解析效应 γδ T 细胞的转录组密码：探寻亚群特异性调控因子

γδ T 细胞亚群在免疫应答中功能各异，但其外周功能的分子调控机制不明。研究人员构建 Il17a-GFP:Ifng-YFP 双报告基因小鼠，分析 γδ17与 γδIFN细胞转录组。鉴定出 20 个新的特征基因，发现 CD6 和 Themis 可调节 γδIFN细胞激活，为理解 γδ T 细胞亚群功能提供依据。

　　在免疫系统这个神秘的 “王国” 里，γδ T 细胞是一群独特的 “卫士”。它们分为不同的亚群，比如能产生白细胞介素 - 17A（IL - 17A）的 γδ¹⁷细胞和能分泌干扰素 - γ（IFN - γ）的 γδ^IFN细胞。这些亚群在多种疾病中扮演着重要角色，在疟疾感染时，γδ^IFN细胞会引发免疫病理反应，而 γδ¹⁷细胞则能起到保护作用。然而，长期以来，科学家们对这些 γδ T 细胞亚群在周边组织中发挥功能的分子调控机制却知之甚少，就像在黑暗中摸索，看不清前行的方向。为了揭开这个神秘的面纱，来自葡萄牙古尔班基安分子医学研究所（Gulbenkian Institute for Molecular Medicine）等机构的研究人员踏上了探索之旅，他们的研究成果发表在《Nature Immunology》杂志上。

研究人员开展的这项研究，主要是为了深入剖析 γδ¹⁷细胞和 γδ^IFN细胞在分子层面的差异，找到调控它们外周功能的关键因素。为了实现这一目标，研究人员采用了多种技术方法。首先，他们构建了 Il17a - GFP:Ifng - YFP 双报告基因小鼠模型，通过这个模型可以精准地识别和分离出 γδ¹⁷细胞和 γδ^IFN细胞。然后，利用 RNA 测序技术（RNA - seq）对这些细胞的转录组进行深度分析，就像是给细胞的基因表达做了一次全面的 “体检”。同时，运用流式细胞术对细胞进行分选和检测，确保研究对象的准确性。

研究结果主要分为以下几个方面：

• 转录组差异：研究人员通过对双报告基因小鼠外周淋巴结中 γδ¹⁷细胞和 γδ^IFN细胞的转录组分析发现，这两种细胞的转录组存在显著差异。在检测到的 12,822 个基因中，大量基因的表达存在差异，其中 49% 的基因在 γδ¹⁷细胞和 γδ^IFN细胞之间呈现出不同的表达模式。这表明 γδ¹⁷细胞和 γδ^IFN细胞在基因表达层面有着明显的分化。
• 基因家族和信号通路：进一步分析发现，γδ¹⁷细胞和 γδ^IFN细胞在基因家族和信号通路方面也存在显著差异。γδ¹⁷细胞中，与细胞信号转导、细胞间通讯等相关的基因和信号通路更为丰富，这使得它们能够更好地感知和整合外界信号；而 γδ^IFN细胞则在转录和翻译相关的基因以及核糖体代谢等方面表现突出。
• 特征基因的鉴定：研究人员从差异表达基因中筛选出了 20 个新的特征基因，这些基因在 γδ¹⁷细胞和 γδ^IFN细胞中具有明显的表达差异。通过对不同组织和疾病模型的研究验证了这些特征基因的特异性，为后续研究 γδ T 细胞亚群的功能提供了重要的分子标记。
• 关键调控因子的功能验证：在这些特征基因中，研究人员重点关注了 CD6 和 Themis 这两个基因。通过体外和体内实验发现，CD6 和 Themis 能够促进 γδ^IFN细胞的激活和增殖。在脑型疟疾（ECM）模型中，敲除 CD6 或 Themis 基因的小鼠对疾病的易感性明显降低，这进一步证实了它们在调控 γδ^IFN细胞功能中的重要作用。

在研究结论和讨论部分，这项研究成果具有多方面的重要意义。从基础研究角度来看，它揭示了 γδ¹⁷细胞和 γδ^IFN细胞在转录组层面的差异，为深入理解 γδ T 细胞亚群的生物学特性提供了丰富的信息。研究人员鉴定出的 20 个特征基因以及对 CD6 和 Themis 功能的验证，为后续研究 γδ T 细胞亚群的分化、激活和功能调控奠定了坚实的基础。从临床应用角度考虑，这些发现有助于开发针对 γδ T 细胞相关疾病的新疗法。在疟疾等疾病中，γδ T 细胞亚群的功能失调与疾病的发生发展密切相关，通过调节 CD6 和 Themis 等关键分子，或许能够为治疗这些疾病提供新的策略。此外，研究中所采用的研究方法和技术，如双报告基因小鼠模型的构建、RNA 测序和流式细胞术的联合应用等，也为其他研究人员在相关领域的研究提供了有益的参考和借鉴。