FDA警告：常用细胞系中首次发现病毒

　　

——美国食品药物监督局FDA的一实验室发现，一种被认为无病毒存在的治疗生产细胞系中存在一种新病毒

生物通报道：Sf9是从草地夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫中分离得到了一种细胞系，这种细胞系常用于生产重组蛋白（通过一种病毒载体感染生成），甚至还用于疫苗的生产中。

然而近期来自美国食品药物监督局FDA的研究人员发现，这种被认为无病毒污染的细胞系，实际上潜伏着一种之前并未发现过的病毒，研究人员将其命名为Sf弹状病毒（Sf-rhabdovirus）。

“在Sf9细胞中发现Sf弹状病毒，这令我们感到意外，因为这种细胞系常用语生物制品的开发和生产，以及一些外来病毒的细胞基质检测”，这一由FDA生物制品评价和研究中心Arifa Khan领导的研究组表示，不过更重要的是，目前还没有证据表明该病毒能进入人类细胞系，或在细胞中进行复制。

研究人员是通过PCR和大规模平行测序（parallel sequencing）实验发现的这种病毒，而且他们还通过电子显微镜观察到了这种弹状病毒样颗粒。

实际上弹状病毒是在植物中比较常见的，这种Sf弹状病毒是第一个已知的感染鳞翅目昆虫的弹状病毒。研究人员表示这一项研究“表明病毒有可能在细胞中进行复制，其持久性也表明这种病毒在Sf9细胞系中是组成型生成”。这一细胞系来自美国典型培养物保藏中心和Invitrogen公司。

目前对于这种病毒，我们了解到很少，因此研究人员认为，“现在需要谨慎的去证明在那些用于生产生物制品的细胞系中不存在Sf弹状病毒，可以在生产的不同阶段进行敏感性检测，也可以通过相关的病毒模型，结合病毒清除步骤，检验这些生产过程”。

这种情况并不是第一次出现，早在1970年代，一项研究就发现，被广泛使用的Hela细胞系就曾被污染，这一事件当时就促使首个细胞系质量控制手册的诞生。HeLa细胞株是由正常子宫颈细胞被一种人类乳突状瘤病毒（Human Papillomavirus 18 或HPV18）转型成癌细胞的，而且和正常子宫颈细胞有许多不同。

此前也有报道称，已经建立的13株食管腺癌细胞系（EAC）中有3株被发现已经被其他细胞污染，不再是原来的食管腺癌细胞系，这些细胞系已经被多家实验室应用在两个临床试验、并发表了超过100篇SCI文章，并申请了11个美国专利。

（生物通：张迪）

原文摘要：

Identification of a Novel Rhabdovirus in Spodoptera frugiperda Cell Lines

The Sf9 cell line, derived from Spodoptera frugiperda, is used as a cell substrate for biological products, and no viruses have been reported in this cell line after extensive testing. We used degenerate PCR assays and massively parallel sequencing (MPS) to identify a novel RNA virus belonging to the order Mononegavirales in Sf9 cells. Sequence analysis of the assembled virus genome showed the presence of five open reading frames (ORFs) corresponding to the genes for the N, P, M, G, and L proteins in other rhabdoviruses and an unknown ORF of 111 amino acids located between the G- and L-protein genes. BLAST searches indicated that the S. frugiperda rhabdovirus (Sf-rhabdovirus) was related in a limited region of the L-protein gene to Taastrup virus, a newly discovered member of the Mononegavirales from a leafhopper (Hemiptera), and also to plant rhabdoviruses, particularly in the genus Cytorhabdovirus. Phylogenetic analysis of sequences in the L-protein gene indicated that Sf-rhabdovirus is a novel virus that branched with Taastrup virus. Rhabdovirus morphology was confirmed by transmission electron microscopy of filtered supernatant samples from Sf9 cells.