CDCA5沉默通过激活自噬增强BRCA1突变卵巢癌对奥拉帕尼敏感性的机制研究

《Hormones & Cancer》：CDCA5 knockdown potentiates olaparib sensitivity in BRCA1-mutated ovarian cancer through autophagy activation

本研究针对BRCA1突变卵巢癌对PARP抑制剂奥拉帕尼的获得性耐药难题，通过体内外实验证实CDCA5沉默可协同奥拉帕尼抑制肿瘤增殖。机制上，联合治疗通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路激活自噬并加剧DNA损伤，为克服PARP抑制剂耐药提供了新策略。

　　

卵巢癌作为女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，因其早期诊断困难、易转移复发等特点，晚期患者五年生存率仅为10%-40%。BRCA1/2基因突变导致的同源重组修复缺陷使PARP抑制剂奥拉帕尼等靶向药物成为重要治疗手段，但获得性耐药问题严重制约其临床疗效。研究表明，耐药机制包括BRCA回复突变、替代DNA修复通路激活、PI3K/AKT/mTOR通路异常活化等。因此，探索新型联合治疗策略以增强PARP抑制剂敏感性成为当前研究热点。

细胞分裂周期相关蛋白5（CDCA5）作为调控姐妹染色单体黏连的关键因子，在多种肿瘤中呈现高表达并与不良预后相关。然而，CDCA5在BRCA1突变卵巢癌中的作用机制及其与PARP抑制剂的协同效应尚未明确。Wu等人在《Discover Oncology》发表的研究首次揭示CDCA5沉默可通过PI3K/AKT/mTOR通路调控自噬与DNA损伤，显著增强奥拉帕尼对BRCA1突变卵巢癌的抗肿瘤效果。

研究人员采用BRCA1突变卵巢癌细胞系（UWB1.289和SNU251）及裸鼠异种移植模型，通过小干扰RNA（siRNA）敲低CDCA5表达，联合奥拉帕尼处理，系统评估了细胞增殖、自噬活性、DNA损伤及关键信号通路变化。主要技术包括：CCK-8法检测细胞活力，免疫荧光和透射电镜观察自噬标志物LC3与γ-H2AX焦点形成及超微结构，蛋白质印迹分析自噬相关蛋白（ATG5、Beclin1、p62/SQSTM1）及PI3K/AKT/mTOR通路磷酸化水平，动物实验验证体内抗肿瘤效果。

CDCA5在卵巢癌中高表达

蛋白质印迹与数据库分析显示，CDCA5在BRCA1突变卵巢癌细胞系及临床组织中的表达显著高于正常对照，提示其可能参与疾病发生发展。

CDCA5沉默抑制增殖并诱导自噬与DNA损伤

敲低CDCA5可显著降低细胞活力，增加LC3阳性斑点及自噬小体数量，上调ATG5、Beclin1表达并降低p62/SQSTM1，同时增强γ-H2AX焦点形成，表明CDCA5缺失通过激活自噬通路加剧DNA损伤。

CDCA5沉默与奥拉帕尼的协同效应

联合处理较单药进一步抑制细胞增殖，促进自噬小体形成与DNA损伤标志物积累，证实CDCA5沉默可增强卵巢癌细胞对奥拉帕尼的敏感性。

联合治疗抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路

蛋白质印迹显示联合处理显著降低p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及p-mTOR/mTOR比值，提示协同抗肿瘤作用与该通路抑制密切相关。

PI3K/AKT/mTOR通路抑制是协同效应的关键

使用MHY1485（mTOR激活剂）与740 Y-P（PI3K/AKT激活剂）可逆转联合治疗引起的自噬激活、DNA损伤及增殖抑制，证实该通路在介导协同效应中的核心地位。

体内实验验证协同抗肿瘤作用

异种移植模型显示联合治疗使肿瘤体积减少50%，且该效应可被740 Y-P部分逆转。组织学分析表明联合组Ki67阳性细胞减少、凋亡增加，蛋白质印迹进一步证实自噬与DNA损伤相关蛋白表达变化与体外实验一致。

本研究首次阐明CDCA5通过调控PI3K/AKT/mTOR通路影响自噬与DNA损伤，从而增强BRCA1突变卵巢癌对奥拉帕尼的敏感性。这一发现不仅揭示了CDCA5作为卵巢癌治疗新靶点的潜力，更为克服PARP抑制剂耐药提供了创新性联合策略。尽管研究存在样本量有限、未使用PDX模型等局限性，但其机制阐释为后续临床转化奠定了重要理论基础。未来需进一步探索CDCA5调控PI3K/AKT/mTOR通路的具体分子机制，并开展更大规模的临床前研究以验证联合疗法的安全性与有效性。