m6A修饰的circSTX6通过SPI1和IL6/JAK2/STAT3通路调控宫颈癌恶性进展的机制研究

宫颈癌治疗面临预后差和靶点匮乏的挑战。复旦大学附属肿瘤医院团队聚焦circSTX6（hsa_circ_0007905），发现其通过m6A修饰（METTL3/YTHDC1介导）形成正反馈环路，稳定SPI1蛋白并激活IL6/JAK2/STAT3通路，促进肿瘤恶性表型。该研究为宫颈癌分子靶向治疗提供新策略，发表于《Oncogene》。

　　

宫颈癌是全球女性高发的恶性肿瘤，尽管手术、放疗和化疗等手段不断进步，但患者5年生存率仍不理想，尤其在亚洲地区仅为62.34%。传统治疗带来的副作用严重影响患者生活质量，而致癌因素驱动的分子机制尚未完全阐明。近年来，环状RNA（circRNA）因其稳定性和调控多样性成为肿瘤研究热点，但绝大多数circRNA的功能仍属未知，尤其在宫颈癌中缺乏系统研究。

为探索宫颈癌的新型分子靶点，复旦大学附属肿瘤医院团队通过circRNA测序发现hsa_circ_0007905（源自STX6基因，命名为circSTX6）在癌组织中显著高表达。进一步研究揭示，circSTX6通过m6A（N⁶-甲基腺苷）修饰和转录因子SPI1的调控网络，驱动宫颈癌恶性进展。这项突破性成果发表于《Oncogene》，为理解宫颈癌发病机制和开发靶向疗法提供了重要依据。

研究采用多组学技术结合功能实验：

1. 临床样本分析：50例宫颈癌组织与癌旁组织的circRNA测序和qPCR验证；
2. 分子互作检测：RNA免疫共沉淀（RIP）、RNA pull-down和染色质免疫共沉淀（ChIP）证实circSTX6-SPI1-IL6的调控轴；
3. 表观遗传机制：MeRIP-qPCR和m6A甲基化分析揭示METTL3/YTHDC1对circSTX6的修饰；
4. 体内外功能实验：CCK-8、Transwell和小鼠移植瘤模型评估恶性表型。

CircSTX6在宫颈癌中显著高表达
通过circRNA测序发现circSTX6在癌组织中表达量最高（logFC>1），RNase R抗性和反向PCR验证其环状结构。FISH显示其胞质/核双重分布，临床样本证实高表达与不良预后相关（中位生存期52.67个月 vs 未达到）。

CircSTX6促进宫颈癌细胞恶性表型
在低表达细胞系（C33A/ME-180）中过表达circSTX6可增强增殖（CCK-8和EDU实验）、侵袭（Transwell）；而在高表达细胞系（Caski/SiHa）中敲低则表型逆转，证实其致癌功能。

CircSTX6直接结合并稳定SPI1蛋白
catRAPID预测结合界面，RIP和RNA pull-down验证circSTX6与SPI1的1-177氨基酸域结合。机制上，circSTX6抑制SPI1泛素化降解（MG132实验），延长其半衰期（CHX追踪），但不影响mRNA水平。

SPI1激活IL6/JAK2/STAT3通路
GSEA分析提示SPI1与IL6通路关联，荧光素酶报告和ChIP证实SPI1直接结合IL6启动子。过表达circSTX6可上调IL6分泌及p-JAK2/p-STAT3磷酸化，而IL6中和抗体能阻断其促癌效应。

METTL3/YTHDC1介导的m6A正反馈环路
MeRIP-qPCR定位circSTX6第92位腺苷的m6A修饰位点，METTL3过表达增加修饰水平，YTHDC1识别后增强circSTX6稳定性。SPI1又可转录激活METTL3，形成METTL3→circSTX6→SPI1→METTL3的正反馈循环。

体内实验验证调控网络
小鼠移植瘤显示circSTX6过表达组肿瘤体积/重量显著增加（p<0.05），免疫组化显示Ki67、SPI1、METTL3和IL6表达同步升高，而敲低组表型抑制。

这项研究首次阐明circSTX6通过m6A/SPI1/IL6轴驱动宫颈癌恶化的完整机制：METTL3介导的m6A修饰经YTHDC1识别后稳定circSTX6，后者结合SPI1抑制其泛素化降解，进而激活IL6/JAK2/STAT3信号通路；SPI1反式激活METTL3转录，形成恶性循环。该发现不仅拓展了circRNA的表观调控理论，更为宫颈癌的预后评估和靶向治疗（如阻断m6A修饰或IL6通路）提供了双重靶点。未来针对此通路的抑制剂开发可能改善患者预后，尤其对传统治疗耐药病例具有转化潜力。