编辑推荐：
为深入探究氨酰 - tRNA 合成酶（aaRSs）活性与特异性，研究人员开展 tRNA 酰化检测技术研究。他们开发出一种液相色谱 - 质谱分析法，能直接监测 aaRS 活性，反应产率低至 0.23% 也可量化，为合成生物学等领域提供有力工具。
氨酰 - tRNA 合成酶（aaRSs）在 mRNA 序列与其编码的蛋白质之间起着至关重要的功能性连接作用。aaRS 酶催化一个两步化学反应，将特定的 tRNA 与对应的 α- 氨基酸进行酰化。除了在翻译过程中的作用外，酰化的 tRNA 还参与非核糖体天然产物的生物合成，并且与多种人类疾病相关。在合成生物学领域，用非标准 α- 氨基酸，或者更近期出现的非 α- 氨基酸单体对 tRNA 进行酰化，是将这些单体整合到蛋白质中的关键第一步，这些蛋白质可用于基础科学研究和应用科学研究。这些研究都需要对 aaRS 的活性和特异性有所了解。
在此，研究人员描述了一种液相色谱 - 质谱分析法，通过检测完整的氨酰 - tRNA（acyl-tRNA）产物来直接监测 aaRS 的活性。在对 tRNA 酰化反应进行简单的后处理后，利用离子对反相色谱法分离氨酰化和非氨酰化的 tRNA 分子，并通过高分辨率飞行时间质谱法测定它们的精确质量。该分析方法快速且简便，能够对低至 0.23% 的反应产率进行量化，并且还可用于检测用柔性核酸酶（flexizyme）酰化的 tRNA，检测出那些用标准技术无法检测到的产物。该实验方案要求具备分子生物学、液相色谱 - 质谱法以及无核糖核酸酶（RNase）技术的基础知识。根据样本数量的不同，完成该实验方案至少需要 5 小时。
