hsa_circRNA_0101125通过miR-143-3p/ZNF148轴调控食管鳞癌增殖、迁移与侵袭的机制研究

本研究揭示了环状RNA hsa_circRNA_0101125通过吸附miR-143-3p解除其对ZNF148的抑制，进而促进食管鳞癌（ESCC）细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制。该发现为ESCC的靶向治疗提供了新的潜在靶点和理论依据。

　　

ABSTRACT

环状RNA（circRNA）作为非编码RNA的重要成员，通过竞争性内源RNA（ceRNA）机制在多种癌症中发挥关键调控作用。本研究聚焦于hsa_circRNA_0101125在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的功能机制，发现其通过miR-143-3p/ZNF148轴显著促进ESCC细胞的恶性表型。

1 Introduction

食管癌是全球范围内高死亡率的恶性肿瘤，其中食管鳞状细胞癌（ESCC）占90%以上。由于ESCC细胞具有高度侵袭和转移能力，患者预后极差。环状RNA（circRNA）因其特殊的环状结构和稳定性，成为癌症研究的新热点。本研究团队前期通过circRNA芯片和RT-qPCR分析发现hsa_circRNA_0101125在ESCC组织中显著高表达，但其在ESCC中的具体功能机制尚未明确。

2 Materials and Methods

研究采用KYSE150和ECA109两种ESCC细胞系作为体外模型。通过荧光原位杂交（FISH）技术确定hsa_circRNA_0101125的亚细胞定位。使用shRNA载体敲低hsa_circRNA_0101125表达，并转染miR-143-3p模拟物和抑制剂。通过CCK-8法检测细胞活力，划痕实验检测迁移能力，Transwell实验检测侵袭能力。采用RT-qPCR和Western blot分别检测基因和蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告实验验证ZNF148与miR-143-3p的直接相互作用。

3 Results

3.1 hsa_circRNA_0101125的定位及相关基因表达

FISH实验显示hsa_circRNA_0101125定位于细胞质中。RT-qPCR分析表明，与KYSE150细胞相比，ECA109细胞中hsa_circRNA_0101125和miR-143-3p表达水平较低，而ZEB1和ZHX3的mRNA表达水平显著升高。

3.2 hsa_circRNA_0101125干扰对食管癌细胞的影响

敲低hsa_circRNA_0101125后，miR-143-3p表达显著上调。CCK-8实验显示细胞活力降低，划痕实验表明细胞迁移能力下降，Transwell实验显示细胞侵袭能力减弱。Western blot检测发现E-钙粘蛋白（E-cadherin）表达上调，ZNF148和波形蛋白（Vimentin）表达下调。

3.3 双荧光素酶报告实验结果

双荧光素酶报告实验证实miR-143-3p与ZNF148的3'UTR区域存在直接结合位点。当miR-143-3p与野生型ZNF148结合时，荧光素酶活性显著降低，而突变型ZNF148则无此效应。

3.4 抑制miR-143-3p逆转hsa_circRNA_0101125的作用

在敲低hsa_circRNA_0101125的基础上抑制miR-143-3p，可部分恢复细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Western blot显示ZNF148和Vimentin蛋白表达回升，E-cadherin表达回落。

3.5 蛋白表达变化

Western blot分析进一步证实，hsa_circRNA_0101125/miR-143-3p轴通过调控ZNF148表达影响上皮-间质转化（EMT）标志物表达，从而影响ESCC细胞的恶性行为。

4 Discussion

本研究首次揭示了hsa_circRNA_0101125通过ceRNA机制吸附miR-143-3p，解除其对ZNF148的抑制作用，进而促进ESCC细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制。ZNF148作为锌指蛋白家族成员，在ESCC进展中发挥促癌作用。研究发现干扰hsa_circRNA_0101125可上调miR-143-3p表达，抑制ZNF148表达，进而抑制EMT进程，降低细胞恶性表型。

5 Conclusions

hsa_circRNA_0101125通过miR-143-3p/ZNF148轴促进ESCC的进展，这一发现为ESCC的诊断和治疗提供了新的潜在靶点。针对该轴的干预可能成为ESCC治疗的新策略。