肾脏TRPM3通道通过管球反馈和血浆容量调控血压的新机制

本研究揭示了肾脏TRPM3离子通道在血压调控中的关键作用，通过介导管球反馈（TGF）机制影响钠离子（Na+）重吸收和血浆容量。TRPM3基因敲除（KO）小鼠表现为低血压（≈5%降低）且对血管紧张素II（AngII）诱导的高血压具有抵抗性，其机制涉及尿钠排泄增加（35%-50%）和血浆容量降低（20%）。该发现为高血压治疗提供了新的靶点（TRPM3），尤其适用于对现有抗高血压疗法耐药的患者。

　　

Abstract

TRPM3（Transient Receptor Potential Melastatin 3）是一种由热、渗透压和神经甾体激活的非选择性阳离子通道。它高度表达于感觉神经元中，整合热、化学和炎症信号以调节下游反应，同时也存在于大脑、肾脏和心血管系统。这种分布暗示了其在心血管和肾脏调节中的作用。我们假设TRPM3通道可能通过血管和肾脏机制在血压（BP）调节中发挥作用。因此，分析Trpm3-KO小鼠的血管表型可以深入了解该通道在高血压发展中的潜在贡献。

METHODS

在基础条件下以及口服氯沙坦治疗或通过渗透性微泵输注血管紧张素II后，对清醒的野生型（WT）和Trpm3-KO小鼠进行无创血压监测。使用免疫荧光显微镜和带有特定细胞标记的RNAscope检查血管和肾脏结构中的TRPM3表达。使用离体肾脏灌注和压力肌动描记法评估血管反应。

RESULTS

Trpm3-KO小鼠表现出约5%的血压降低和对血管紧张素II诱导的高血压的抵抗性。尿钠浓度（[Na??]）高出35%至50%，血浆容量低20%，表明低血压源于肾脏。TRPM3定位于参与血浆容量调节的肾小球旁器（JGA）和远端肾单位节段。Trpm3-KO小鼠表现出受损的管球反馈（TGF），减少了入球小动脉收缩和NaCl重吸收。

CONCLUSIONS

TRPM3通道通过调节肾功能来促进血压调节。Trpm3-KO小鼠中钝化的管球反馈破坏了NaCl重吸收，导致低血容量和较低的血压。因此，肾脏TRPM3通道可能作为血压调节的有希望的靶点。

NOVELTY AND RELEVANCE

What Is New?

这项研究确定了肾脏TRPM3通道是血压的关键调节器。

TRPM3的缺失会损害管球反馈，导致尿钠增多、血浆容量减少和低血压。

TRPM3敲除小鼠表现为低血压，并免受血管紧张素II诱导的高血压的影响。

What Is Relevant?

这些发现将TRPM3通道功能与通过肾脏特异性机制控制血压联系起来。

该研究提供了证据，表明由TRPM3缺陷引起的钠处理改变可以预防高血压。

Clinical/Pathophysiological Implications?

靶向肾脏TRPM3通道可能通过增强钠排泄为管理高血压提供新方法。

理解TRPM3的作用可能有助于开发针对对当前抗高血压疗法耐药患者的新治疗方法。

血管和肾脏信号通路之间的相互作用是血压（BP）稳态的核心。然而，尽管高血压研究取得了显著进展，但血压变异的精确分子决定因素仍未完全确定。在分子候选者中，瞬时受体电位（TRP）通道已成为血管生理学的关键调节器，响应多种刺激影响血管张力、内皮功能和细胞钙动力学。在该家族中，TRPM3因其在与心血管调节相关的组织（包括感觉神经元、血管和肾脏）中的选择性表达而脱颖而出。尽管其生理功能在感觉系统中得到最好表征，但TRPM3的分布表明它可能是控制血压调节和高血压发展的网络中一个有希望但尚未被充分探索的组成部分。

TRPM3是一种Ca²⁺可渗透的非选择性阳离子通道，属于瞬时受体电位通道的melastatin亚家族。它高度表达于伤害性神经元中，在那里其被伤害性热或神经甾体硫酸孕烯醇酮（PS）激活会引发疼痛，并且在胰腺β细胞中，其被PS激活会增强葡萄糖诱导的胰岛素释放。TRPM3缺陷（Trpm3-KO）小鼠对伤害性热刺激的反应表现出特定缺陷，但显示正常的血糖水平，表明葡萄糖稳态未受到严重影响。

