LC-MS/MS技术在花生样品中黄曲霉素检测中的应用：方法验证及在进口商品中的应用

《Food Analytical Methods》：The Use of LC-MS/MS for the Determination of Aflatoxin in Peanut Samples: Method Validation and Application in Imported Commodities

花生作为印尼主要进口的非洲和亚洲农产品，易因储存运输不当滋生黄曲霉（A. flavus/P. parasiticus）产生剧毒黄曲霉毒素。本研究建立超声辅助提取-超高效液相色谱-串联质谱（UAE-LC-MS/MS）检测体系，总黄曲霉毒素LOQ 15 μg/kg（R2＞0.999，回收率101-113%），B1 LOQ 6 μg/kg（回收率75-109%），方法验证符合SANTE 11312/2021及国际毒素检测规范，基质干扰＜30%LOQ。2023-2024年检测40份跨国花生样本，仅62.5%符合印尼法规限值（总毒素≤20 μg/kg，B1≤15 μg/kg），证实现行检测体系存在筛查盲区。

　　

摘要

花生是一种广泛交易的农产品，印度尼西亚从非洲和亚洲国家进口了大量花生。然而，花生极易受到真菌侵袭，尤其是在储存和运输条件不佳的情况下。这种环境会促进黄曲霉（Aspergillus flavus）和寄生曲霉（Aspergillus parasiticus）产生黄曲霉素，从而对健康构成严重威胁。因此，有效监测黄曲霉素的含量对于确保食品安全至关重要。印度尼西亚规定了黄曲霉素B1的最大残留限值为15 μg/kg，总黄曲霉素（黄曲霉素B1 + B2 + G1 + G2之和）的最大残留限值为20 μg/kg。本研究开发并验证了一种可靠、灵敏、简便且经济高效的检测方法，用于测定花生中的总黄曲霉素和黄曲霉素B1含量。该方法采用超声波辅助提取与超高效液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）联用技术，其验证过程遵循了SANTE 11312/2021 v2指南以及《食品和饲料中霉菌毒素及植物毒素检测指南》。提取过程包括将样品溶解在乙腈中，随后进行1小时的超声处理，并以3700 rpm的速度离心4分钟。与以往的方法相比，该方法在样品制备过程中更加经济、简便且快捷。总黄曲霉素的定量限（LOQ）为15 μg/kg，黄曲霉素B1的定量限为6 μg/kg。校准曲线表现出优异的线性（R2 > 0.999），残差范围在?5%至19%之间。该方法具有高度特异性，因为试剂和基质空白值的检测结果均低于定量限的30%。总黄曲霉素的准确度在101%至113%之间，黄曲霉素B1的准确度在75%至109%之间，相对标准偏差（%RSD）分别为4.48%和16.8%。参与国际能力验证测试进一步证实了该方法的可靠性，所有z分数均处于满意范围内（|z| ≤ 2）。2023年至2024年间，该方法应用于来自多个国家的40个花生样本，结果显示仅有25个样本符合法定黄曲霉素含量限制。