Cell-Free克隆系统,无需大肠杆菌的质粒扩增方案

【字体: 时间:2022年08月22日 来源:赛百盛

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  Cell-Free克隆系统是一个革命性的基因操作工具,可以进行无细胞体系的组装和扩增质粒,而无需对大肠杆菌转化和培养。

Cell-Free克隆系统是一个革命性的基因操作工具,可以进行无细胞体系的组装和扩增质粒,而无需对大肠杆菌转化和培养。该产品不仅可以大大简化您的实验流程,还可以扩大您可操作的DNA/质粒范围。本产品由Cell-Free组装试剂盒和Cell-Free扩增试剂盒组成。

Cell-Free组装试剂盒

在Cell-Free组装试剂盒中,DNA片段通过具有同源序列的重叠端组装。首先,片段的每一端都被核酸外切酶消化以暴露单链同源序列。然后,用酶对彼此具有同源序列的相应片段进行退火。该试剂盒在一次等温酶反应中可以同时组装多达50个DNA片段,组装得到的环状DNA可以直接使用Cell-Free扩增试剂盒进行扩增。

优势

• 通过等温酶反应进行高效连接。
• 多达50个DNA片段可以按照设计组装在一起。
• 可组装高达50kb的DNA片段。

Cell-Free扩增试剂盒

Cell-Free扩增试剂盒包含了26种在大肠杆菌染色体复制周期中需要的酶。该试剂盒能够在等温条件下指数扩增具有oriC的环状DNA,10μl反应中可扩增出高达1μg的超螺旋环状DNA。

优势

• 在体外重建大肠杆菌基因组复制系统。
• 可以由1个环状DNA分子扩增出10多亿个。
• 扩增超过50kb的大环状DNA。
• 超PCR 10000倍的保真度。
• 通过在新的反应溶液中传代培养,可以连续扩增多代。
• 扩增产物无需纯化即可转化进大肠杆菌。
• 富含GC且难以通过PCR或大肠杆菌扩增的序列也可以被扩增。

请参考下表了解Cell-Free克隆系统相对于传统的大肠杆菌克隆系统和PCR系统。

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