除了热和PS之外，TRPM3通道还被其他物理（如低渗机械拉伸）和化学刺激内源性激活。TRPM3通道可以被细胞内ATP激活，并受磷脂酰肌醇磷酸调节。胞质ATP对TRPM3的刺激作用反映了磷脂酰肌醇激酶的激活，导致质膜中磷脂酰肌醇磷酸的再合成。磷脂酰肌醇磷酸水平的变化，例如由受体介导的信号传导触发的那些变化，可以强烈影响TRPM3通道活性。

TRPM3通道在血管系统中似乎具有不同的功能，因为其激活导致小鼠主动脉收缩，但肠系膜动脉舒张。这是由于这些组织中不同的细胞表达模式，即TRPM3是主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）中的Ca²⁺进入途径，但在肠系膜动脉中，它表达于血管周围神经末梢，在TRPM3激活时释放降钙素基因相关肽（CGRP），导致VSMCs中K⁺通道开放和松弛。这些在传导动脉和阻力动脉中的相反效应引发了关于TRPM3在系统水平血管功能中的作用的问题。回答这个问题不仅对于完全理解该通道在血管系统中的病理生理作用及其可能作为治疗BP疾病的靶点至关重要，而且对于评估在治疗与功能获得性TRPM3突变相关的其他病理时抑制TRPM3可能带来的副作用也很重要。我们通过研究Trpm3-KO小鼠的心血管表型来解决这个问题。

我们观察到Trpm3-KO小鼠是低血压的，并且它们的BP值不受通过渗透性微泵输注AngII（血管紧张素II）的影响。此外，Trpm3-KO小鼠表现出尿中[Na⁺]增加，表明其BP水平降低源于肾脏。我们假设肾脏中的TRPM3通道通过其在关键肾单位结构中的表达和功能，在肾血流调节和钠处理中起关键作用。因此，我们探索了TRPM3通道在肾功能和肾血流调节中的表达、定位和功能贡献。TRPM3通道在多个肾脏结构中表达，包括肾小球旁器（JGA）内的致密斑细胞。TRPM3通道通过影响入球小动脉中的VSMC张力来调节管球反馈（TGF），从而有助于血容量调节。我们的数据表明，Trpm3-KO小鼠中受损的TGF减少了入球小动脉收缩并破坏了NaCl重吸收。这导致NaCl丢失、血容量减少并最终降低BP。我们提出，靶向肾脏TRPM3通道可能通过肾脏特异性效应成为BP调节的一种新方法。

TRPM3 Contribution to BP Regulation

TRPM3对BP调节的贡献难以预测，因为TRPM3激活后既有血管舒张作用也有血管收缩作用的报道。为了解决这个问题，我们测定了野生型（WT）和Trpm3-KO小鼠的BP值。雄性和雌性小鼠之间没有差异，但我们发现与WT相比，Trpm3-KO小鼠轻微但持续低血压，表明TRPM3通道在BP调节中起作用。

我们推测该通道可能通过涉及肾功能的长期机制促进BP调节。与这一假设一致，我们发现与WT相比，Trpm3-KO小鼠尿中[Na⁺]显著更高，表明这些动物的肾功能改变。未观察到性别依赖性差异，因为雄性和雌性Trpm3-KO动物的尿[Na⁺]均显著增加。Na??和其他电解质（包括Ca2??、K??和P）的血浆水平没有显著差异，但Trpm3-KO小鼠存在显著的低镁血症。此外，与WT相比，Trpm3-KO小鼠显示显著更低的循环血容量，但血细胞比容没有变化。这组数据使我们假设KO模型的低血压表型是由于肾功能异常。

为了进一步研究TRPM3表达与BP调节之间的关联，我们使用了AngII诱导的高血压模型。在WT和Trpm3-KO小鼠中，在使用植入的渗透性微泵用对照盐水（0.9% NaCl）或AngII治疗7天之前和之后进行BP测量。AngII输注在WT小鼠中诱导了明显的高血压表型（99±8 mm Hg versus 84±3 mm Hg），但非常令人惊讶的是，在Trpm3-KO小鼠中没有，其显示的值与盐水治疗的对照组中看到的相当（81.26±6 mm Hg versus 81.0±2.5 mm Hg）。这些结果表明TRPM3的缺失赋予了对AngII诱导的高血压发展的保护，进一步暗示了TRPM3在BP调节中的作用。

