靶向肌苷代谢增强肺腺癌EGFR靶向治疗：克服TKI耐药的新策略

本研究揭示EGFR-TKI耐药肺腺癌中肌苷（inosine）代谢重编程的关键作用，通过激活A2AR（A2A receptor）-cAMP-PKA-CREB通路促进氧化磷酸化（OXPHOS）和免疫逃逸。靶向PNP（purine nucleoside phosphorylase）或使用A2aR抑制剂（如taminadenant）可显著逆转耐药性，为联合治疗提供新策略。

　　

Section snippets

Cell lines culture and reagents

人类EGFR突变肺癌细胞系（PC-9、H1975、HCC827）、单核细胞白血病细胞THP-1和胚胎肾细胞HEK293T由中国上海国家细胞库提供。细胞使用DMEM培养基培养，添加10%胎牛血清（FBS）及双抗（青霉素100 U/ml、链霉素100 U/ml）。THP-1细胞采用RPMI-1640培养基培养，并添加0.05 mM β-巯基乙醇。

Inosine is accumulated in EGFR-TKI resistant LUAD cells

为构建奥希替尼耐药模型，研究者对PC-9和H1975细胞进行梯度浓度药物暴露及长期处理，成功建立耐药细胞系（OR细胞）。这些细胞对奥希替尼及其他EGFR-TKIs（如吉非替尼、阿法替尼和BDTX-1535）的IC₅₀值显著升高。通过代谢组学分析，发现肌苷在耐药细胞、药物耐受持久细胞（DTP细胞）及临床残留肿瘤中明显累积。

Discussion

代谢重编程是肿瘤细胞的共性特征，而能量代谢是其核心。尽管肿瘤细胞通常依赖糖酵解，但研究表明耐药细胞（包括化疗耐药和TKI耐药）会转向氧化磷酸化（OXPHOS）供能。为应对治疗压力，癌细胞通过改变能量消耗模式适应逆境，其中肌苷累积通过激活A_2AR-cAMP-PKA-CREB通路促进OXPHOS和M2型巨噬细胞极化，驱动免疫抑制微环境。下调的PNP是肌苷累积的关键因素，过表达PNP可通过增加毒性代谢物（黄嘌呤、尿酸和ROS）逆转耐药性。靶向PNP或A_2AR（如临床抑制剂taminadenant）在类器官、CDX模型和自发肺癌小鼠模型中均显著增强EGFR靶向治疗效果。