皂苷基佐剂在免疫激活中的关键作用：CD11b+树突状细胞和巨噬细胞的摄取与抗原交叉呈递机制探秘

为探究皂苷基佐剂（SBAs）作用机制，研究人员开展其摄取及诱导抗原交叉呈递研究。发现 SBAs 可被 MHCIIloCD11bhi骨髓来源树突状细胞（BMDCs）和巨噬细胞（BMDMs）高效摄取，诱导交叉呈递激活 CD8+T 细胞，助力疫苗研发。

　　在疫苗研发的领域中，佐剂的作用至关重要。非活减毒病毒疫苗往往需要佐剂来增强免疫反应，提升疫苗效果。传统的铝基佐剂虽能引发较强的 Th2 和中和抗体反应，却在诱导 CD8⁺T 细胞介导的免疫方面表现欠佳。而对于癌症和病毒感染的防治来说，CD8⁺杀伤性 T 细胞介导的强大细胞免疫，是疫苗发挥功效的关键所在。

皂苷基佐剂（SBAs）在与其他佐剂的对比中脱颖而出。它能诱导树突状细胞（DCs）产生高水平的抗原交叉呈递，进而激活 CD8⁺T 细胞。含有 SBAs 的疫苗，如用于新冠、疟疾和带状疱疹的疫苗，已在临床取得成功，还有针对癌症的临床试验也展现出良好前景。然而，尽管 SBAs 在诱导 CD8⁺T 细胞免疫上成果显著，但其具体作用机制却尚未完全明晰。

为了深入了解 SBAs 的作用机制，来自荷兰拉德堡德大学医学中心（Radboud University Medical Center）放疗与肿瘤免疫学实验室的研究人员开展了一系列研究。他们的研究成果发表在《npj Vaccines》上，为疫苗开发提供了重要依据。

研究人员运用了多种关键技术方法。首先，通过荧光标记技术，使用脂溶性荧光碳菁染料 SP - DiIC₁₈(3) 对 SBAs 进行标记，以便观察其在不同免疫细胞中的摄取情况。其次，利用流式细胞术对细胞进行分析，鉴定不同细胞亚群，并检测细胞对 SBAs 和抗原的摄取效率、细胞表面标志物表达以及细胞内的变化。此外，还运用了共聚焦显微镜技术，直观观察标记物在细胞内的定位和共定位情况。

研究结果如下：

• 成功对免疫刺激复合物（ISCOMs）进行荧光标记：研究人员测试了 9 种不同的脂溶性荧光碳菁染料，发现 SP - DiIC₁₈(3) 标记的 ISCOMs 效果最佳，其与未标记的 ISCOMs 在多项实验中表现相同，且特异性最高。通过实验观察到，MHCII^loCD11b^hiBMDCs 对 ISCOMs 和卵清蛋白（OVA）的摄取量较高，且 ISCOMs 与 OVA 在细胞内共定位。
• ISCOMs 被高效摄取：MHCII^loCD11b^hiBMDCs 和 BMDMs 能高效摄取 ISCOMs 和 OVA，BMDMs 的摄取能力更强。进一步研究发现，ISCOMs 的摄取主要通过网格蛋白介导的内吞作用，抑制该过程会显著减少 ISCOMs 的摄取。
• 体内细胞摄取 ISCOMs：在体外分离的脾脏 cDC2s 和巨噬细胞中，也观察到了 ISCOMs 和 OVA 的摄取现象，其中 CD11c - CD11b⁺F4/80⁺巨噬细胞的摄取量最高。
• ISCOMs 诱导脂质体（LBs）形成和抗原易位：ISCOMs 能在 BMDCs 和 BMDMs 中诱导 LBs 形成和内体抗原向胞质易位。实验表明，ISCOMs 处理后，BMDMs 中约 40% 的细胞出现 LBs 形成，且与细胞色素 c 共同处理时，细胞活力显著下降，说明抗原易位在两种细胞中均发生。
• ISCOMs 诱导抗原交叉呈递和 CD8⁺T 细胞启动：BMDMs 在摄取 ISCOMs 后，能高效诱导抗原交叉呈递，激活 B3Z T 细胞，且与 OVA 和 ISCOMs 共培养的 BMDMs 能使 CD8⁺OT - I T 细胞的 CD44 表达水平升高、增殖增强、IFN - γ 产生增加。

研究结论和讨论部分指出，该研究成功标记了 SBAs，揭示了其在不同免疫细胞中的摄取机制和作用方式。SBAs 在 BMDCs 和 BMDMs 中的摄取主要通过网格蛋白介导的内吞作用，且能促进抗原易位和诱导 LBs 形成，这表明在 DCs 和巨噬细胞中，SBAs 的分子机制至少存在部分重叠。研究还首次证明了 SBAs 能在 BMDMs 中诱导高水平的抗原交叉呈递，激活 CD8⁺T 细胞。

这一研究成果意义重大。它为理解 SBAs 的作用机制提供了更深入的见解，有助于开发新型、更有效的疫苗，增强抗原交叉呈递和 CD8⁺T 细胞免疫。同时，也为癌症免疫治疗等领域提供了新的思路和理论基础，推动了生命科学和健康医学的发展。