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为解决现有内皮素 1 受体拮抗剂治疗癌症效果不佳的问题，研究人员开展了靶向黑色素瘤中内皮素受体 B（ETB）激活变构构象的抗体偶联药物（ADC）研究。结果显示 xiRB49 - MMAE 对黑色素瘤细胞和 ETB+异种移植瘤模型疗效显著，RB49 可用于患者分层诊断，为 ETB肿瘤治疗带来新希望。
黑色素瘤，这个听起来就让人胆寒的疾病，近年来在全球的发病率急剧上升。2020 年，全球约有 32.5 万新发病例，5.7 万人因此失去生命。如果照这个趋势发展下去，到 2040 年，病例数可能会激增 68% 。虽然免疫检查点抑制剂（ICIs）给转移性黑色素瘤的治疗带来了新的曙光，但它也伴随着免疫相关的不良事件，很多患者不得不中断治疗。这就像在黑暗中好不容易看到了一丝光亮，却又被乌云遮住了。而内皮素受体 B（ET
B），作为一个已被美国食品药品监督管理局认可的靶点，为黑色素瘤的治疗提供了新的方向。
为了攻克黑色素瘤治疗的难题，来自法国多个研究机构（Université Paris - Saclay、CEA、INRAE 等）的研究人员展开了深入研究。他们发现了一种名为 rendomab B49（RB49）的抗体，它对人内皮素 B 受体（ETB）的激活构象有着独特的亲和力，而且这种亲和力不会被高浓度的内皮素影响。然而，RB49 本身并没有抑制黑色素瘤细胞分裂的药理特性。于是，研究人员在此基础上开发了 xiRB49 - MMAE，这是一种与单甲基奥瑞他汀 E（MMAE）偶联的嵌合抗体偶联药物（ADC）。他们对 xiRB49 - MMAE 的理化性质、结合机制进行了全面研究，并在临床前模型中评估了其治疗潜力，同时还探究了 RB49 作为患者分层诊断工具的临床效用。最终研究表明，xiRB49 - MMAE 在治疗 ETB+黑色素瘤方面展现出了巨大的潜力，为黑色素瘤患者带来了新的希望，这一成果发表在《BJC Reports》上。
研究人员在研究过程中使用了多种关键技术方法。在细胞实验方面，培养了黑色素瘤细胞系 UACC - 257 和 HEK293A 细胞等，通过生物发光共振能量转移（BRET）技术研究蛋白 - 蛋白相互作用和信号通路激活；利用流式细胞术分析抗体的结合特性；进行细胞毒性实验评估药物对细胞的杀伤作用。在体内实验中，构建了 UACC - 257 细胞的皮下异种移植瘤小鼠模型，观察药物对肿瘤生长的影响。此外，还运用免疫组化技术检测 ETB在黑色素瘤转移性淋巴结中的表达情况。
下面来详细看看研究结果：
- xiRB49 保留与 RB49 相同的构象结合特性：通过对 ETB+的 UACC - 257 细胞进行一系列结合实验，发现 RB49 和 xiRB49 都对 ETB具有纳摩尔级的亲和力，即使在高浓度内皮素存在的情况下，它们与 ETB的结合也不会被消除。这表明 xiRB49 保留了 RB49 的结合特性，且结合不受高浓度内皮素影响。
- RB49 或 xiRB49 的药理及内化研究：利用 BRET 技术研究发现，ET - 3 刺激后，ETB优先招募 mGi 和其次招募 mGq，RB49 或 xiRB49 的结合对 mGi 与 ETB的偶联没有显著影响，但能逆转 ET - 3 诱导的对腺苷酸环化酶（AC）的抑制作用，这说明 mAb 结合可诱导 ETB构象改变。同时，研究还发现 ET - 3 存在时，RB49 或 xiRB49 能增加 ETB的内化，验证了 ADC 治疗方法的可行性。
- xiRB49 - MMAE 显示出强大的抗黑色素瘤活性：xiRB49 - MMAE 的药物 - 抗体比（DAR）为 8，通过免疫荧光观察到其能在 UACC - 257 细胞中内化。细胞毒性实验表明，其半数抑制浓度（IC50）为 0.4 ± 7.2 nM，比阳性对照 Zeocin（IC50 27.1 ± 7.2 nM）的效果强 65 倍。在体内实验中，UACC - 257 异种移植瘤对 xiRB49 - MMAE 高度敏感，显著抑制了肿瘤的进展，且未观察到明显的毒性反应。
- 免疫组化用于患者分层：对 10 例黑色素瘤转移性淋巴结进行免疫组化分析，发现所有活检样本对 RB49 免疫染色均呈阳性。这表明 RB49 有可能作为一种伴随检测手段，用于筛选适合 xiRB49 - MMAE 治疗的 ETB+黑色素瘤患者。
研究结论和讨论部分指出，ET 轴在多种癌症中起着重要作用，xiRB49 - MMAE 在临床前模型中展现出了强大的抗黑色素瘤活性，且无明显毒性。然而，也需要考虑 xiRB49 对人和小鼠 ETB亲和力的差异等问题。不过总体而言，这些结果为 xiRB49 - MMAE 在精准医学治疗 ETB+表达癌症方面提供了有力的支持，为进一步的临床开发奠定了坚实的基础，有望为黑色素瘤患者带来更有效的治疗方案。