通过用血管紧张素II 1型受体（AT1R）阻断剂氯沙坦（估计剂量为40-60 mg/kg/天）治疗两种品系4周，探索了AngII对对照和Trpm3-KO小鼠BP贡献的潜在差异。每周测定BP变化。长期用氯沙坦治疗导致显著的BP降低，两组之间没有差异，排除了AT1R在Trpm3-KO小鼠中的不同贡献。

为了建立肾脏中TRPM3表达水平与BP之间可能的相关性，我们还在一个公认的高血压模型、正常血压（BPN，血压正常）和高血压（BPH，血压高）小鼠品系中测量了TRPM3 mRNA表达。有趣的是，与BPN小鼠相比，BPH小鼠肾脏中TRPM3的mRNA表达水平显著更高。此外，与Trpm3-KO小鼠一样，BPN小鼠对AngII的BP反应没有显著升高。这些结果表明，Trpm3-KO小鼠和具有低肾脏TRPM3通道表达的小鼠共享对AngII诱导的高血压的保护的共同表型，指向肾脏TRPM3在BP调节中的作用。

TRPM3 Contribution to Blood Flow Regulation in the Kidney

为了研究TRPM3通道对肾功能的贡献，我们接下来使用全肾脏灌注装置检查了肾血管反应性。肾动脉被插管，肾脏在恒定压力下灌注，因此流量的变化可以作为整个肾血管床阻力变化的代表。我们首先确定了去氧肾上腺素和AngII的肾血管收缩反应。将WT和Trpm3-KO肾脏获得的剂量反应曲线拟合到Hill方程并使用F检验比较模型显示没有统计学显著差异。值得注意的是，尽管Trpm3-KO小鼠在AngII治疗后没有发展出高血压，但它们对AngII诱导的收缩的血管反应未受影响。

接下来，我们评估了TRPM3激活对这些反应的影响，通过在存在1 μmol/L去氧肾上腺素或0.5 nmol/L AngII的情况下应用10 μmol/L PS。在两种情况下，PS均引起血管舒张，当使用AngII作为血管收缩剂时，血管舒张显著更大。值得注意的是，10 μmol/L PS在Trpm3-KO小鼠肾脏中缺乏效果表明，在该浓度下PS作为TRPM3激动剂的特异性在肾脏血管系统中成立，无论是用去氧肾上腺素还是AngII预收缩，正如先前对去氧肾上腺素预收缩的小鼠肠系膜动脉所描述的那样。在AngII存在下获得的更大PS反应表明，TRPM3通道对血流调节的贡献取决于肾脏中的信号传导背景。事实上，PS的效果与去氧肾上腺素或AngII预刺激引起的血管收缩量 weakly 相关，但AngII的相关斜率更大。类似地，我们观察到用氯沙坦慢性阻断AT1R会降低对急性AngII的最大反应，并且这种效应在Trpm3-KO小鼠中更为明显。这表明AT1R的慢性阻断在TRPM3通道缺失的情况下更大程度地削弱了该信号通路。

基于先前关于TRPM3在感觉神经元中表达的研究，我们假设由PS诱导的肾脏系统中的TRPM3依赖性血管舒张可能依赖于血管周围神经释放CGRP。为了研究这一点，我们进行了分离肾动脉中的表达研究，以及评估药理学剂对肾血流调节的功能实验。

在缺乏可靠的抗TRPM3抗体的情况下，我们利用Trpm3-KO小鼠已将β-半乳糖苷酶（β-gal）报告基因整合到Trpm3基因的阅读框中的事实。我们在Trpm3-KO小鼠的整个肾动脉中使用抗β-gal（14B7）小鼠单克隆抗体（检测大肠杆菌β-半乳糖苷酶融合蛋白）和抗CGRP抗体进行免疫标记，以使用共聚焦显微镜测试转基因产物和CGRP的共定位。β-gal与CGRP在血管周围神经中共定位，并且两种标记在VSMCs和内皮细胞中均缺失。与肠系膜动脉的情况一样，这些结果表明TRPM3在肾动脉中的表达仅限于外膜层的血管周围神经。

接下来，我们测试了10 μmol/L PS在存在CGRP受体拮抗剂BIBN4096（1 μmol/L）的情况下对肾血流的影响。在这种条件下，PS诱导的去氧肾上腺素收缩动脉的血管舒张被完全阻止，表明PS的TRPM3介导效应依赖于CGRP受体激活。在肾动脉的压力肌动描记法中获得了类似的结果。CGRP的血管舒张作用是通过刺激内皮细胞和VSMCs中的CGRP受体介导的。因此，PS的部分效应预计由CGRP诱导的内皮细胞NO释放介导。在存在NOS阻断剂L-NAME（100 μmol/L）的情况下，PS诱导的去氧肾上腺素预收缩肾动脉的血管舒张几乎完全消失，表明TRPM3诱导的血管舒张主要由内皮介导。与BIBN或L-NAME相反，10 μmol/L吲哚美辛对PS反应没有显著影响。

