对氯地西泮（chlordiazepoxide）和溴化克里丁尼（clidinium bromide）进行生态意识评估，并采用高效液相色谱（HPLC）技术对其在大批量及片剂固体剂型中的含量进行同时检测

《Results in Chemistry》：Ecologically conscious profiles assessments for economic, and concurrent HPLC detection of chlordiazepoxide and clidinium bromide in bulk and tablets solid dosage form

氯硝西泮与克立米达嗪的环保高效液相色谱法开发及环境友好性评价，采用钾氢二磷酸缓冲液-乙醇混合溶剂（60:40, v/v），210 nm检测波长，10 μL进样量，分析时间<12分钟，氯硝西泮检测范围20-140 μg/mL，克立米达嗪10-70 μg/mL。通过AES（85）、AGREEprep（0.75）、MoGAPI（78）、BAGI（80）及白度评分（95.4）验证其生态效益，显著优于传统含毒性溶剂的方法。

　　这项研究的主要目标是开发并验证一种环保且稳定性良好的方法，用于测定片剂和原料药中氯地西泮（CHL）和氯仿碱（CLI）的含量。该方法利用了绿色流动相，即0.025摩尔/升的磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.5）与乙醇的混合比例为60%:40%（体积比），流动相流速为1毫升/分钟。检测波长为210纳米，进样量为10微升，分析时间少于12分钟。CHL和CLI的浓度范围分别为20–140微克/毫升和10–70微克/毫升。通过分析生态指标，如分析生态尺度（AES）得分为85，样本制备的绿色度（AGREEprep）为0.75，改进的绿色分析程序指数（MoGAPI）为78，蓝适用性等级指数（BAGI）得分为80，以及白度为95.4，表明该方法在环境友好性、成本效益和创新性方面优于已发表的方法。

氯地西泮是一种多功能药物，能够有效缓解压力和焦虑，常用于临床治疗由担忧、压力或紧张引起的症状。其化学结构为7-氯-N-甲基-5-苯基-3H-1,4-苯并二氮杂?-2-胺4-氧化物，几乎为白色或浅黄色晶体粉末，几乎不溶于水，微溶于乙醇。氯仿碱则是一种具有强抗痉挛和抗分泌作用的药物，主要用于治疗胃肠道疾病，如胃溃疡、肠易激综合征等。它在药理作用上对胃肠道的平滑肌有显著影响，能够阻止乙酰胆碱在副交感神经末梢作用部位的肌碱效应。

目前，已有多种方法用于测定这两种药物，包括高效液相色谱（HPLC）、分光光度法、电位滴定法和伏安法。然而，这些方法通常需要使用高危险性化学品，如乙腈和甲醇，且在样品制备过程中需要复杂的预浓缩或提取步骤。相比之下，本文提出的方法在样品制备过程中采用了更简单的方式，无需预浓缩或提取，从而降低了对环境的负担，并提高了经济性和生态友好性。

在方法开发过程中，研究者们通过调整多种参数，如检测波长、流动相比例、柱子选择和流速，优化了分离效果。经过测试，210纳米的检测波长能够有效分离CHL和CLI，且在室温下进行分离可以进一步减少能源消耗。此外，使用15厘米长、4.6毫米直径、5微米颗粒的Hypersil C18柱子能够实现良好的分离效果，具有高分辨率和低拖尾因子。流动相的优化是该方法的关键步骤，通过将磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.5）与乙醇按60%:40%的比例混合，能够有效提高分离效果并减少有害物质的使用。

为了验证该方法的稳定性，研究者进行了多种强制降解实验，包括酸性条件（HCl）、碱性条件（NaOH）、氧化条件（H?O?）、光照条件（254纳米的紫外光）和加热条件（40摄氏度）。实验结果表明，该方法能够有效区分降解产物与原药成分，并且在所有条件下均表现出良好的分离能力。此外，该方法在不同条件下的重复性和再现性均符合ICH Q2R2标准，显示了其高度的可靠性和稳定性。

在生态评估方面，该方法使用了一系列绿色化学指标，包括AES、AGREEprep、MoGAPI和BAGI。这些指标分别从不同的角度评估了方法的环境影响，例如AES评估了方法对环境的总体影响，AGREEprep则关注了样品制备过程中的绿色度，MoGAPI衡量了方法在分析过程中的生态友好性，而BAGI则评估了方法在实际应用中的可行性。这些指标的结果表明，该方法在生态友好性方面表现出色，具有较低的环境负担和较高的可持续性。

此外，该方法的白度评分为95.4，表明其在绿色分析方面具有显著优势。相比之下，传统方法的白度评分较低，仅为89.6，说明本文提出的方法在绿色度和实用性方面优于现有方法。同时，该方法的分析时间较短，能够提高实验效率，减少资源浪费，进一步符合绿色化学的原则。

尽管该方法在多个方面表现出色，但仍存在一些局限性。例如，分析时间仍较长，可以进一步优化，通过调整柱子的尺寸、直径和颗粒大小，以及改变流速，来缩短分析时间。此外，该方法目前仅适用于原料药和片剂，尚未在复杂的生物基质（如血清或血浆）中进行验证，因此在未来的药代动力学和生物等效性研究中，可能需要进一步的改进。另外，该方法仅使用紫外检测，未采用更先进的检测手段，如质谱或荧光检测，这可能限制了其在痕量分析中的应用。

研究团队由来自中国肇庆学院的几位研究人员组成，他们在方法的开发、验证和生态评估方面做出了重要贡献。此外，该研究得到了多项资金支持，包括肇庆大学的高层次项目培养计划、肇庆市科技创新引导项目以及广东省大学生科技创新培训计划。这些资金支持为研究的顺利进行提供了保障，并有助于推动绿色分析化学的发展。

综上所述，本文提出了一种高效、环保且经济的RP-LC方法，用于测定氯地西泮和氯仿碱的含量。该方法不仅在分离效率和分析精度上表现出色，而且在生态评估中也取得了优异的成绩，符合当前绿色化学的发展趋势。未来的研究可以进一步优化该方法，以提高其在复杂生物基质中的适用性，并探索更先进的检测手段，以拓展其应用范围。