°C/s，降温速率达4.5°C/s，这使得PCR反应速度得以大幅度提高。

值得一提的是，这款仪器采用四分之一块384孔PCR板大小的96孔板作为反应容器。而半导体和热盖均比样品模块大很多，在样品模块周边形成一个缓冲空间，有效防止边缘冷凝，因此反应体系低至5 μl时重复性也很好，大大节省了试剂。同时，由于样品模块的缩小，整台仪器的体积也可大幅缩小（30x23 cm），不仅节省实验台的空间，也更加经济环保。索取PikoReal荧光定量PCR仪的详细资料

使用灵活

与其他许多实验室仪器一样，定量PCR仪必须足够灵活，才能满足实验室不断增长的需求。虽说96孔板是当今很多实验室的标配，但随着时间的推移，很难说你不会上升到384孔板或数字PCR。Life Technologies的QuantStudio™仪器家族就很好地满足了这方面的需求。

QuantStudio™ 7 Flex和QuantStudio™ 6 Flex实时定量PCR系统是今年夏天上市的新品。QuantStudio™ 7 Flex带来了出色的灵活性，容纳四个可互换的模块（96孔、96孔快速、384孔或TaqMan Array Card）。仪器自带一种模块类型，其他模块可单独购买。此外，Life Tech还提供Twister® Robot自动化配件，以支持高通量的应用。该仪器特有6色通道和21种滤光片，适合多重分析应用。它能够在单重反应中检测低至1.5倍的变化，并获得10个数量级的动态范围。

若你暂时不需要支持TaqMan Array Card，那么有个更经济实惠的选择——QuantStudio™ 6 Flex。它支持三个可互换的模块（96孔标准、96孔快速或384孔），满足中等通量的需求。随着大型研究的性能要求不断提高，该仪器也能升级到QuantStudio™ 7 Flex，而只需购买一个试剂盒。

若你需要终极的灵活性，QuantStudio™ 12K Flex则是不二之选。它在7 Flex的基础上，还支持OpenArray®芯片模块。系统可同时运行4块OpenArray® 芯片，相当于32块传统的384孔板。这样，只需4小时，你就能获得高达12,000个数据点。索取QuantStudio仪器的详细资料

超大容量

对于开展样品制备应用的研究人员而言，50 µl的反应体积可能无法满足他们的要求。例如，新一代测序的emulsion PCR和芯片的文库扩增需要更多的样品量。为此，Bio-Rad推出了深孔板定量PCR仪——CFX96 Touch Deep Well™，让反应体积增加至125 µl。

此系统利用Bio-Rad的固态光学技术，可准确分辨单个反应孔中最多五个目标，实现了精确定量。光学系统扫描每块板的正上方，高灵敏度地检测每个孔，且无色度亮度干扰（crosstalk）。

除了行业领先的光学技术，系统还通过Bio-Rad专利的加热模块，为大体积反应带来了出色的热性能和均一性。这种模块比标准模块更快速地加热和冷却，因此平均升降温速率提高，而总的运行时间缩短。系统还包含一个内置的温度梯度，便于在单次反应中优化条件。

当然，购买仪器不止是看参数，我们还要考虑售后服务等因素，毕竟定量PCR仪价格不菲。因此，在选购仪器时，我们也要留心一下质保条款，保修期多久，过了保修期，零件与人工如何收费，再结合我们平时购买产品时所享受的服务质量，大家估计也心中有数了吧。（生物通 余亮）

产品名	LightCycler® 96	PikoReal	CFX96 Touch Deep Well
制造商	罗氏诊断	赛默飞世尔	Bio-Rad
模块类型	纯银质模块，96孔，开放体系	24孔 或 96孔	Peltier，96孔
光路	2*96根等距光纤，固定光路	五组二分镜，反射镜	请咨询厂家
推荐样品容量	10-50 μl	5–50 μl（24孔），5–20 μl（96孔）	10-125 μl
升温速率	4.4°C/sec	>5°C/sec	2.5°C/sec
降温速率	2.2°C/sec	> 4.5°C/sec	2.5°C/sec
温控范围	37-98°C	4–99.9°C	0-100°C
温度精确性	±0.2°C	±0.2°C	±0.2°C
温度均一性	±0.2°C	±0.3°C（95°C时），±0.2°C（72°C时），±0.15°C（60°C时）	±0.4°C well-to-well within 10 sec of arrival at 90°C
激发光源	高强度白光LED	五个不同波长LED	LED
检测器	CCD	CCD	光电二极管
激发/检测波长范围	470-645nm（激发），514-697nm（检测）	475–640 nm（激发），520–740 nm（检测）	450-730 nm
线性范围	10个数量级	10个数量级	10个数量级
检测灵敏度	单拷贝	单拷贝	单拷贝
多重能力	4重	4重	最多5个目标
温度梯度	是		是
数据分析	绝对定量 相对定量 熔解曲线分析 基因分型 高分辨率熔解曲线分析（HRM） 定量检测	绝对定量 相对定量 熔解曲线分析 高分辨率熔解曲线分析（HRM） 等位基因分析	绝对定量 相对定量 熔解曲线分析 基因表达分析 等位基因分析