当用AngII作为预收缩刺激物测试BIBN4096时，观察到类似的结果。然而，结果与在存在100 μmol/L L-NAME或10 μmol/L吲哚美辛的情况下用去氧肾上腺素获得的结果不同。在一些实验中，在不存在阻断剂时观察到的PS诱导的血管舒张意外地在与阻断剂一起应用时转变为血管收缩。我们得出结论，血管周围神经中的TRPM3激活通过CGRP和NO依赖性途径促进肾动脉血管舒张。然而，当这些途径被抑制时，TRPM3激活可以增强AngII诱导的血管收缩，表明TRPM3通道也可能在肾脏内除血管周围神经之外的其他部位表达并具有功能重要性。

TRPM3 Location in Kidney

尝试在肾实质中用β-gal进行TRPM3标记，但由于高自发荧光损害了信噪比而未产生清晰结果。事实上，肾脏中的强荧光背景代表了免疫荧光测定中一个公认的困难。重组β-gal的DAB染色仅在Trpm3-KO肾脏中检测到，但灵敏度有限。

为了克服这些限制，我们使用RNAscope来绘制小鼠肾脏中的TRPM3表达。RNAscope是一种先进的原位杂交技术，允许以低背景可视化单个RNA转录本。它结合了高特异性（由于探针设计）、高灵敏度（由于信号放大）和空间分辨率（保留组织架构），使其成为在复杂组织中定位低丰度基因（如肾脏中的TRPM3表达）的理想选择。

RNAscope的阳性和阴性对照结果如图所示。Trpm3-KO小鼠组织不能用作阴性对照，因为全局KO表达截短的蛋白质，因此TRPM3 mRNA表达也可以用RNAscope检测到。使用TRPM3探针，我们仅在WT小鼠的某些肾脏结构中检测到阳性信号（图中的红点），这些结构可通过其形态特征识别并通过与已建立的细胞标记共染色确认。我们观察到在远曲小管（DCT，也用钠-氯协同转运蛋白染色）、集合管（CD，与水通道蛋白-2共定位）的闰细胞（但不是主细胞）和足蛋白阳性的肾小球细胞中有清晰的标记。相反，TRPM3 mRNA表达在近曲小管细胞（与SGLT2 [钠-葡萄糖协同转运蛋白-2抗体]无重叠）或亨利袢升支粗段中缺失，其中Na/K/Cl协同转运蛋白阳性细胞缺乏TRPM3信号。然而，Na/K/Cl协同转运蛋白也表达于致密斑细胞的顶膜，其活性代表了致密斑细胞检测肾小管盐浓度并激活TGF的主要机制。在致密斑细胞中观察到TRPM3 mRNA染色，与Na/K/Cl协同转运蛋白共定位，但在JGA的其他细胞类型中缺失，因为它不与颗粒细胞的肾素标记共定位。最后，我们没有检测到TRPM3 mRNA与抗SM22或抗酪氨酸羟化酶的共定位，分别排除了TRPM3在VSMCs和交感神经末梢中的表达。总之，TRPM3在肾脏中的表达显示优先分布在监测肾小管液成分（致密斑）以及随后微调钠和水重吸收（DCT和CD）发生的区域。致密斑细胞是JGA的一部分，JGA发挥双重调节作用：（1）通过TGF机制控制入球小动脉平滑肌细胞的张力；（2）调节肾素分泌。我们发现TRPM3 mRNA与颗粒细胞中的肾素没有共定位，并且WT和Trpm3-KO小鼠之间的血浆肾素活性没有变化（WT中75±11 versus Trpm3 KO中70±17 ng/mL）。因此，我们假设TRPM3通道可能通过调节TGF机制来促进肾功能。

TRPM3 Contribution to Tubuloglomerular Feedback

TGF机制在单个肾单位水平起作用，在那里它调整入球小动脉阻力和肾小球滤过率（GFR）以响应早期DCT中NaCl浓度的变化。这将输送到远端肾单位的流体维持在一个特定范围内，并建立致密斑NaCl浓度与GFR或毛细血管压力之间的负相关关系。

