揭示碎米莎草(Cyperus iria)染色体水平基因组奥秘,助力杂草治理与研究新突破

【字体: 时间:2025年01月23日 来源:Scientific Data 5.8

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  在农业生产中,杂草严重影响作物产量,碎米莎草(Cyperus iria)是危害水稻的恶性杂草且其基因组未公布。为此,研究人员完成其染色体水平基因组组装。结果显示基因组大小 479.08 Mb,含 47,395 个蛋白编码基因。该成果为其分子生物学研究和治理提供资源。

  在农业的大舞台上,杂草就像一群捣乱的 “小怪兽”,严重威胁着农作物的生长。它们与作物争夺阳光、养分、水分和空间,导致作物产量下降、品质降低。据统计,在各类农作物害虫中,杂草造成的作物减产最为严重,比如在小麦、大豆、水稻、玉米、棉花和土豆的种植中,杂草导致的潜在减产分别可达 23%、37%、37%、40%、36% 和 30%,平均减产幅度高达 34%,远超动物害虫和病原体的影响。
随着全球人口的不断增长和资源的日益减少,如何有效治理杂草成为了一项至关重要且极具挑战的任务。从进化的角度来看,杂草拥有丰富的遗传变异和可塑性,能够比作物更快地适应环境变化,迅速适应新的环境因素、农业技术和除草策略。然而,在传统的分子生物学和基因组分析领域,杂草的遗传特征却一直未得到应有的重视。目前已知的 2847 种杂草中,仅有约 26 种进行了测序和从头基因组组装。

碎米莎草(Cyperus iria),作为莎草科的一年生植物,凭借其 C4光合系统和纤维根系,在热带和亚热带地区肆意生长。它繁殖能力超强,每株能产生 3000 - 5000 颗种子,且生命周期短,这使得它迅速成为全球范围内危害水稻生产的主要杂草,在 22 个国家的稻田里 “横行霸道”。据报道,在整个作物生长周期中,碎米莎草的侵害可使水稻减产 64%;在水稻生长的前 30 天,它与水稻的竞争会导致水稻减产高达 12.9%,前 40 天则减产可达 43.5%。

更糟糕的是,为了控制碎米莎草,人们大量使用化学除草剂,这使得碎米莎草逐渐对一些除草剂产生了抗性,如对 ALS(乙酰乳酸合成酶)抑制剂吡嘧磺隆、氯吡嘧磺隆和五氟磺草胺等。但目前,其抗药性在分子层面的机制还知之甚少。此外,碎米莎草作为一种传统中药,具有一定的药理作用,然而其基因组和遗传信息却极为有限,这严重阻碍了对它的分子和遗传研究。

为了攻克这些难题,浙江大学生物技术研究所的研究人员勇挑重担,开展了对碎米莎草染色体水平基因组的研究。他们的研究成果发表在《Scientific Data》上,为这一领域带来了新的曙光。

研究人员主要运用了以下几种关键技术方法:首先,采集了浙江湖州的碎米莎草种子,在浙江大学紫金港校区的实验温室中种植,采集新鲜幼叶。利用 CTAB 法提取高质量基因组 DNA,构建 Illumina 双端文库、PacBio SMRTbell 文库和 Hi - C 文库,并分别在相应的测序平台上进行测序。其次,通过多种软件进行基因组调查,如用 Jellyfish 软件进行 k - mer 分析,Smudgeplot 软件估计倍性水平。然后,使用 Hifiasm 软件进行基因组组装,HiC - Pro 软件和 3D - DNA 工具将基因组组装提升到染色体水平,并用 Racon 软件进行优化。最后,采用多种预测方法对基因组进行注释,包括重复序列、非编码 RNA 和蛋白编码基因的预测。

研究结果


  1. 基因组特征:通过 k - mer 分析(k = 19),估计碎米莎草基因组大小为 520.28 Mb,杂合率为 0.08%,重复率为 47.23%,属于简单基因组。Smudgeplot 分析表明其为二倍体。最终组装得到的基因组大小为 479.08 Mb,contig N50 为 7.02 Mb,GC 含量为 35.64%。99.65% 的组装基因组被锚定到 68 条假染色体上,染色体长度在 3585826 bp(Chr54)到 10521918 bp(Chr66)之间。
  2. 基因组注释:研究发现,碎米莎草基因组中 37.69% 为重复序列,其中 LTR(长末端重复序列)占 8.95%,Gypsy 是主要的 LTR 类型(5.85%),其次是 Copia(2.69%)。共鉴定出 2355 个非编码 RNA 基因,包括 599 个 rRNA、985 个 tRNA 和 771 个其他非编码 RNA。预测得到 47395 个蛋白编码基因,平均基因长度为 2762.5 bp,约 93.26% 的蛋白编码基因得到了功能注释。
  3. 技术验证:将校正后的高质量 Illumina reads 与组装基因组序列比对,比对率达到 99.25%,平均测序深度为 215×,20× 及以上的序列深度占 99.78%。BUSCO 分析显示,基因组组装的完整性高达 95.11%,基因集完整性为 96.28%。LTR Assembly Index(LAI)值为 9.77,Hi - C 相互作用热图表明染色体水平基因组组装完整且可靠。

研究结论与讨论


这项研究成功完成了碎米莎草染色体水平的基因组组装,为深入了解碎米莎草的生物学特性提供了全面的基因组信息。这些数据不仅有助于揭示其快速繁殖、环境适应和除草剂抗性的分子机制,为开发更有效的杂草治理策略奠定了基础;还为研究其作为传统中药的药理作用提供了遗传依据,推动了相关药物研发。

从更广泛的角度来看,该研究为杂草基因组学领域提供了重要的参考,有助于深入理解杂草的进化和适应机制,为全球农业生产中的杂草治理提供了新的思路和方法,对保障粮食安全和农业可持续发展具有重要意义。未来,基于这些基因组数据,有望开发出更精准、环保的除草技术,在不影响作物生长的前提下,更好地控制碎米莎草等杂草的危害,让农作物在健康的环境中茁壮成长,为农业的发展注入新的活力。

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