MTHFR C677T与VDR C>T基因变异对复发性流产影响的遗传易感性研究

《Egyptian Journal of Medical Human Genetics》：Impact of MTHFR C677T (rs1801133) and VDR C?>?T (rs2228570) gene variants in recurrent spontaneous abortion

本研究针对复发性流产（RSA）的遗传机制，聚焦MTHFR C677T(rs1801133)和VDR C>T(rs2228570)基因变异。通过病例对照设计（55例RSA患者vs 55例对照），采用PCR-RFLP技术进行基因分型。结果显示MTHFR T等位基因显著增加RSA风险（OR=2.494, 95%CI 1.08-5.756），而VDR变异未显示显著关联。该发现为印度孟加拉人群RSA的遗传筛查提供了重要依据。

　　

在生殖医学领域，复发性流产（Recurrent Spontaneous Abortion, RSA）犹如一道难解的谜题，困扰着众多渴望成为父母的家庭。根据印度卫生部的数据，约有7.4%的印度女性深受其扰。当连续两次或以上的妊娠在20周前不幸终止，便被定义为RSA。尽管其病因复杂多样，包括解剖结构异常、内分泌失调、免疫因素等，但仍有近半数的病例无法找到明确原因。近年来，科学家们将目光投向了遗传因素，试图从基因层面揭开RSA的神秘面纱。

在众多候选基因中，亚甲基四氢叶酸还原酶（Methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR）和维生素D受体（Vitamin D receptor, VDR）基因引起了研究人员的特别关注。MTHFR基因负责催化5,10-亚甲基四氢叶酸转化为5-甲基四氢叶酸，这是同型半胱氨酸（homocysteine）再甲基化为甲硫氨酸的关键步骤。当MTHFR基因的第677位点发生C到T的变异（rs1801133）时，会导致酶活性降低，引起高同型半胱氨酸血症，增加血栓形成风险，从而可能影响胎盘血流灌注，导致流产。另一方面，VDR基因编码的维生素D受体在胎盘中高度表达，参与调控与胚胎植入、骨骼形成和胎儿成熟相关的多个基因。VDR基因的C>T变异（rs2228570）会产生转录活性较低的受体蛋白，可能影响维生素D的免疫调节功能，破坏母胎界面的免疫平衡。

为了探究这两个基因变异与RSA的关联，由Animesh Chowdhury、Anushka Ray等人组成的研究团队在《Egyptian Journal of Medical Human Genetics》上发表了他们的最新研究成果。他们以印度孟加拉人群为研究对象，开展了一项严谨的病例对照研究。

研究人员采用了聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）这一经典可靠的基因分型技术。他们从110名参与者（55名RSA患者和55名健康对照）的外周血中提取基因组DNA，针对MTHFR C677T和VDR C>T位点设计特异性引物进行PCR扩增，然后使用HinfI和FokI限制性内切酶对扩增产物进行消化，通过琼脂糖凝胶电泳分析酶切图谱，从而确定每个样本的基因型。为保证结果的准确性，他们还随机选择了20%的样本进行重复检测验证。

MTHFR C677T(rs1801133)和VDR C>T(rs2228570)基因变异

研究结果显示，在MTHFR C677T变异方面，RSA患者组中T等位基因频率（18.2%）显著高于对照组（8.2%）。等位基因模型分析表明，T等位基因携带者发生RSA的风险是C等位基因携带者的2.494倍（95%置信区间1.08-5.756）。基因型分析也呈现类似趋势，虽然在不同遗传模型（共显性、显性、隐性）下未达到统计学显著性，但均显示出T等位基因与RSA风险增加的相关性。相反，对于VDR C>T变异，两组间的等位基因和基因型频率分布均无显著差异，表明该变异与RSA风险无关。

Hardy-Weinberg平衡检验

研究人员还进行了Hardy-Weinberg平衡检验，结果显示MTHFR C677T和VDR C>T变异在病例组和对照组中的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡，表明样本群体具有代表性，不存在明显的群体分层或选择偏倚。

研究的讨论部分深入阐释了这些发现的意义。MTHFR T等位基因与RSA风险的关联可能源于其导致的高同型半胱氨酸血症。同型半胱氨酸水平升高会引起内皮功能障碍、氧化应激和血液高凝状态，这些因素共同作用可能损害胎盘功能，影响胎儿发育。这一发现与之前在北美印度人群、埃及人和奥地利人中的研究结果一致，支持了MTHFR C677T变异在RSA中的重要作用。

而VDR C>T变异缺乏显著关联的结果，与波兰人群的研究相似，但与伊朗、斯洛文尼亚、克罗地亚、苏丹、中国和奥地利的研究存在差异。这种不一致可能源于种族差异、环境因素（如紫外线暴露和饮食习惯）或样本量限制。值得注意的是，维生素D水平与叶酸代谢之间存在复杂的相互作用：紫外线在促进皮肤合成维生素D的同时，也会降解叶酸。对于同时存在MTHFR变异和维生素D缺乏的个体，这种代谢压力可能进一步增加RSA风险。

该研究也存在一些局限性，如样本量相对较小、缺乏患者用药史和血栓形成倾向数据等。未来的研究需要扩大样本规模，纳入维生素D水平、同型半胱氨酸浓度等生化指标，并考虑基因-环境交互作用，以更全面地揭示RSA的遗传机制。

综上所述，这项研究证实了MTHFR C677T基因变异的T等位基因是印度孟加拉人群RSA的遗传风险因素，为该人群的遗传咨询和个体化干预提供了重要依据。虽然VDR C>T变异未显示显著关联，但维生素D在母胎免疫调节中的作用不容忽视。这些发现不仅增进了我们对RSA遗传基础的理解，也为开发针对性的预防和治疗策略指明了方向。