利用基因工程造血干细胞和无饲养层分化培养生成通用型癌症免疫治疗的同种异体嵌合抗原受体自然杀伤 T 细胞（AlloCAR-NKT 细胞）

当前嵌合抗原受体工程化 T（CAR-T）细胞疗法因自体性质，在制造、成本和患者选择方面面临挑战。研究人员开展生成同种异体AlloCAR-NKT 细胞的研究，建立无饲养层培养法。这为通用型癌症免疫治疗提供新途径。

　　摘要：目前，嵌合抗原受体工程化 T（CAR-T）细胞疗法的临床应用潜力，因自体性质受到限制，这在生产制造、成本把控以及患者筛选方面带来诸多难题，进而催生了对通用型（off-the-shelf）疗法的需求。在此，介绍一种体外无饲养层培养方法，可将基因工程造血干细胞和祖细胞（HSP 细胞）分化为同种异体恒定自然杀伤 T（^AlloNKT）细胞及其携带嵌合抗原受体的衍生物（^AlloCAR-NKT 细胞）。研究涵盖慢病毒生成与滴定的详细信息，以及生成^AlloCAR-NKT 细胞所需的体外培养五个阶段，即 HSP 细胞工程化、HSP 细胞扩增、NKT 细胞分化、NKT 细胞深度分化和 NKT 细胞扩增。此外，还阐述了评估^AlloCAR-NKT 细胞的药理学特性、抗肿瘤功效及其作用机制的实验步骤。慢病毒的生成和滴定约需 2 周，而生成成熟的^AlloCAR-NKT 细胞约需 6 周。要取得最佳实验效果，实验人员需具备人干细胞和 T 细胞培养、基因工程以及流式细胞术相关操作能力。