为了研究该机制在Trpm3-KO小鼠中是否改变，我们检查了肾血流对达格列净（一种SGLT2抑制剂）的反应。SGLT2抑制减少近曲小管中的Na⁺和葡萄糖重吸收，增加输送到DCT的Na⁺。致密斑细胞应检测到Na⁺的增加并触发入球小动脉血管收缩。正如预期的那样，图6A显示20 μmol/L达格列净减少了WT小鼠的肾血流，并且这种效应在Trpm3-KO小鼠中显著更小。此外，当我们向WT动物施用TRPM3通道阻断剂扑米酮（10 mmol/L）时，达格列净诱导的收缩显著减少，强烈表明TRPM3通道在负责TGF的血管收缩反应中起作用。为了进一步验证体内TGF损伤，我们使用FITC-菊粉清除率测量GFR，通过眶后推注注射，在基础条件下和达格列净治疗72至96小时后。基线GFR在WT和Trpm3-KO小鼠之间没有差异。然而，达格列净在WT小鼠中诱导了初始的GFR下降，归因于肾脏的血液动力学变化（并且具体地，如先前所述，增强的TGF）。值得注意的是，这种GFR减少在Trpm3-KO小鼠中显著减弱，确认了在缺乏TRPM3通道的情况下TGF反应受损。

DISCUSSION

BP调节涉及神经体液信号传导和调节系统血管阻力的机械因素之间的动态相互作用。虽然几种血管适应有助于高血压，但基于Guyton压力-尿钠排泄概念的领先模型强调了受损的肾脏Na⁺排泄作为慢性高血压的主要原因，无论其起源如何。这种损害导致容量扩张和系统血管阻力增加。因此，利尿剂和饮食钠限制在高血压中的基本疗效机制是有利地影响钠平衡和稳态。然而，其他抗高血压药物如RAAS（肾素-血管紧张素-醛固酮系统）抑制剂、血管扩张剂和β-阻断剂通过类似的机制工作，即通过促进压力-尿钠排泄。

Role of TRPM3 in Renal Control of BP

我们对Trpm3-KO小鼠血管表型的表征与肾脏TRPM3通道在BP控制中的主要作用一致。我们提出Trpm3-KO中的低血压表型与由于尿钠增多导致的血浆容量减少有关，指向肾脏TRPM3通道参与长期的肾脏BP控制。支持肾脏TRPM3通道与BP水平之间的联系，qPCR分析证明高血压BPH小鼠肾脏中的TRPM3 mRNA表达显著增加2倍，与正常血压BPN小鼠相比。尽管证据是间接的，我们发现TRPM3表达与品系内基础BP水平之间存在相关性。

值得注意的是，TRPM3不在发生大量Na??重吸收的近曲小管节段中表达。因此，其作用似乎涉及下游肾单位节段。已经表明，远端肾单位中尿Na⁺排泄的最终调整对于容量稳态很重要。在这方面，导致孟德尔形式的高血压或低血压的大多数人类突变影响肾单位远端部分的液体重吸收。最近的模型提出，导致受损Na⁺排泄的关键Na⁺转运蛋白的变化是血管、神经和炎症因素增加BP的最终共同途径。鉴于BP调节的复杂性，令人惊讶的是所有突变的基因产物都在肾单位的远端部分并在相同的生理途径中起作用。

TRPM3 Interaction With Angiotensin II and AT1R

有趣的是，Trpm3-KO和BPN小鼠都表现出对AngII依赖性高血压的显著保护，如先前对肾脏近曲小管选择性At1r KO所描述的那样。因此，尽管证据仍然是间接的，这些观察结果突出了TRPM3在调节肾脏RAAS反应和促进系统BP调节中的潜在作用。

尽管对于大多数高血压患者无法确定BP升高的精确分子起源，但RAAS药理学抑制持续降低BP，强调了其关键作用。RAAS的升压效应主要由作用于AT1Rs的AngII介导，AT1Rs在多种组织中表达，包括中枢神经系统、血管系统、心脏、肾上腺和肾脏。使用全局和肾脏特异性AT1R KO小鼠模型，已经表明在基础条件下，肾脏和肾外组织中的AT1Rs对BP稳态做出独特的贡献，这些贡献在幅度上几乎相等并且彼此独立。然而，在响应AngII诱导的高血压时，它们的相对贡献非常不同，因为仅肾脏中AT1R的缺失就足以保护免受Ang II依赖性高血压的影响，而在系统性KOs中肾脏中AT1R的存在足以重现高血压表型。

