MRGPRX1通过调控CREB/p38/p44/42信号通路抑制人表皮黑素细胞黑色素生成的作用及氯喹的激动机制研究

本研究首次揭示孤儿受体MRGPRX1在人表皮黑素细胞中的表达及其通过调控CREB磷酸化、p38/p44/42 MAPK信号通路和钙离子内流抑制黑色素生成的作用机制。研究发现抗疟药氯喹可作为MRGPRX1激动剂，通过激活TRPA1/TRPV1-Ca2+信号轴抑制黑素生成，为色素性疾病（如白癜风样色素减退）提供了新的治疗靶点。

　　

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MRGPRX1在人类皮肤细胞中的表达

既往研究认为MRGPRX家族蛋白是神经元特异性受体，但最新研究表明其在膀胱、肺、脂肪组织和睾丸等多种器官中均有表达（Al Hamwi et al., 2022）。由于其在人表皮细胞中的表达尚未报道，我们通过RT-PCR技术在人类原代表皮黑素细胞（HEM）和角质形成细胞中均检测到MRGPRX1的表达。

氯喹可能是MRGPRX1的配体

氯喹可通过MRGPRX相关信号通路引起人类皮肤瘙痒（Meixiong and Dong, 2017）。我们使用AutoDock虚拟筛选软件分析了MRGPRX1与氯喹的相互作用。以黑素皮质素1受体（MC1R）及其激动剂毛喉素（FK）作为阳性对照，结果显示氯喹与MRGPRX1的结合能（-7.2 kcal/mol）显著优于FK与MC1R的结合（-6.0 kcal/mol），提示氯喹与MRGPRX1具有高亲和力。

氯喹通过TRPA1介导的钙信号通路抑制CREB/MAPK信号和自噬流

我们前期发现氯喹处理可降低HEM细胞中CREB磷酸化水平。为验证此现象，我们在瞬时转染MRGPRX1质粒的HEK293T细胞中进行CRE荧光素酶报告基因检测，结果显示氯喹处理显著降低CRE报告基因活性。腺苷酸环化酶抑制剂MDL12330A作为阳性对照同样抑制CRE活性（图4a），证实氯喹通过调控cAMP-CREB信号通路抑制黑素生成。