无需尿酸诱导的Delftia tsuruhatensis IICT-RSP4新型尿酸酶(EC 1.7.3.3)的分离纯化与特性研究及其生物技术应用潜力
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时间:2025年10月03日
来源:Antonie van Leeuwenhoek 1.8
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来自印度的研究人员针对尿酸酶(urate oxidase; EC 1.7.3.3)高效生产难题,开展新型酶源挖掘与特性研究。通过16S rRNA测序和全基因组分析鉴定Delftia tsuruhatensis IICT-RSP4菌株,采用硫酸铵沉淀和FPLC层析技术纯化获得比活性提升23.5倍的尿酸酶(40 U/ml),该酶分子量36 kDa,在pH 9.0、30°C和钴离子存在时活性最佳,为痛风治疗等生物医学应用提供了优质酶源。
科研人员从细菌菌株IICT-RSP4中成功分离并表征了一种无需尿酸诱导即可产生的新型尿酸酶(urate oxidase; EC 1.7.3.3)。通过16S rRNA测序和全基因组分析技术,该菌株被鉴定为Delftia tsuruhatensis IICT-RSP4。研究发现在所有测试条件下,葡萄糖(dextrose)和尿素(urea)分别是促进尿酸酶生产的最有效碳源和氮源。酶纯化过程采用硫酸铵沉淀结合尺寸排阻色谱与快速蛋白液相色谱(FPLC)联用技术,分子表征通过SDS–PAGE和ESI–LC–MS完成。实验结果显示:在pH 7.0、30°C的最适条件下,酶活性最高可达20.72 U/ml;纯化后酶活性从1.7 U/ml显著提升至40 U/ml,并测定其分子量约为36 kDa。生化特性分析表明,该酶在pH 9.0、30°C及钴离子(Co2+)存在时表现出最佳活性。这些发现证明Delftia tsuruhatensis IICT-RSP4是极具潜力的尿酸酶微生物来源,在生物技术领域具有重要应用价值。
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