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为探究海豹肝病毒(SealHAV)的相关情况,研究人员对北海海豹开展研究。通过高通量测序等技术,发现新毒株 SealHAV_NL/PV/21,其在北海海豹中呈地方性流行,感染幼年海豹且不引发明显病变,有助于了解 HAV 进化。
在广袤的海洋世界里,海豹作为海洋哺乳动物的重要一员,它们的健康状况一直备受关注。近年来,随着研究的深入,越来越多的新型病毒在海洋哺乳动物中被发现。其中,与人类甲型肝炎病毒(HAV)相关的新型嗜肝病毒在多种哺乳动物中的出现,引发了科学界的广泛关注。这些发现不仅为 HAV 的进化研究提供了新线索,也让人们对嗜肝病毒的宿主范围和传播机制充满好奇。然而,对于海豹感染嗜肝病毒的情况,人们了解得还十分有限。比如,海豹肝病毒在不同地区的分布情况如何?它的毒株是否存在变异?对海豹健康会产生怎样的影响?这些问题都亟待解决。
为了揭开这些谜团,德国汉诺威兽医大学(University of Veterinary Medicine Hannover)的研究人员开展了一项关于北海幼年海豹感染肝病毒的研究。他们通过一系列严谨的实验,最终发现了一种新的海豹肝病毒毒株 SealHAV_NL/PV/21,并对其进行了全面深入的研究。这一研究成果发表在《npj Viruses》杂志上,为我们了解海豹肝病毒以及 HAV 的进化提供了重要依据。
在这项研究中,研究人员主要运用了高通量测序(HTS)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、系统发育分析以及原位杂交(FISH)和血清学检测等关键技术方法。研究样本来自荷兰北海沿岸搁浅或死亡的海豹,包括组织样本和血清样本 。
研究结果如下:
- 新毒株的发现:研究人员在一只死亡的 6 个月大的港海豹(Phoca vitulina)肝脏组织中,利用高通量测序检测到一种新的海豹肝病毒 SealHAV_NL/PV/21。通过对该病毒全基因组测序分析发现,它与之前在新英格兰发现的海豹肝病毒有 95.6% 的核苷酸同一性,但 5′非编码区(5′-UTR)多了 51 个碱基对 。
- 分子筛查:研究人员利用 RT-PCR 对 88 只港海豹和 12 只灰海豹(Halichoerus grypus)的肝脏样本进行筛查,在另外 9 只幼年港海豹的肝脏组织中检测到海豹肝病毒。对病毒 VP1 基因测序发现存在一些同义核苷酸变化 。
- 病毒载量评估:通过新建立的定量 RT-PCR(RT-qPCR)检测,研究人员发现海豹肝病毒在肝脏中的 RNA 拷贝数最高,每毫克组织可达 107个 RNA 拷贝,在肝外组织中也能检测到,但含量较低 。
- 系统发育分析:系统发育分析显示,海豹肝病毒与蝙蝠嗜肝病毒聚为一个单系群,与 HAV 有 71.83% 的核苷酸同一性 。
- 组织学和原位杂交:组织学分析发现,感染海豹肝病毒的海豹肝脏组织有的形态正常,有的出现多灶性肝坏死。原位杂交检测到海豹肝病毒 RNA 存在于正常肝细胞的细胞质中,坏死区域未检测到 。
- 血清学检测:利用基于 HAV 的 ELISA 检测 90 份海豹血清样本,发现 14 只幼年港海豹和 1 只幼年灰海豹血清中存在嗜肝病毒抗体,部分样本在康复过程中出现抗体变化 。
研究结论和讨论部分指出,海豹肝病毒在北海海豹种群中呈地方性流行,主要感染幼年海豹,且感染后不引发明显的急性病理变化。研究还发现,海豹肝病毒与蝙蝠嗜肝病毒在进化上关系密切,其 5′-UTR 的结构特征提示与 HAV 可能存在相似的功能。此外,血清学检测表明海豹肝病毒的宿主范围可能扩展到灰海豹。这项研究不仅丰富了我们对海豹肝病毒的认识,也为进一步研究 HAV 的进化起源和传播机制提供了重要参考。同时,研究结果还提示,在海豹康复中心进行血清学检测和隔离措施,有助于防止病毒传播。但海豹肝病毒对感染幼年动物健康的长期影响仍有待进一步研究。总之,该研究成果在海洋哺乳动物病毒学和 HAV 进化研究领域具有重要意义,为后续相关研究奠定了坚实基础。