反式玉米素核苷（tZR）和生长素调控甜叶菊离体再生与不定根发生的机制及应用研究

本研究通过优化反式玉米素核苷（tZR）和生长素（Auxins）调控体系，建立了甜叶菊（Stevia rebaudiana）高效离体再生与不定根诱导技术。tZR（5 mg/L）水平培养显著促进不定芽增殖（10.5芽/外植体），低浓度GA3（0.5 mg/L）增强芽伸长；半强度MS培养基结合NAA（1.0 mg/L）或IBA（1.0 mg/L）分别实现最长根长与最高生根数，为甜叶菊商业化繁殖和生物技术应用提供关键技术支撑。

　　

Effects of tZR on adventitious shoot induction

反式玉米素核苷（tZR）对不定芽诱导的影响

培养四周后，使用添加tZR（浓度范围0.5–5.0 mg/L）的诱导培养基实现了离体芽诱导。tZR浓度显著影响芽诱导响应（表1）。总体而言，培养一周（7天）后首次观察到芽启动。第二周时大多数处理中均出现芽体，数据于三周后记录（表1）。芽诱导频率随tZR浓度增加而提升，最高浓度（5.0 mg/L）时达到峰值。水平方向培养的外植体表现出更高效的芽增殖，平均每个外植体产生10.5个芽，而垂直方向仅为6.2个（表1）。此外，tZR浓度超过2.5 mg/L时，芽形态出现异常（如玻璃化），但所有浓度下均未观察到愈伤组织形成。

Discussion

讨论

甜叶菊的离体培养通过添加不同浓度tZR的MS培养基，成功从顶芽和腋芽建立。MS基础培养基最初为烟草再生开发，提供全面的宏量和微量营养素平衡（Murashige和Skoog, 1962）。虽然其对植物生长普遍有效，但其营养浓度（尤其是氮）常超出特定物种和外植类型的需求。本研究中，降低MS强度（半强度）显著改善生根响应，表明标准全强度MS可能对甜叶菊生根过程存在抑制。tZR作为细胞分裂素，通过激活细胞分裂和分化途径直接促进芽器官发生，这与先前在茄子、番茄等作物中的研究一致（Muktadir et al., 2016）。

Conclusion

结论

本研究建立了利用tZR介导的芽诱导和离体扦插培养高效快速繁殖甜叶菊的技术体系。低浓度GA₃添加还可增强芽伸长。虽然不定根可在无激素培养基上形成，但半强度MS培养基添加NAA显著增强根诱导和发育。我们的研究证明NAA在产生健康、伸长根系及提高移植存活率方面的有效性，为甜叶菊商业化繁殖和未来生物技术应用提供了可靠方案。