TCR repertoire 多样性：预测非小细胞肺癌放化疗联合度伐利尤单抗治疗后复发的新指标

在不可切除的局部晚期非小细胞肺癌（LA-NSCLC）治疗中，放化疗（CRT）后使用度伐利尤单抗是标准方案，但疗效预测指标有限。研究人员评估 CRT 对 CD8+PD-1+T 细胞的 T 细胞受体（TCR） repertoire 的影响。结果显示 TCR repertoire 多样性可预测疗效，联合 PD-L1 表达预测更精准，意义重大。

　　在肺癌治疗的战场上，非小细胞肺癌（NSCLC）是 “主力军”，其中不可切除的局部晚期非小细胞肺癌（LA-NSCLC）更是让医生们头疼不已。目前，放化疗（CRT）后使用度伐利尤单抗进行巩固治疗，已成为 LA-NSCLC 的标准治疗方案。然而，就像在迷雾中前行，医生们很难精准判断哪些患者能从这种治疗中真正获益。

现有的预测指标，如 PD-L1 表达，虽然能提供一些线索，但并不足以解开疗效预测的谜团。肿瘤微环境中的肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）虽也是预测指标之一，但 CRT 后其相关机制仍不明确，且 CRT 对周边 T 细胞免疫表型的影响也未被深入研究。正是在这样的困境下，来自日本国立癌症中心医院、北里大学医学院等多家机构的研究人员决心开辟新的道路，找到更精准的预测指标，为患者带来希望。

研究人员开展了一项前瞻性研究，从 2019 年 11 月至 2021 年 5 月，在日本的三家机构招募了 40 例接受 CRT 治疗的不可切除 LA-NSCLC 患者。他们像侦探一样，仔细分析患者外周血中 PD-1⁺CD8⁺T 细胞的 T 细胞受体（TCR） repertoire 多样性（DE50），以及 CRT 前后 CD8⁺T 细胞表型的变化，并探究这些变化与临床结果之间的联系。

最终，研究人员取得了重要成果。他们发现，CRT 前后 TCR repertoire 的多样性和特征并没有明显改变，但是 TCR repertoire 多样性（DE50）却是 CRT 联合度伐利尤单抗治疗疗效的预测因素。而且，将 PD-L1 表达与 DE50 相结合，能够更准确地预测治疗效果。这一发现意义非凡，就像是在黑暗中为医生们点亮了一盏明灯，帮助他们更精准地判断患者的治疗效果，制定更合适的治疗方案。该研究成果发表在《npj Precision Oncology》上。

为了开展这项研究，研究人员运用了多种关键技术方法。在样本采集方面，他们前瞻性地收集患者 CRT 前后的外周血样本。在实验检测上，利用流式细胞术（Flow cytometry）对细胞进行分析，通过高通量测序技术进行 TCR repertoire 分析，还借助网络分析探究 TCR 的特征。此外，运用多种统计分析方法，如 Fisher’s 和 Mann–Whitney U 检验、Kaplan–Meier 法等，来解读数据背后的意义。

下面具体来看研究结果：

• 患者特征：40 例患者的中位年龄为 70 岁，多数为男性。患者的 PD-L1 表达情况多样，部分患者存在基因改变。32 例患者在 CRT 后接受度伐利尤单抗治疗，8 例未接受，中位随访期为 17.0 个月1。
• TCR repertoire 的变化：CRT 前后，TCR repertoire 的 DE50、T 细胞受体 β 可变链（TRBV）和连接链（TRBJ）的使用频率，以及 CDR3 序列相关的网络指标，都呈现出显著的正相关。这表明 CRT 治疗并没有改变外周 PD-1⁺CD8⁺T 细胞中 TCR repertoire 的多样性和特征23。
• TCR repertoire 与 T 细胞表型的关系：通过无偏降维聚类分析发现，CRT 后 CD8⁺效应记忆 RA（emra）细胞比例增加，而 CD8⁺幼稚和中央记忆（cm）细胞比例下降。并且，TCR 多样性（DE50）与 CD8⁺幼稚细胞的百分比频率呈正相关4。
• TCR 多样性与肿瘤复发的关系：排除携带 EGFR 突变和 ALK 重排的患者后进行生存分析，发现无复发患者的 DE50 高于复发患者。通过 ROC 曲线确定了 DE50 的临界值，依据此临界值，DE50_High患者的无进展生存期（PFS）显著长于 DE50_Low患者56。
• PD-L1 表达与 TCR repertoire 多样性联合预测疗效：PD-L1 表达≥1% 的患者 PFS 显著长于 PD-L1<1% 的患者。将 TPS 临界值 1% 与 DE50 结合后发现，DE50_Low/TPS<1% 的患者 PFS 最短，而 DE50_High/TPS≥1% 的患者 PFS 最好78。

在讨论部分，研究人员进一步强调了 TCR repertoire 多样性（DE50）对预测 CRT 联合度伐利尤单抗治疗疗效的重要性。尽管放疗理论上会影响 TCR repertoire，但在本研究中，外周血中的 TCR repertoire 在 CRT 前后并未改变。同时，PD-L1 表达与 TCR repertoire 多样性联合预测的效果优于单一因素预测。不过，该研究也存在局限性，样本量较小，且未对比外周血和肿瘤组织中 TCR repertoire 的差异。

总的来说，这项研究发现 CD8⁺PD-1⁺TCR repertoires 多样性高的患者，对 CRT 联合度伐利尤单抗治疗的反应更好。并且，CD8⁺PD-1⁺TCR repertoires 多样性与 PD-L1 表达相结合，有望更精准地预测治疗效果。这一成果为临床医生制定治疗决策提供了重要参考，虽然目前还存在一些不足，但也为后续研究指明了方向，推动肺癌治疗向更精准的方向发展。