利用基于活性的蛋白质标记探针开发用于丝氨酸水解酶的单分子酶活性测定方法

《Small Methods》：Development of Single-Molecule Enzyme Activity Assay for Serine Hydrolases Using Activity-Based Protein Labeling Probes

单分子酶活性检测通过活性探针实现丝氨酸水解酶（如PSA和颗粒酶B）在血液中的特异性识别，发现活性颗粒酶B与肝脏损伤存在关联。

　　

摘要

单分子酶活性测定方法在阐明蛋白质变体层面的异常功能方面展现了其潜力。然而，此类测定方法的主要缺点是可靶向的酶种类有限。本文开发的单分子酶活性测定方法使用了基于酶活性的探针，这些探针能够对整个酶超家族中的活性酶进行标记。通过使用荧光膦酸类探针进行原理验证实验，成功在血液等复杂生物系统中检测到了丝氨酸水解酶（如PSA和颗粒酶B）的单分子活性形式。实验结果表明，血液中的活性颗粒酶B可能作为免疫细胞激活相关肝损伤的指标。

利益冲突

作者声明不存在利益冲突。