合成环肽纳米佐剂平台：多抗原递送与免疫激活的通用策略

研究人员针对当前疫苗佐剂机制不明确、化学异质性高的问题，开发了一种由环状十肽（cyclic decapeptide）和脂氨基酸（lipoamino acid）组成的自组装纳米佐剂平台VC-13。该平台可有效递送链球菌A组（GAS）肽抗原、蛋白抗原（BSA/SARS-CoV-2 RBD）和小分子半抗原（可卡因），通过TLR2/TLR4双通路激活树突细胞，显著提升IgG抗体效价和调理吞噬活性。这项发表于《npj Vaccines》的研究为亚单位疫苗设计提供了化学定义明确、无需外源佐剂的通用递送方案。

　　

疫苗研发领域长期面临佐剂机制不明确、化学异质性高的挑战。目前获批用于人体的佐剂仅有铝佐剂（alum）、MF59等少数几种，且存在注射部位损伤、免疫应答类型单一等问题。更棘手的是，肽类抗原和小分子半抗原由于免疫原性弱，往往需要强效但副作用大的弗氏完全佐剂（CFA）配合使用。如何开发化学结构明确、能通用适配不同抗原类型的合成佐剂系统，成为疫苗学的重要命题。

澳大利亚研究团队在《npj Vaccines》发表的研究中，报道了一种基于环状十肽（-AK(alkyne)APGKK(alkyne)APG-）和双十六碳脂肽（KKSS-C₁₆-C₁₆）的自组装纳米佐剂平台VC-13。该系统通过物理混合即可形成<500 nm的球形颗粒，成功应用于GAS肽抗原（J8/NS1/88/30）、GnRH肽、蛋白抗原（BSA/SARS-CoV-2 RBD）和可卡因半抗原的递送，其免疫效果媲美甚至超越CFA佐剂。

研究采用的关键技术包括：1）固相肽合成（SPPS）制备环十肽和脂肽；2）点击化学（click chemistry）进行Cy5.5荧光标记；3）透射电镜（TEM）表征纳米颗粒形态；4）流式细胞术分析DC2.4细胞表面标志物（CD40/CD80/CD86/MHC II）；5）TLR2/TLR4激活检测；6）小鼠模型评估免疫原性（IgG亚类ELISA和调理吞噬实验）。

优化佐剂-抗原比例增强体液免疫应答
通过调整环十肽/脂肽与J8抗原的比例（1x-8x），发现8倍佐剂比例的VC-18在单次免疫后即可诱导高滴度IgG（10^5.5），且IgG2c/IgG1比值<1.5显示Th1/Th2平衡应答。针对GAS临床分离株（ACM-2727/D3840）的调理吞噬活性达70-90%，显著优于CFA对照组。

环脂肽促进淋巴靶向与抗原摄取
Cy5.5标记实验显示，环十肽组分4小时内即可在引流淋巴结蓄积（20%注射剂量），并通过肝胆清除途径延长体内滞留。体外DC2.4细胞实验证实，VC-13的抗原摄取效率是游离抗原的5倍（2.5 μM时饱和），主要依赖TLR2/TLR4介导的内吞作用。

树突细胞成熟与TLR激活机制
流式分析揭示脂肽组分KKSS-C₁₆-C₁₆能强力上调CD40（MFI>3000）、MHC II（MFI>2000）表达，激活强度超过LPS和Pam2CSK4阳性对照。VC-13虽激活程度稍弱，但可延迟DC成熟时间窗，更利于抗原提呈。

广谱免疫原性验证
针对不同GAS抗原（NS1/88/30），C端连接PADRE的构型免疫原性最优，其中88/30抗原（α螺旋75%）诱导的抗体滴度比NS1（无规卷曲）高1个数量级。GnRH疫苗（VC-23）同样显示与CFA相当的避孕效果，突破肽类疫苗需强佐剂的限制。

蛋白抗原与半抗原的应用拓展
BSA疫苗（VC-24）使自身抗体水平提升3倍；低剂量SARS-CoV-2 RBD（12.5 μg）经两次免疫即产生中和抗体。可卡因半抗原疫苗（VC-26）通过三唑键连接PADRE，首次实现合成佐剂对药物成瘾疫苗的增强效果。

该研究阐明环十肽的纳米载体功能与脂肽的TLR激动活性协同作用机制：环状结构维持抗原α螺旋构象（如J8的82%螺旋度），而C₁₆脂链激活TLR2/4信号通路。这种全化学合成的平台规避了传统佐剂的批次差异问题，其模块化设计支持快速适配新发传染病抗原（如SARS-CoV-2）。特别值得注意的是，8倍佐剂比例可减少接种次数，对偏远地区疫苗接种具有重要实践意义。未来研究可进一步探索该平台在mRNA疫苗递送和肿瘤免疫治疗中的应用潜力。