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WorkBeads离子交换层析填料---总有一款能给你惊喜!

【字体: 时间:2020年12月21日 来源:基因有限公司

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  WorkBead™琼脂糖纯化填料使用特有的方法生产,可产生具有紧密尺寸分布和出色机械稳定性的多孔刚性珠,优化的孔隙率使得纯化产物的产量和纯度达到良好的平衡。

阴阳离子交换层析,通过带电的溶质分子与离子交换层析介质中可交换离子进行交换,从而达到分离纯化的目的。虽然不如亲和层析来得那么方便和简单,但无疑是生物大分子纯化过程中应用最广泛的一种纯化技术,无论蛋白质,多肽还是核酸都可以通过阴阳离子层析进行分离纯化;该方法可以分离只有微小电荷差异的不同分子,使得离子交换层析可以应用于从样本获取,中度纯化到精纯的整个纯化工艺中;同时离子交换层析可以满足实验室少量样本的纯化分析也可以满足中试、工业生产级别样本的分离纯化。

从科学研究到生产规模,基于琼脂糖的基质已成功用于生物技术纯化数十年,这是因为它们与包括蛋白质,肽,核酸和碳水化合物在内的生物分子具有优异的相容性。WorkBead™琼脂糖纯化填料使用特有的方法生产,可产生具有紧密尺寸分布和出色机械稳定性的多孔刚性珠,优化的孔隙率使得纯化产物的产量和纯度达到良好的平衡。

应用1:阴离子交换层析填料 WorkBeads 40Q 用于寡核苷酸的纯化

通过固相合成生产的寡核苷酸制剂通常需要纯化以去除不完整或错误的序列。在寡核苷酸中,总是存在小部分的序列,具有碱基的缺失或插入(例如,N-1或N + 1,N是靶寡核苷酸的长度)。失败的频率随着合成寡核苷酸的长度而增加。N-1污染物通常很难从全长寡核苷酸中分离出来。

由于阴离子交换层析可以基于长度分离带负电的寡核苷酸,因此它是寡核苷酸纯化的常用方法。核酸主链中带负电荷的磷酸基团通过AIEX树脂上的带正电荷的基团与树脂结合。通常,结合强度随靶序列的长度而增加。可以通过增加盐浓度梯度来完成吸附的寡核苷酸的洗脱。

推荐产品:WorkBeads 40Q ------高载量强阴离子交换层析树脂

应用2:阳离子交换层析填料 WorkBeads 40S 用于多肽的纯化

治疗性多肽可通过固相合成或在生物学模型系统中表达,但无论哪种方式生产的粗肽产物,均会产生大量工艺相关的杂质(例如失效序列,化学修饰,生物负荷等),需要在下游工艺中去除。当前,反相色谱(Reversed-phase chromatography,RPC)是最常用的多肽纯化技术,但原始料液可能会污染色谱柱。如果在基于硅胶的高性能RPC步骤的上游引入阳离子交换层析步骤,则可大大减少杂质的负担,另外也可使目标肽的纯度大大提高。

推荐产品:WorkBeads 40S---高载量阳离子交换层析树脂

 

应用3:复合模式填料WorkBeads 40Tren 用于抗体药纯化的预处理步骤

纯化单抗或其他IgG分子时改变层析步骤顺序,从传统的Capture-Enhance-Polish(CEP)策略转变为Enhance-Capture-Polish (ECP)策略,对进入捕获柱(Protein A亲和柱)的料液进行标准化,预先去除大量的HCP和HCD,从而可以避免大量的生物负荷进入Protein A柱,也可以从一定程度上提高A柱的结合载量。在这种新的ECP策略中,就使用了复合模式填料WorkBeads 40TREN,它允许等渗细胞上清液无需稀释即可直接上样。在大多数情况下抗体分子等电点高于pH 7.4,因此会直接流穿而不与填料结合,几乎所有的HCD和大多数的HCP都将与之结合(减少95%)而快速去除。


95%的宿主细胞蛋白质 (HCP) 经WorkBeads™ 40 TREN 预处理之后会被有效去除


99%的宿主细胞DNA (HCD) 经过WorkBeads™ 40 TREN 预处理之后会被有效去除


阻止杂质进入WorkBeads™ affimAb 纯化柱

推荐产品:WorkBeads 40Tren------耐高盐复合模式填料

WorkBeads™ 更多产品资料及试用装申请,请扫码联系产品专员

基因有限公司独家合作的Bio-Works是一家专注于生产纯化填料的专业公司,其研发与制造总部位于以生产琼脂糖填料而闻名的瑞典乌普萨拉商业园区,在纯化领域有非常独到的专利技术和产品。Bio-Works基于琼脂糖的高性能产品既可用于生命科学研究阶段的生物大分子纯化,也可用于大规模生产生物制药和诊断产品的商业用途,产品应用集中在抗体纯化、蛋白/多肽、寡核苷酸、疫苗等药物纯化领域。

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