剂量依赖的祛湿化瘀方通过抑制Caspase-2/SREBP-1通路改善MASLD机制研究

本研究针对代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD）中内质网应激驱动的脂质合成异常问题，通过动物模型验证了祛湿化瘀方（QHD）剂量依赖性调控Caspase-2/SREBP-1信号通路的疗效。结果表明低剂量QHD显著改善胰岛素抵抗和肝脏脂代谢（TG降低p<0.01），高剂量特异性抑制Caspase-2蛋白表达（p<0.01）和核SREBP-1活化（p<0.05），为中医药分层治疗MASLD提供了实验依据。

　　

随着生活方式和饮食结构的改变，代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD）已成为全球最常见的慢性肝病，其特征是肝脏脂肪堆积超过5%并伴随至少一项代谢紊乱指标。这种疾病与肥胖、胰岛素抵抗和血脂异常紧密交织，形成复杂的病理网络。最令人困扰的是，目前针对MASLD的单靶点药物治疗往往效果有限——比如乙酰辅酶A羧化酶（ACC）抑制剂NDI 010976虽能抑制脂肪生成，却会引发代偿性脂质摄取增加，导致治疗失败。这就像试图用手指堵住漏水的竹篮，堵住一个洞，水又从另一个洞涌出。

问题的核心在于内质网应激（ER stress）与脂质代谢的恶性循环。当肝脏细胞面临代谢压力时，内质网中未折叠蛋白反应（UPR）被激活，进而通过IRE1α/Caspase-2-S1P信号分支触发固醇调节元件结合蛋白（SREBPs）的持续活化，这些转录因子如同"脂质合成开关"，打开脂肪生成基因的表达，加剧肝脏脂肪沉积。更棘手的是，完全抑制内质网应激可能损害细胞的适应性调节能力，这使得治疗策略的制定变得尤为复杂。

在这样的背景下，多组分、多靶点的传统中药复方展现出独特优势。祛湿化瘀方（Qushi Huayu Decoction, QHD）由栀子、茵陈、田基黄、虎杖和姜黄五味中药组成，前期临床研究已证实其对MASLD的治疗效果，但其作用机制是否通过调控Caspase-2/SREBP-1通路，以及不同剂量是否产生差异化效应，仍待阐明。为此，刘倩等研究人员在《Hereditas》发表了最新研究成果，系统揭示了QHD的剂量依赖性作用机制。

研究人员采用28周龄C57BL/6J小鼠高通量饮食（HFD）诱导的MASLD模型，模拟人类慢性代谢应激状态。通过低（0.867 g/kg）、中（1.733 g/kg）、高（3.466 g/kg）剂量QHD干预5周，结合Caspase-2抑制剂阳性对照，综合运用血清生化检测、肝组织病理学分析（HE和油红O染色）、实时荧光定量PCR、Western blot和Caspase-2活性检测等技术手段，从表型到机制层层深入。

不同剂量QHD改善MASLD模型小鼠代谢表型

实验设计显示（图1A），正常饮食（ND）组小鼠状态良好，而HFD组则表现为体重加速增长、反应性降低和毛发油腻。药物干预后，各治疗组体重显著下降，其中低剂量QHD组增重最缓（图1B）。在肝功能改善方面，各剂量QHD均显著降低血清ALT和AST水平（图1C,D），其中低、中剂量显著降低LDL水平（p<0.05）（图1E,F）。特别值得注意的是，低剂量QHD在改善空腹血糖（FBG）、空腹血清胰岛素（FSI）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）方面表现最为突出（图1G,H,I），显示出优异的代谢调节能力。

不同剂量QHD改善MASLD模型小鼠肝脏脂质沉积

肝脏表型分析显示，HFD组肝脏显著增大、颜色苍白、边缘圆钝，而各治疗组肝脏外观明显改善（图2C）。肝湿重和肝体比在HFD组显著升高，各治疗组均显著降低（图2A,B）。组织病理学结果证实，所有剂量QHD均显著减轻肝细胞脂肪变性（图2C）。肝组织甘油三酯（TG）和游离脂肪酸（FFA）检测显示，与ND组相比，HFD组显著升高；各治疗组均显著降低，其中低剂量QHD降低TG效果最为显著（图2D,E）。

高剂量QHD抑制MASLD模型小鼠Caspase2/SREBP1通路表达

机制研究表明，与ND组相比，HFD组肝脏Caspase-2和核SREBP-1（n-SREBP1）蛋白表达显著升高，而高剂量QHD组显著降低这两种蛋白的表达（图3A,E）。相应地，肝组织Caspase-2 mRNA水平和Caspase-2活性在HFD组显著高于ND组，各QHD剂量组呈剂量依赖性降低，高剂量组下降最明显（图3B,C）。S1P表达未显示一致趋势（图3D）。SREBP1下游脂质合成相关基因p-ACC1和SCD-1的蛋白表达（图3F）因样本量小而未进行统计，但灰度测量仍显示剂量依赖性下降趋势，高剂量组值最低。

研究结论与讨论部分指出，QHD在MASLD治疗中表现出互补的剂量依赖性效应：低剂量主要通过激活AMPK（腺苷酸活化蛋白激酶），增加PGC-1α（过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α）和CPT-1A（肉碱棕榈酰转移酶1A）表达，促进脂肪组织褐变（UCP-1↑）和脂肪酸β氧化，同时降低IRE1α磷酸化，减少XBP1s（X盒结合蛋白1剪接体）和SREBP-1c转录，优先纠正代谢紊乱；而高剂量则在慢性HFD应激下抑制Caspase-2，减少核SREBP-1及其下游脂质合成酶（ACC-1、SCD-1）表达，同时抑制JAK2/STAT3轴，降低IL-6和TNF-α，这些联合效应导致内质网应激整体减弱，代表通路抑制占主导地位。

这种分层调节模式反映了中药复方多组分药代动力学特征——小分子活性成分（如姜黄素、白藜芦醇）在低剂量时优先激活AMPK这一细胞能量感受器，快速纠正代谢紊乱；而高剂量则满足慢性模型中持续靶点抑制的阈值药效学要求。与Kim等提出的Caspase-2中心模型不同，QHD的优势在于其对内质网应激网络的分级调控，避免了Caspase-2基因敲除可能破坏 essential 凋亡功能的问题。

这一发现具有重要的临床转化价值。它符合中医"君臣佐使"的配伍原则——高剂量成分作为"君药"直接靶向核心病理节点，低剂量成分作为"臣药"调节代谢环境。对于早期以代谢紊乱为主的MASLD患者，可优先使用低剂量QHD（8-12周）快速恢复代谢稳态；而对于中晚期以脂肪生成和炎症为主的MASLD患者，则需使用高剂量方案（12-24周）特异性抑制Caspase-2/SREBP1和JAK2/STAT3等关键通路，阻断DNL相关基因表达并快速抑制炎症反应。

该研究不仅揭示了QHD治疗MASLD的新机制，还为中医药个性化治疗提供了科学依据，展示了多靶点、多层次调节策略在复杂代谢性疾病治疗中的独特优势。