热休克蛋白90（HSP90）家族介导非致死性热激增强克氏原螯虾血细胞对副溶血弧菌的免疫应答机制研究

本研究系统解析了克氏原螯虾（Procambarus clarkii）HSP90基因家族在非致死性热激（NLHS）和副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）感染中的免疫调控机制。通过基因组鉴定出4个具有功能分化的HSP90成员，揭示其通过Toll样受体（TLR）通路（TLR2/TRAF6/IRAK4/MyD88）协同先天免疫蛋白增强抗病原体响应，为甲壳类抗逆育种提供分子标记与理论范式。

　　

¹Highlight

通过全基因组筛选鉴定出4个PcHSP90基因家族成员

非致死性热激（NLHS）与副溶血弧菌感染显著诱导特定PcHSP90表达

PcHSP90与先天免疫蛋白互作并协同TLR通路成员

基因沉默证实PcHSP90调控TLR2/TRAF6/IRAK4/MyD88等免疫关键分子

研究为甲壳类抗逆育种提供新型分子标记

²Identification and molecular characterization analysis of PcHSP90 genes

通过系统性全基因组筛选，本研究鉴定出4个PcHSP90基因成员。其编码蛋白的氨基酸残基数介于177至730之间，分子量变幅为19.8 kDa至84.4 kDa。值得注意的是，理论等电点（pI）集中于4.87-8.52范围，这些电荷特性可能影响其在不同细胞区室中的定位与功能活性（表1）。

³Multiple sequence alignment and phylogenetic analysis

多重序列比对显示PcHSP90蛋白的ATP结合结构域（GxxGxG）和二聚化界面高度保守，而C端结构域呈现物种特异性变异。系统进化分析表明，PcHSP90成员与淡水螯虾进化枝聚集成簇，其中PcHSP90-1与罗氏沼虾MhHSP90α的亲缘关系最近（自举值98%），暗示其在甲壳类中具有功能保守性。

⁴Discussion

HSP90蛋白是一种广泛存在于生物体中的分子伴侣，在细胞周期调控、细胞存活、激素信号传导等过程中起重要作用。本研究首次在克氏原螯虾中揭示HSP90家族通过TLR通路介导"热激-免疫"交叉应答的分子机制：NLHS预处理通过诱导PcHSP90-2/3表达，促进血细胞识别副溶血弧菌病原相关分子模式（PAMPs），进而放大MyD88依赖的NF-κB信号通路级联反应。这种"免疫 priming 效应"为解释甲壳类温度适应性提供了新视角。