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Stilla Technologies推出全新的试剂产品线--naica® dPCR Mixes

【字体: 时间:2020年12月14日 来源:深蓝云生物

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  Stilla Technologies公司在2020年11月份推出全新的试剂产品线--naica® dPCR Mixes,用于数字PCR分析。为了提高检测效率和更高的检测灵敏度,同时开发了适用于荧光探针(TaqMan®)检测和嵌合染料(EvaGreen®)检测的PCR预混液。

Stilla Technologies公司在2020年11月份推出全新的试剂产品线--naica® dPCR Mixes,用于数字PCR分析。为了提高检测效率和更高的检测灵敏度,同时开发了适用于荧光探针(TaqMan®)检测和嵌合染料(EvaGreen®)检测的PCR预混液。本产品系列是Naica Crystal™ 数字PCR系统的最佳搭档,包括了naica® PCR Mix和naica® multiplex PCR Mix,可提供5x和10x浓度,高浓度大幅度降低了预混液用量,额外释放出的反应体积可供模板、引物或探针使用,从而提高低浓度样品或稀有目标的检测灵敏度,同时可提高多重检测能力和效率。

naica® dPCR Mixes特点:

▪ 兼容TaqMan 和EvaGreen检测
▪ 高耐受性--复杂样本仍可得到高质量实验结果
▪ 高特异性--广泛适用于各种反应条件
▪ 高灵敏度--精准定量低浓度样品和稀有目标的检测
▪ 宽动态范围--多重反应的动态范围可与单重反应相媲美

naica® dPCR Mixes应用领域:

绝对定量(DNA / RNA)
SNP基因分型
液体活检(CTC, cfDNA)
NGS库校准/ NGS结果验证
稀有目标检测
低浓度样本检测
单细胞分析
拷贝数变异检测(CNV)
基因表达分析

naica® dPCR Mixes应用实例:

  • 使用naica® PCR MIX和EvaGreen对目标基因进行Crystal™数字PCR精准定量

图1: 使用10X naica® PCR MIX和终浓度1.9 uM EvaGreen对hgDNA基因进行Crystal™数字PCR精准定量。
备注:(A) 1D-dotplot图显示,从16.5 pg(0.2 copies / μL)到248ng (3000 copies / μL)的hgDNA具有强大的阳性和阴性微滴分区能力。(B) 用0.2 copies / μL到3000 copies / μL的hgDNA稀释液进行3次重复,R2>0.99说明使用naica® PCR MIX的EvaGreen分析具有卓越的可靠性。每个稀释点的hgDNA浓度分别为:0.2、1.0、5.0、25、120、600、3000 copies / μL。

  • 使用naica® multiplex PCR MIX进行Crystal™数字PCR定量灵敏度和灵活性的检测

图2:使用naica® multiplex PCR MIX同时对3个靶标进行线性量化。每个稀释点的hgDNA浓度分别为:0.2、1.5、8.0、50、320、2050、13000 copies / μL,各稀释液进行3次重复。结果显示各靶标的线性关系较好,R2均大于0.99,说明结果高度真实可靠。

图3:使用naica® multiplex PCR MIX对13000-0.2cp / μL的pUC18 DNA稀释液进行3重反应(A)和单重反应(B)。每个稀释点的pUC18浓度分别为:0.2、1.5、8.0、50、320、2050、13000 copies / μL,各稀释液进行3次重复。3重和单重的反应液中均含有pUC18、BRAF和ALB的特异性引物探针。(A) 3重反应中额外加入3000cp / μL(10ng)的hgDNA模板;(B) 单重反应中没有额外加入hgDNA模板。结果显示,3重反应和单重反应中,pUC18的阳性微滴和阴性微滴群组的荧光水平和可分性高度相似。

图4:使用13000-0.2cp / μL的pUC18 DNA稀释液进行3重反应(A)和单重反应(B)的定量结果。每个稀释点的pUC18浓度分别为:0.2、1.5、8.0、50、320、2050、13000 copies / μL,各稀释液进行3次重复。3重和单重的反应液中均含有pUC18、BRAF和ALB的特异性引物探针。(A) 3重反应中额外加入3000cp / μL(10ng)的hgDNA模板;(B) 单重反应中没有额外加入hgDNA模板。结果显示,3重反应中BRAF和ALB基因具有良好的重复性,相对标准差在2.3-2.5%之间,n=21;3重和单重反应中,pUC18均能获得真实可靠的定量结果,同时检测范围和线性高度相似。

  • 使用naica® multiplex PCR MIX进行6色Crystal™数字PCR定量稳定性和灵敏度检测

图5:使用naica® multiplex PCR MIX在6色Crystal™数字PCR系统上进行6个靶标的线性量化。每个稀释点的DNA浓度分别为:0.2、1.5、8.0、50、320、2050和13000 cp/ μL,各稀释液进行3次重复。结果显示各靶标的线性关系较好,R2均大于0.99,说明结果高度真实可靠。

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