RNA 合成遇难题?NEB 专家来帮您

【字体: 时间:2022年07月11日 来源:基因有限公司

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  高质量的RNA合成试剂不仅能够获得更高的RNA产量,还能确保批间稳定、可重复,为您的早期研发及后续生产工艺保驾护航。

RNA体外合成作为一种重要研究工具,被广泛应用于基因功能分析、新型治疗策略开发等研究应用中。无论是mRNA疫苗还是RNA治疗,我们都期望获得完整、高产量的RNA。

高质量的RNA合成试剂不仅能够获得更高的RNA产量,还能确保批间稳定、可重复,为您的早期研发及后续生产工艺保驾护航。

HiScribe 系列,体外转录的理想选择

1 HiScribe™ T7 高效 RNA 合成试剂盒

▪ 可在体外高效合成多种类型的 RNA,包括内部标记的 RNA 及共转录带帽结构 RNA。
▪ 单次反应可获得高达 180 μg 的产物,或利用帽类似物合成带帽 RNA,产量高达 30-40 μg。
▪ 利用该试剂盒得到的 RNA 适用于多种下游应用,如 RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase 保护分析探针、印迹杂交、反义 RNA 及 RNAi 实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和 RNA疫苗等。
▪ 使用单独的 NTP,有利于用户灵活建立反应。

2 HiScribe™ T7 快速高效RNA合成试剂盒

▪ 预混液的剂型便于快速建立反应
▪ 含 DNase I 和 LiCl,可去除 DNA 模板和快速纯化 RNA
▪ 反复冻融仍可保持最佳活性

3. HiScribe™ T7 mRNA合成试剂盒 (含 CleanCap® Reagent AG)

▪ 可一步完成共转录加帽流程,加帽效率高(加帽产物 > 95%)
▪ 使用 CleanCap Reagent AG 三核苷酸帽技术可获得带有天然的 Cap1 结构的 mRNA,极大的提高了翻译效率,减少了自身免疫反应
▪ 包含单独包装的 NTP 和 CleanCap Reagent AG,适用于全部/部分修饰 NTPs 替换,试剂盒总产量为 1.8 mg mRNA
▪ 该试剂盒可完成 20 次共转录反应(20 μl 体系)。使用 1 μg CLuc AG 对照模板 DNA 进行标准反应,可转录 ≥90 μg RNA。每个试剂盒的产量 ≥1.8 mg RNA

所有反应均使用 5 mM CTP、5 mM UTP 和 6 mM ATP 进行。标准 IVT 反应使用 5 mM GTP,不添加帽结构类似物。ARCA 反应使用 4:1 的 ARCA:GTP(4 mM:1 mM)。含 CleanCap Reagent AG 的 IVT 反应使用 5 mM GTP 和 4 mM CleanCap Reagent AG,反应体系分别参照以下说明书配制:标准 mRNA 合成和 HiScribe T7 mRNA合成试剂盒(含 CleanCap Reagent AG))。反应在 37℃下孵育 2 小时,通过 NanoDrop 检测纯度和定量。

使用 NEB 高纯 RNA 聚合酶,灵活建立反应体系

NEB 提供多种 RNA 聚合酶,可用于体外转录实验。例如 T3, T7, SP6, and Hi-T7 RNA 聚合酶,其中 T7 和 Hi-T7 RNA 聚合酶提供高浓度剂型(为标准浓度的 20 倍),是希望自己建立和优化体外转录反应体系的有经验用户的理想选择。

Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶是一种经基因工程改造的 DNA 依赖性 RNA 聚合酶,对 T7 噬菌体启动子具有高度特异性,跟野生型噬菌体 T7 RNA 聚合酶相比,它可在更高的温度下进行反应,有效减少了 dsRNA 副产物。Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶的最佳温度为 50-52℃。


在更高的体外转录反应温度下,Hi-T7 耐热 RNA 聚合酶(高浓度)减少了 dsRNA 副产物

NEB 研究级和 GMP 级产品

NEB 的研究级和 GMP 级产品可以支持您从微克级研究到克量级治疗性 mRNA 生产。优化的 HiScribeTM RNA 合成试剂盒可实现便捷的体外转录(IVT)流程。

mRNA 合成流程及 NEB 相应产品

NEB Q2促销 RNA产品热卖中

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