基于分子印迹聚合物涂层毛细管的蛋清溶菌酶在线富集与电泳检测新方法

本研究开发了一种新型分子印迹聚合物涂层毛细管电泳技术，通过模板固定化策略与表面印迹技术相结合，成功实现了蛋清样品中痕量溶菌酶的高选择性富集与检测，检测限达0.1 ng/mL，回收率达96.0%-98.7%，为生物样品中蛋白质分析提供了新方案。

　　

通过创新性地结合模板固定化策略、表面印迹技术和印迹后修饰策略，研究人员开发出分子印迹聚合物(MIP)涂层毛细管用于蛋清中溶菌酶的分析。首先在毛细管表面依次构建聚多巴胺(PDA)涂层和3-巯基丙酸(3-MPA)自组装层用于固定模板蛋白。随后以多巴胺作为功能单体和交联剂，通过自聚合形成表面印迹的PDA涂层。为降低非特异性吸附，引入具有抗蛋白吸附能力的部分水解聚(2-甲基-2-噁唑啉)(PMOXA)。最终通过洗脱模板蛋白获得溶菌酶分子印迹涂层毛细管。通过电渗流迁移率测定、扫描电镜(SEM)、静态水接触角和衰减全反射傅里叶变换红外光谱(ATR-FTIR)对涂层进行表征。使用该毛细管分析0.5-10.0 ng/mL浓度范围的溶菌酶标准溶液，获得0.1 ng/mL的检测限。该方法展现出良好的准确性、重复性、重现性和选择性，在蛋清样品中实现96.0%-98.7%的回收率。