微孔板检测仪的多种选择

生物通报道：今天，几乎每个实验室都会用得到微孔板，可你知道么，这块不起眼的小板子已经有六十年历史了。当时，一名匈牙利的病毒学家，为了寻找简单廉价又可靠的方法来稀释流感病毒，发明了微孔板并将其称为“Microtitrator”。不过这一发明的原始论文发表在匈牙利，也没有申请专利，因此并没有立刻引起人们的关注。

在生命科学、化学、药物研发和临床检验领域，微孔板逐渐成为不可或缺的基本工具，从抗原定量、测序文库制备到细胞培养，微孔板几乎无处不在。

微孔板尺寸标准很适合自动化，其上密集的小孔有助于减少试剂用量和降低成本。不过要实现上述优势，研究者们就需要通过特定的微孔板检测仪，来读取反应数据。市面上的微孔板检测仪功能多型号杂，供应商们也在不断对仪器进行优化，难免让人感到眼花缭乱。本文介绍了微孔板检测仪的一些功能和参数，希望能帮你选到最合心意的一款产品。

单一检测功能

Promega公司的GloMax®-96是一款专门进行发光检测的微孔板检测仪，而Bio-Rad公司的iMark和xMark只用于检测吸收光。其中iMark以滤光片为基础，能读取415、450、490、595、655和750 nm波长，可用于定量细胞生长和ELISA实验，但不能对DNA进行定量。xMark采用的是单色器系统，能够提供从紫外到红外的全光谱。

Biochrom公司也生产专门的吸收光检测仪，例如四月份发布的EZ Read系列产品。该系列包括五款仪器，从以滤光片为基础的EZ Read 400，到以单色器为基础的EZ Read 2000。EZ Read系列大多使用卤素灯作为光源，不过EZ Read LED配备的是四到五个发光二极管。

Biochrom公司的产品专员Tristana von Will解释道，EZ Read LED“能够提供高质量的光源，不需更换而且能耗少。”（此外，Tecan公司的Infinite® F50吸收光检测仪也用LED作为光源。）

微孔板检测仪还可用于浊度测定，BMG Labtech公司的NEPHELOstar Plus就是专门用来检测浊度的。

多功能检测仪

多功能微孔板检测仪配有多个应用模块，一般价格比单功能微孔板检测仪高。这些应用模块中，最常用是吸收光、荧光强度和发光检测，此外还包括荧光偏振FP、时间分辨荧光TRF、荧光共振能量转移FRET、生物发光共振能量转移BRET、AlphaLISA®（PerkinElmer）和HTRF® assays（Cisbio）等。

有些应用模块需要专用光学元件的支持，以增加仪器的灵敏度。例如，AlphaScreen/AlphaLISA assay就需要680 nm高能激发，一般配有专用的激光光源或大功率氙灯。BioTek公司的Synergy Neo HTS采用的是激光光源，而Tecan的Infinite F200 PRO配置的是大功率氙灯。据Tecan公司介绍，进行温度校正能够增加AlphaScreen/AlphaLISA的灵敏度，Infinite M1000 PRO就拥有这样的功能。

有些多功能微孔板检测仪可以进行无标记的细胞分析，例如PerkinElmer公司的EnSpire® multimode reader，这款仪器除了吸收光、发光、荧光和AlphaLISA检测之外，还能支持Corning的Epic®技术（一种无标记的细胞分析系统）。

一些多功能微孔板检测仪还可以进行成像分析，例如BioTek公司的Cytation™3就整合了自动数字荧光显微镜的功能。今年四月发布的Cytation3，能够对载玻片、细胞培养瓶和高通量微孔板（达384孔）进行分析。

检测通量

在选购微孔板检测仪时，需要考虑的因素很多，包括光源、检测器、功能应用和平板规格等等。其中，选择合适的通量很重要，我们应该在购买前预计一下需要处理的样本量。对于样本量较少的实验室来说，仪器的读取速度影响不大。但对于高通量筛选来说，每一秒的影响都很关键。

举例来说，只有一个通道的Biochrom EZ Read 400，读完一块微孔板需要25秒。而拥有八个读取通道的EZ Read 800，可以在五秒内完成读板。此外，据BMG Labtech公司的应用科学家介绍，该公司的PHERAstar FS多功能检测仪具有SDE（simultaneous dual-emission detection）功能，可以同时读取两种信号，以此增加微孔板检测的通量。

四月中旬，BMG发布了一款配备闪烁氙灯的新产品，CLARIOstar。该产品也是一款多功能检测仪，支持吸收光、荧光强度、荧光偏振、FRET、时间分辨荧光、发光、BRET、AlphaScreen和AlphaLISA检测。CLARIOstar将单色器与滤光片结合，并将其称为“线性渐变滤光片光栅技术”。该技术允许用户选择任意波长，并调节进入样本或检测器的光线量，这对于接近光谱红端的荧光素特别有用。

微孔板规格

不同的微孔板检测仪，适用的微孔板规格也不相同。一些仪器只能运行96孔以下的平板，有些则能够支持1,536孔板，实现超高通量。不过超高通量的仪器价格不菲，因为高密度的微孔板，需要更好的光源和更灵敏的检测器。

应用类型

微孔板检测仪的应用范围，无疑是选购时最重要的考虑因素。如果只是进行简单的定量实验（如ELISA或核酸定量），就不需要选择太昂贵的型号。但对于用户多应用广的仪器中心或大型实验室而言，兼具多种功能的检测仪更为实用。

微孔板的灵敏度和灵活性也很重要。一般而言，以滤光片为基础的系统，允许更多的光通过，因此比单色器更灵敏，不过单色器的灵活性要高于滤光片。目前，在厂家的不断优化下，光栅的灵敏度已经大大提高。例如，Tecan公司的滤光片型微孔板检测仪Infinite F500，曾是该公司灵敏度最高的产品。但现在，配Quad4单色器的M1000 PRO，已经可以达到类似的灵敏度。

在微孔板检测中，我们还可能要用到加液装置、振摇功能和温度控制，不过目前市面上大多数检测仪都能提供上述配置。除此之外，我们还可以比较下系统/分析软件的易操作性，以及仪器所需的日常维护和优化，以便做出最称心合意的选择。

 

（Jeffrey M. Perkel撰写/叶予编译）