Apaf-1：进化保守的DNA感受器调控细胞凋亡与炎症命运抉择的分子开关

本研究发现Apaf-1作为跨物种保守的DNA感受器（ALRs），通过WD40结构域招募RIP2激活NF-κB炎症通路，同时与细胞色素c（Cyt c）竞争结合实现凋亡/炎症的细胞命运转换。该研究揭示了固有免疫与程序性死亡的新型交叉调控机制，为病毒感染、肿瘤及自身免疫疾病治疗提供新靶点。

　　跨物种发现的DNA感知新机制
研究团队通过文昌鱼肠道细胞蛋白质组筛选，首次鉴定出Apaf-1样分子（ALRs）具有保守的双链DNA（dsDNA）结合能力。表面等离子共振（SPR）显示人类Apaf-1与DNA结合解离常数（K_d）达纳摩尔级，电泳迁移率实验（EMSA）证实其诱导Apaf-1寡聚化。结构预测发现NB-ARC与WD40结构域间带正电的DNA结合口袋，而细胞色素c（Cyt c）通过带负电的WD1/WD2界面竞争性抑制DNA结合。

炎症通路的非经典激活途径
在cGAS/STING缺陷细胞中，Apaf-1仍能介导DNA病毒触发的NF-κB活化。免疫共沉淀-质谱（IP-MS）揭示Apaf-1通过WD40结构域招募RIP2，形成>180kDa的复合体。激酶域缺失实验表明RIP2的寡聚化不依赖其激酶活性，而需完整激酶结构域。在Apaf-1^+/?小鼠模型中，HSV-1感染后肝脏炎症浸润减少，病毒载量升高，证实该通路的生理防护功能。

凋亡与炎症的分子转换开关
细胞游离系统实验显示，外源DNA剂量依赖性抑制Cyt c/dATP诱导的caspase-9切割。梯度离心证实DNA促进Apaf-1-RIP2复合体形成，而Cyt c则驱动凋亡体组装。化疗药物顺铂与HSV-60的竞争实验证明，配体结合特异性决定细胞命运走向。值得注意的是，Apaf-1的Cyt c结合突变体（W884A/D902A/T1087A）表现出更强的促炎活性，提示其作为治疗靶点的可操作性。

进化与医学的双重启示
研究揭示ALRs的DNA感知功能在果蝇Dark到人类Apaf-1中高度保守，可能早于线粒体凋亡途径的出现。在肿瘤微环境中，基因组不稳定性导致的胞质DNA可能通过Apaf-1-RIP2轴驱动慢性炎症，而靶向DNA结合界面的药物或可协同BH3模拟剂促进肿瘤细胞凋亡。该发现为神经发育异常（如Apaf-1敲除导致的脑过度生长）提供了新的解释框架——DNA损伤感应缺陷可能导致神经前体细胞清除障碍。