白色念珠菌（Candida albicans）在口腔癌发生中的作用：从基因毒性、体细胞突变到炎症免疫微环境的协同促进机制

本研究深入探讨白色念珠菌（C. albicans）在口腔癌发生中的作用机制。通过动物模型与临床样本（CHC）结合转录组测序（RNAseq）和全外显子测序（WES），发现C. albicans虽不直接诱发癌变，但可上调增殖相关基因（如Mki67、Ccna2），诱导DNA双链断裂（标记物γH2A.X），并协同吸烟（通过4NQO模拟）促进恶性转化。其机制涉及炎症通路、免疫应答（如IFN-γ/STAT1信号）及体细胞突变（SBS5特征）。本研究为真菌-环境互作致口腔癌提供了分子证据。

　　

白色念珠菌长期刺激诱导有利于致癌的口腔上皮异常状态

研究通过长期（8-10个月）刺激小鼠口腔黏膜发现，白色念珠菌（C. albicans）虽未直接诱发口腔癌或慢性增生性念珠菌病（CHC），但显著提高了口腔上皮细胞增殖标志物Ki-67的表达。转录组测序（RNAseq）结果显示，C. albicans刺激上调了与细胞增殖和癌症发展相关的基因（如Mki67、Kif11、Ccna2、Ckap2、Fos、Ccnb1等）。基因本体（GO）富集分析进一步表明，核分裂和染色体分离通路被激活，而表皮细胞分化、细胞外基质组织及免疫应答通路则被抑制，提示上皮增殖与分化失调。

全外显子测序（WES）在小鼠口腔上皮中鉴定出与COSMIC数据库重叠的体细胞单核苷酸变异（SNV），表明C. albicans可能具有基因毒性。体外实验证实，C. albicans刺激人口腔上皮细胞（Leuk-1）后，DNA双链断裂标志物γH2A.X表达上调，小鼠口腔黏膜中也观察到相同现象。这些结果说明，C. albicans可启动与癌症相关的遗传改变，但在无其他风险因素时，其单独诱导癌变的能力有限。

CHC患者呈现与癌症相关的体细胞突变

研究纳入8例CHC患者（平均年龄66岁，50%为女性），对其病变组织进行WES分析。共发现65个驱动基因，其中PCM1、SYNE1、TICAM1、KMT2B、SRRM2和CASP8在两名患者中共同出现。显著突变基因（SMG）分析检出ZFHX4、MUC5B、DDX11等8个基因。KEGG富集分析显示，这些基因涉及p53信号通路和癌症相关通路。

突变谱分析显示，CHC组织中的体细胞SNV以C>T/T>A转换为主。进一步识别出三种突变特征，均与COSMIC签名SBS5高度相似（余弦相似度分别为0.81、0.85和0.84）。SBS5已知与吸烟和衰老相关，且多数CHC患者有吸烟史，提示Candida感染与吸烟可能协同贡献于这种癌前病变的发生。

白色念珠菌在化学预刺激小鼠中促进致癌过程

为探究吸烟与C. albicans的协同效应，研究使用4NQO（一种模拟烟草诱变效应的化学物质）预处理小鼠12周，随后施加C. albicans野生型（WT）或ece1Δ/Δ型（缺乏Candidalysin编码区）刺激。两种菌株均显著增加了舌部肿瘤的发生率和数量。

对外观正常黏膜组织的转录组分析发现，野生型和ece1Δ/Δ型C. albicans刺激均上调了免疫细胞膜分子相关基因（如H2-Q4、H2-Q5、Cd6、Cd53）和IFN信号通路基因（如Stat1、Cxcl10、Igtp）。蛋白互作（PPI）网络分析显示STAT1处于核心位置。RT-qPCR证实Ifng mRNA表达升高。KEGG分析表明，C. albicans激活了EB病毒感染、移植物抗宿主病、抗原加工提呈等炎症与免疫应答通路。值得注意的是，ece1Δ/Δ菌株刺激还特异性上调了病毒致癌通路，涉及Irf7、Cdk6等基因。

为验证STAT1的作用，研究在4NQO预处理小鼠中施用STAT1抑制剂Fludarabine。结果显示，抑制剂降低了C. albicans刺激组的肿瘤发生，但促进了无真菌刺激组的肿瘤形成，表明STAT1在C. albicans促进肿瘤中的作用具有上下文依赖性。

讨论与机制整合

本研究系统阐述了C. albicans在口腔癌发生中的“促进而非直接诱导”角色。其机制涉及多个层面：遗传层面，C. albicans展示基因毒性，诱导DNA损伤和体细胞突变（如SBS5特征）；分子层面，它上调增殖相关基因，破坏上皮分化与免疫稳态；微环境层面，通过激活IFN-γ/STAT1通路和MHC class I相关免疫应答，协同吸烟（4NQO）等致癌因素加速恶性转化。尽管Candidalysin（ECE1基因编码）已知可诱导DNA双链断裂，本研究未发现其缺失株（ece1Δ/Δ）与野生型在促瘤效应上存在显著差异，可能与4NQO的强基因毒性掩盖有关。

结论与展望

综上所述，白色念珠菌本身虽不直接引发口腔癌，但通过诱导基因毒性、扰乱增殖-分化平衡、激活炎症-免疫网络，显著增加口腔黏膜对吸烟等致癌因素的敏感性。未来研究应深入探索IFN-γ/STAT1/炎症通路与IFN-γ/MHC I/免疫抑制通路在真菌相关癌变中的交互作用，为临床防治Candida相关癌前病变提供新靶点。