埃塞俄比亚西北部贡达尔镇屠宰的家养反刍动物中弓形虫的血清学和分子检测

《Veterinary Medicine and Science》：Serological and Molecular Detection of Toxoplasma gondii Among Slaughtered Domestic Ruminants in Gondar Town, Northwest Ethiopia

本研究于2019-2020年在埃塞俄比亚贡达尔地区屠宰的家畜中，通过血清学（LAT）和分子检测（nPCR）评估弓形虫感染率，发现羊、山羊血清阳性率分别为62%和52.7%，牛为54.5%；nPCR特异性最高（83.9%），但阳性率仅10.6%。研究证实家畜感染弓形虫，建议加强防控。

　　在本文的研究中，探讨了在埃塞俄比亚的屠宰场中，通过血清学和分子学技术检测到的猫弓形虫（*Toxoplasma gondii*）感染情况。这项研究的目的在于比较这两种方法在检测猫弓形虫感染中的有效性，并识别与感染相关的风险因素。研究对象包括被屠宰的牲畜，如绵羊、山羊和牛，样本数量达到320份。研究结果表明，血清学检测的总体阳性率为56.2%，而第一轮PCR检测的阳性率为21.2%，第二轮PCR检测的阳性率则为10.6%。这些数据揭示了不同检测方法在敏感性和特异性上的差异，并且进一步分析了性别、年龄、品种和来源等风险因素对感染率的影响。

猫弓形虫是一种广泛分布的食源性寄生虫，能够感染人类、反刍动物、鸟类以及其他温血动物。该寄生虫的感染途径多样，包括食用未煮熟或生的肉类、摄入被猫粪便污染的食物或水、通过母体传染给胎儿，以及饮用未经巴氏杀菌的牛奶等。在健康人群中，感染通常无症状或仅表现为轻微症状，但在免疫功能低下的人群中，如HIV患者或器官移植接受者，猫弓形虫感染可能导致严重的继发感染，甚至死亡。因此，了解猫弓形虫在食物动物中的存在情况对于公共卫生和食品安全具有重要意义。

本研究中，血清学检测采用的是乳胶凝集试验（LAT），而分子学检测则使用了嵌套式聚合酶链式反应（nPCR）。这两种方法在检测感染情况上表现出不同的结果。例如，在绵羊中，通过LAT检测到的阳性率为62%，而通过第一轮PCR检测到的阳性率为34%，通过第二轮nPCR检测到的阳性率为20%。在山羊中，LAT的阳性率为52.7%，第一轮PCR为21.8%，第二轮nPCR为12.7%。而在牛中，LAT的阳性率为54.5%，第一轮PCR为9.1%，第二轮nPCR则为0%。这表明，nPCR相较于其他两种方法具有更高的特异性，能够更准确地识别感染情况。同时，血清学方法的敏感性更高，但特异性较低，容易出现假阳性结果。

进一步的统计分析表明，性别和年龄在绵羊和山羊中与猫弓形虫感染呈显著相关，而在牛中，品种和年龄是主要的影响因素。例如，成年绵羊比幼年绵羊更容易感染猫弓形虫，其感染风险是幼年绵羊的3.8倍。同样，成年山羊的感染风险比幼年山羊低，仅为幼年山羊的0.3倍。在牛的检测中，本地品种的感染率低于引进品种，而年龄较大的牛则比年轻的牛更容易感染。这些结果提示，猫弓形虫感染在不同动物群体中存在差异，这可能与它们的生活环境、饮食习惯、免疫状态以及暴露于感染源的频率有关。

在检测方法之间，研究发现存在一定程度的不一致。LAT与第一轮PCR之间存在“公平程度”的一致性（Kappa值为0.230），而第一轮PCR与nPCR之间则表现出“公平程度”的一致性（Kappa值为0.338）。相比之下，LAT与nPCR之间仅显示出“轻微程度”的一致性（Kappa值为0.101）。这些结果表明，虽然血清学方法在检测感染方面较为敏感，但其特异性较低，容易产生误判。而分子学方法，尤其是nPCR，因其更高的特异性，更适合用于确认感染的存在。然而，由于样本量有限，以及某些动物体内弓形虫的分布不均，可能导致了某些检测方法的假阴性或假阳性结果。

值得注意的是，nPCR方法虽然在特异性方面表现出色，但其灵敏度仍存在一定的局限性。这可能与样本采集时所用的组织量有关，因为较小的样本量可能影响检测结果的准确性。此外，研究中提到的分子检测方法，如PCR和nPCR，通常需要对目标基因进行特定设计，并且对实验条件和操作技术要求较高。这些因素可能影响检测的重复性和可靠性。

总体而言，研究结果表明，猫弓形虫在被屠宰的牲畜中广泛存在，尤其是在绵羊和山羊中。这一发现对食品安全和人类健康具有重要影响，因为这些动物的肉和乳制品是猫弓形虫传播的主要途径之一。因此，研究建议采取综合措施，包括改善卫生条件、加强动物检疫和加强公众教育，以降低猫弓形虫感染的风险。此外，由于不同地区、不同检测方法以及不同动物品种之间的感染率存在差异，未来的研究应进一步探讨这些变量对感染率的影响，并探索更有效的防控策略。

在伦理方面，研究遵循了动物福利和伦理审查委员会的指导原则，确保所有实验操作符合动物保护的相关规定。此外，研究团队在进行实验时采取了必要的措施，以减少对动物的不适和痛苦。研究结果的发布也得到了研究对象的知情同意，进一步保障了研究的伦理合规性。

综上所述，这项研究为理解猫弓形虫在埃塞俄比亚被屠宰牲畜中的流行情况提供了重要的数据支持。研究结果表明，尽管血清学检测在敏感性方面具有优势，但分子学方法，特别是nPCR，在特异性方面表现更优。因此，结合使用这两种方法可能更有利于准确诊断猫弓形虫感染。同时，研究也强调了在动物管理、环境控制和公共卫生措施方面的改进对于减少猫弓形虫传播的重要性。未来的研究可以进一步探讨不同寄生虫基因型的分布情况，以及这些基因型对感染率和临床表现的影响。这将有助于制定更精准的防控策略，并为人类和动物健康提供更全面的保护措施。