hsa_circ_0001304：血管重塑疾病治疗新靶点的关键探索

心血管疾病发病率和死亡率高，血管平滑肌细胞（VSMCs）自噬异常与血管重塑疾病相关。研究人员探究血小板衍生生长因子 - BB（PDGF - BB）调控的 hsa_circ_0001304（circ - 1304）在血管重塑中的作用。结果发现 circ - 1304 促进 VSMCs 自噬和内膜增生，或为治疗靶点。

　　在心血管疾病的大舞台上，血管重塑疾病，如动脉粥样硬化和高血压，是危害人类健康的 “大反派”。这些疾病的高发病率和死亡率，让医学研究者们如临大敌。血管平滑肌细胞（VSMCs）作为血管壁的主要组成细胞，其病理变化在血管重塑疾病中起着关键作用，常常与血管内膜增生 “勾结” 在一起。而细胞自噬，这个细胞内的 “清洁小卫士”，在正常情况下能帮助细胞降解受损蛋白或细胞器，维持细胞内环境的稳定。但在心血管疾病中，VSMCs 的自噬却出现了异常，这让情况变得更加复杂。

更棘手的是，目前针对血管重塑疾病的潜在治疗策略中，内膜增生和 VSMCs 自噬之间的关系十分复杂，时而正相关，时而负相关。这就像一团乱麻，让医生们在制定治疗方案时感到迷茫。同时，虽然已经发现了一些调节 VSMCs 自噬的环状 RNA（circRNAs），但仍有大量未知等待探索。在这样的背景下，河北医科大学的研究人员勇敢地挑起了解开谜团的重担，开展了一项关于 PDGF - BB 调控的 hsa_circ_0001304（circ - 1304）在血管内膜增生和 VSMCs 自噬中作用的研究。

这项研究成果发表在《Communications Biology》上，意义重大。它为血管重塑疾病的治疗提供了新的方向，有望帮助医生们找到更有效的治疗方法，拯救更多患者的生命。

研究人员为开展研究，用到了以下几个主要关键技术方法：首先是定量实时聚合酶链反应（qRT - PCR），用于分析相关基因的表达水平；其次是 RNA 荧光原位杂交（RNA FISH）技术，来确定 RNA 在细胞内的定位；还有蛋白质免疫印迹法（Western blot analysis），检测蛋白质的表达情况；另外，双荧光素酶报告基因实验（Dual - luciferase reporter gene assay）用于验证分子间的相互作用；动物实验则建立了小鼠颈总动脉结扎模型，评估 circ - 1304 在体内的作用。

下面来看看具体的研究结果：

• Overexpression of circ - 1304 promotes VSMC autophagy：研究人员通过一系列实验，如 qRT - PCR 分析发现，在 PDGF - BB 刺激的人主动脉平滑肌细胞（HASMCs）中，circ - 1304 水平升高。经多种实验证实了 circ - 1304 的环状结构，且它主要富集在细胞质中。功能实验表明，过表达 circ - 1304 会消耗自噬底物 Sequestosome 1（SQSTM1/p62），促进微管相关蛋白 1 轻链 3β（MAP1LC3B/LC3） - I 向 LC3 - II 的转化，增加自噬泡面积和数量，这些都说明 circ - 1304 能促进 VSMCs 自噬。
• Circ - 1304 promotes VSMC autophagy by sponging miR - 636：由于 circ - 1304 主要位于细胞质且有与 AGO2 蛋白结合的位点，研究人员推测它可能作为 miRNA 海绵发挥作用。通过生物信息学分析构建 circRNA - miRNA - mRNA 网络，发现 circ - 1304 和 YTH N6 - methyladenosine RNA binding protein F2（YTHDF2）的 mRNA 的 3′非翻译区（3′ - UTR）都有 miR - 636 的结合位点。后续实验，如双荧光素酶报告基因实验、RNA FISH 分析和 Western blot 分析等，证实了 circ - 1304 可作为 miR - 636 的海绵，竞争性结合 miR - 636，从而提高 YTHDF2 蛋白水平，促进 VSMCs 自噬。
• YTHDF2 promotes VSMC autophagy by degrading mTOR mRNA in an m⁶A - dependent manner：研究发现，敲低 YTHDF2 会抑制 VSMCs 自噬，导致 p62 积累，LC3 I 向 LC3 II 的转化减少，自噬泡数量降低。通过对 YTHDF2 RIP - seq 数据集进行分析，发现 mTOR 可能是 YTHDF2 调控自噬的潜在靶点。进一步实验，如 MeRIP - qRT - PCR 分析、RIP - qRT - PCR 分析等表明，YTHDF2 能与 mTOR mRNA 结合，以 m⁶A 依赖的方式促进 mTOR mRNA 的降解，进而促进 VSMCs 自噬。同时，circ - 1304/miR - 636 也参与调节 mTOR 的表达。
• Overexpression of circ - 1304 aggravates neointimal hyperplasia：在小鼠颈总动脉结扎诱导的内膜增生模型中，研究人员发现，通过慢病毒介导过表达 circ - 1304，会加剧内膜形成，同时 YTHDF2 和增殖细胞核抗原（PCNA）水平增加，mTOR 和 p62 水平降低，这表明 circ - 1304 会加重内膜增生，且该过程伴随着自噬激活。

研究结论表明，circ - 1304 是一种与 VSMCs 自噬相关的 circRNA，在 PDGF - BB 处理后可促进 VSMCs 自噬，证实了 PDGF - BB 通过 circRNA 调节 VSMCs 自噬。circ - 1304 还会加重内膜增生，其机制是通过依赖 miR - 636 调节 YTHDF2/mTOR 轴，且该轴与 m⁶A 修饰有关。这一研究为治疗内膜增生相关的心血管疾病提供了潜在的治疗靶点。在讨论部分，研究人员指出，虽然 circRNAs 在血管重塑疾病中的作用逐渐被揭示，但仍有许多未知等待进一步探索，比如 circ - 1304 潜在的调控机制，以及它与其他 RNA 结合蛋白或 miRNAs 的相互作用等。未来对这些方面的深入研究，将有助于更全面地了解血管重塑疾病的发病机制，为开发更有效的治疗策略奠定坚实基础。