CircRBM33通过调控miR-512-5p/SLC1A5轴促进结直肠癌进展的机制研究

本研究揭示环状RNA circRBM33在结直肠癌（CRC）中通过吸附miR-512-5p上调SLC1A5表达，从而促进肿瘤细胞增殖、迁移和谷氨酰胺代谢。该发现为CRC靶向治疗提供了新的理论依据和潜在治疗靶点。

　　

Highlight

CircRBM33和SLC1A5在CRC中高表达而miR-512-5p低表达

通过GSE138589微阵列数据分析发现，circRBM33在CRC组织中存在显著过表达（图1A）。后续实验验证显示，与癌旁组织相比，CRC组织中circRBM33和SLC1A5的mRNA和蛋白水平均显著升高（P<0.05），而miR-512-5p表达明显下调（P<0.05）。三种CRC细胞系（SW480、LoVo、HCT-116）也呈现相同趋势。

敲低circRBM33抑制CRC细胞恶性表型

通过MTT、EdU、流式细胞术和划痕实验证实：干扰circRBM33可显著抑制CRC细胞增殖、迁移并诱导凋亡（P<0.05）。Western blot显示增殖相关蛋白c-Myc和CyclinD1表达下降。体外实验进一步表明，circRBM33缺失可抑制细胞糖酵解和谷氨酰胺代谢水平。

circRBM33通过miR-512-5p调控SLC1A5表达

经CircInteractome和TargetScan预测，circRBM33与miR-512-5p存在结合位点，SLC1A5则是miR-512-5p的潜在靶标。双荧光素酶报告实验证实miR-512-5p可特异性结合circRBM33和SLC1A5的3'-UTR区域。回复实验表明，过表达SLC1A5或抑制miR-512-5p均可逆转由circRBM敲低引起的肿瘤抑制效应。

体内实验验证circRBM33的促癌作用

裸鼠成瘤实验显示，沉默circRBM33可显著抑制移植瘤的生长速度和体积（P<0.05），肿瘤组织中Ki-67阳性率降低，SLC1A5蛋白表达下降，进一步支持了体外实验结论。

Conclusion

本研究阐明circRBM33通过吸附miR-512-5p解除其对SLC1A5的抑制，从而激活谷氨酰胺代谢通路并驱动CRC进展。该轴心机制为CRC的分子靶向治疗提供了新策略。