AngII主要通过作用于肾脏中与减少尿Na⁺排泄相关的AT1R引起高血压，独立于交感神经系统或醛固酮的作用。事实上，仅近曲小管-KO中AT1R信号传导的废除就足以降低BP，尽管血管反应完好。消除该途径减少近曲液体重吸收并改变关键Na⁺转运蛋白的表达，修改压力-尿钠排泄并提供对高血压的实质性保护。有趣的是，近曲小管-KO小鼠也表现出下游肾单位节段中转运蛋白表达和功能的变化，这可能与TRPM3通道作用所涉及的机制相关，因为它们不在近曲小管中表达。

Contribution of TRPM3 Channels to Tubuloglomerular Feedback

先前来自小鼠肾脏的单细胞RNAseq数据显示沿肾单位和肾血管系统的TRPM3基因表达，在CD中有更丰富的表达。与我们数据的差异可能源于TRPM3通道的低表达水平，这阻碍了精确定位并限制了在高通量数据集中的功能解释，在缺乏功能证据的情况下。TRPM3 mRNA在肾小球、致密斑细胞、DCT和CD的选择性定位表明这些通道在TGF和电解质重吸收微调中的作用。在这里，我们测试了致密斑细胞中TRPM3通道缺失会损害TGF的假设，但KO小鼠中可能存在与其它通道定位相关的其他肾功能变化。例如，血浆[Mg²⁺]的显著降低可能与DCT中TRPM3缺失有关，DCT是肾脏中镁重吸收的关键部位。这与临床发现一致，即DCT蛋白质如TRPM6或钠-氯协同转运蛋白的功能障碍导致镁浪费和低镁血症。在每个肾血管单位内，肾小管返回到其自身肾小球的附近。在该部位，特化的肾小管细胞（致密斑细胞）感知肾小管液成分的变化并将信息传递到肾小球小动脉以调节GFR和血流。TGF允许经过致密斑的肾小管液NaCl含量发生变化，导致单个肾单位GFR的相互变化。致密斑细胞是盐传感器，产生最终对入球小动脉（包括VSMCs和颗粒细胞）施加效应的因子。JGA执行两个主要调节功能：TGF（由高肾小管[NaCl]诱导的入球小动脉血管收缩，一种负反馈）和由低肾小管[NaCl]诱导的肾素释放（一种正反馈机制）。这些不同的机制允许独立微调BP。Trpm3-KO小鼠显示未改变的肾素分泌并且在肾素产生细胞中没有TRPM3表达，但表现出受损的TGF和减少的血容量，这是其低血压的可能机制。用达格列净阻断SGLT2揭示了这种缺陷，显示与WT肾脏相比，Trpm3-KO肾脏中的血管收缩反应减弱。此外，在存在TRPM3阻断剂扑米酮的情况下，WT肾脏中达格列净诱导的血管收缩显著减少，并且达格列净诱导的体内GFR下降在Trpm3-KO小鼠中减弱，确认了TRPM3通道对该效应的贡献。

关于所涉及的机制，TRPM3通道是渗透压响应的，并且可以被肾液中NaCl增加相关的高渗透压激活，有助于致密斑细胞中的去极化和[Ca²⁺]_i增加，这是诱导TGF所必需和足够的，触发信号分子的释放，作用于相邻的系膜和小动脉VSMCs。尽管由于JGA的复杂结构，这些介体的确切分子身份仍未完全理解，但一个关键步骤是致密斑细胞中ATP的调节释放，它可能直接激活相邻细胞上的P2嘌呤受体或被酶促转化为腺苷，两者都在调节TGF中起关键作用。需要进一步研究以阐明腺苷和P2受体在Trpm3-KO小鼠中观察到的受损TGF中的作用。

TRPM3在小肾内血管中缺乏表达似乎排除了直接血管张力调节作为BP调节的机制。此外，与肠系膜动脉的情况一样，TRPM3在大型肾动脉中的表达似乎仅限于血管周围CGRP表达的感觉神经末梢，在那里其激活诱导血管舒张，尽管这些神经与VSMCs和内皮细胞之间通过旁分泌信号传导的相互作用是复杂的，值得进一步研究。我们显示PS（10 μmol/L）在去氧肾上腺素或AngII存在下诱导血管舒张。这种血管舒张效应被BIBN4096（一种CGRP拮抗剂）或L-NAME（一种NOS阻断剂）完全废除。这些发现表明TRPM3通过CGRP和NO依赖性途径促进肾血流调节，而其肾单位特异性表达暗示其在TGF机制中的作用，可能